Гибридомная технологическая платформа

Alpha Lifetech имеет богатый опыт в области разработки антител. За эти годы Alpha Lifetech создала комплексную платформу разработки антител (включая разработку моноклональных антител, разработку поликлональных антител, разработку рекомбинантных моноклональных антител и другие услуги по подготовке и разработке антител).

Alpha Lifetech предоставляет клиентам продукты и услуги по антителам и рекомбинантным антителам гарантированного качества, а подготовленные антитела обладают высокой специфичностью и хорошей стабильностью. Можно использовать множество инструментов и оборудования для очистки антител из различных источников, таких как моноклональные антитела кролика, овцы, курицы, мыши, а также услуги по аффинной очистке белка A/G и услуги по разделению антител.

На основе различных методов подготовки антител, таких как технология гибридомных клеток, Alpha Lifetech может предоставлять индивидуальные услуги для моноклональных и поликлональных антител разных видов. Кроме того, может быть предоставлен ряд услуг от высокопроизводительного секвенирования, подготовки антител, очистки антител до проверки антител. Мы выберем метод очистки на основе конкретной цели клиента. На основе комплексных систем платформ, таких как платформа разработки антител и белковая платформа, Alpha Lifetech охватывает услуги по производству антител, обеспечивая очистку антител, высокопроизводительное секвенирование антител, проверку антител и другие технические услуги.

Технология гибридом

Технология гибридомы может быть использована для получения моноклональных антител. При слиянии клеток селезенки иммунизированных мышей с клетками миеломы людей или мышей образуются гибридомные клетки, которые секретируют специфические антитела. Сгенерированные мышиные моноклональные антитела могут быть использованы в научных исследованиях, таких как иммуноферментный анализ, радиоиммуноанализ, иммуногистохимия, проточная цитометрия, очистка белков и т. д. Образцы моноклональных антител включают асцит, супернатант гибридомы и т. д. Образец, полученный путем инъекции клеток гибридомы в брюшную полость животных и использования физиологической среды брюшной полости животного для получения антител, называется образцом асцита. Клетки гибридомы, введенные в брюшную полость животных, могут размножаться и секретировать моноклональные антитела, которые могут накапливаться в асците. Из-за возможности наличия примесей (животных белков, гормонов и т. д.) в этих антителах требуется очистка. На основе секреторной функции В-лимфоцитов моноклональные антитела часто секретируются в культуральную среду при культивировании гибридомных клеток. Жидкость, содержащая моноклональные антитела в культуральной среде, называется супернатантом гибридомы. Чистота моноклональных антител в супернатанте относительно высока, но для крупномасштабного приготовления требуется дополнительная очистка, поскольку они получены посредством культивирования in vitro.

Очистка антител позволяет изолировать высокочистые антитела из комплексов. В настоящее время очистка антител с помощью аффинности и разделение и очистка антител являются широко используемыми методами очистки антител, в основном включая очистку белков A/G, ионообменную хроматографию, гель-фильтрацию, осаждение и хроматографию гидрофобного взаимодействия. Среди них услуга очистки белков A/G с помощью аффинности широко популярна в различных приложениях по очистке антител. Процесс получения моноклональных антител Alpha Lifetech на основе гибридомной технологии показан на рисунке 1.

Рис.1 Схема процесса получения моноклональных антител на основе гибридомной технологии.

Технология конъюгата антитела с лекарственным средством и гибридомы

Конъюгат антитело-лекарство (ADC) — это новый биологический агент, который химически связывает антитела с цитотоксическими препаратами. Конъюгат антитело-лекарство сочетает в себе специфическую распознавательную способность антител с мощным убивающим эффектом цитотоксических препаратов и точно доставляет цитотоксические препараты в опухолевые клетки через антитела, тем самым достигая точного лечения. Часть антител в препаратах ADC часто готовится с помощью гибридомной технологии или других методов производства антител, таких как технология генной инженерии антител. Гибридомная технология обеспечивает высококачественное сырье антител для препаратов ADC. Препараты ADC и моноклональные антитела, полученные с помощью гибридомной технологии, играют важную роль в таких областях, как лечение рака. Их можно использовать по отдельности или в сочетании для повышения терапевтической эффективности.

