Введение. Библиотека наивных антител.

Библиотеки наивных антител создаются с использованием B-клеток неиммунизированных или здоровых доноров, обычно с упором на изотип IgM. Предполагается, что наивные библиотеки могут быть использованы для выделения моноклональных антител против любого антигена.

Наивный репертуар обладает уникальными преимуществами в генерации антител против целевых антигенов. Компания Alpha Lifetech может предложить нативные библиотеки антител (в форматах scFv, Fab, VHH и индивидуально подобранных) от животных-хозяев, таких как человек, коза, собака, курица, гусь, свинья, аллигатор, крупный рогатый скот, обезьяна, осёл, лошадь, страус, хомяк, кролик, верблюд и лама. Наша цель — понять и удовлетворить потребности различных клиентов и помочь в решении любых возникающих проблем в исследовательской работе.

Компания Alpha Lifetech может предоставить

Alpha Lifetech Inc.Мы можем предложить библиотеки наивных антител от неиммунизированных животных и людей, созданные на основе нашей отработанной технологии фагового дисплея.Компания Alpha Lifetech Inc.Команда разработчиков антител с гордостью сообщает о том, что мы можем разработать и создать библиотеку, содержащую 10^8 - 10^10 независимых клонов.

Сервис создания наивных библиотек антител

Библиотеки наивных антител были созданы путем использования естественного первичного (неселектированного) иммунного репертуара (неиммунизированных доноров) посредством клонирования антител, распознающих различные антигены. Перестроенные V-гены были амплифицированы методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) из мРНК В-клеток, кодирующих иммуноглобулин M (IgM), полученных