Моноклональные антитела, полученные с помощью гибридомной технологии, обладают высокой специфичностью, могут точно связывать и распознавать специфические антигены и могут производиться в больших масштабах. Благодаря технологии секвенирования гибридом гены антител в клетках гибридомы могут быть извлечены и секвенированы для получения соответствующих последовательностей, что полезно для последующей экспрессии антител. Моноклональные антитела, полученные с помощью гибридомной технологии, могут быть использованы для обнаружения специфических маркеров заболеваний, таких как опухолевые маркеры, вирусные антигены и т. д., что обеспечивает надежную поддержку ранней диагностики заболеваний. Кроме того, их также можно использовать в таких экспериментах, как иммуноблоттинг и иммуногистохимия, для изучения экспрессии, локализации, структуры и функции белков.

Технология гибридомы Производство антител Служба Рабочий процесс

Шаги	Содержание услуги	Хронология
Шаг 1: Иммунизация животных	(1) Животное вакцинировано 4 раза, ревакцинировано 1 дозой, всего вакцинировано 5 доз. (2) Была собрана отрицательная сыворотка до иммунизации, и был проведен ИФА на четвертой дозе для определения титра сыворотки. (3) Если титр сывороточных антител четвертой дозы соответствует требованиям, то за 7 дней до забора крови вводится одна дополнительная доза иммунизации. Если он не соответствует требованиям, то продолжается плановая иммунизация. (4) Квалифицированная эффективность. Клетки селезенки изолируются для слияния клеток.	10-12 недель
Шаг 2: Слияние и скрининг	(1) Слияние: после иммунизации клетки селезенки мыши собирали и сливали с клетками миеломы. (2) Пролиферация и скрининг: полученные гибридомные клетки были подвергнуты пролиферации и скринингу методом ИФА для получения высокоэффективных клонов.	6 недель
Шаг 3: Субклонирование	Субклонирование 15-25 положительных материнских клеток с использованием метода ограниченного разведения и окончательное определение 10-15 положительных клонов.	3-4 недели
Шаг 4: Получение асцита и очистка антител	(1) Производство асцита: для производства асцита у мышей используют 10-15 штаммов гибридом (если получено большое количество штаммов гибридом, они будут отправлены в клеточной форме) (2) Идентификация асцита: ИФА-обнаружение асцита, активность (белок/вирус>10^5, малая молекула/пептид>10^4) для последующей очистки (3) Очистка белка A/G: Очистка асцита	3-4 недели
Шаг 5: Доставка	(1) Предоставьте 3–5 штаммов гибридомных моноклональных антител. (2) Каждая гибридомная клетка обеспечивает 1 мг очищенного антитела (очистка асцита). (3) Отчет об экспериментальном процессе	1 неделя

Преимущество гибридомной технологии

Alpha Lifetech имеет богатый опыт в области разработки антител. За эти годы Alpha Lifetech создала комплексную платформу разработки антител.

Множественные виды

Иммунитет может быть предоставлен различным животным, включая, помимо прочего, мышей, кроликов, овец и т. д.

Множественная цель

На основе гибридомной технологии доступны услуги по обнаружению антител к нескольким целевым объектам: белкам, пептидам, малым молекулам, вирусам, мембранным белкам, мРНК и т. д.

Записи прослеживаемости

Стандарты контроля качества QC (иммунная активность, контроль качества PBMC, контроль качества библиотеки и контроль качества проверки скрининга), английские экспериментальные отчеты, оригинальные экспериментальные записи

Персонализированная программа

Индивидуальная настройка программы для удовлетворения потребностей исследовательских проектов различных клиентов

Связанные УСЛУГИ

Стратегии разработки множественных антител

Служба разработки моноклональных антител

Гибридомная технологическая платформа

Платформа сортировки отдельных В-клеток

Платформа для разработки антител с фаговым дисплеем

разработка моноклональных антител-Alpha Lifetech

Служба разработки моноклональных антител

Мы можем предоставить услуги по разработке высококачественных, высокочистых и высокоспецифичных моноклональных антител, включая производство мышиных моноклональных антител и кроличьих моноклональных антител.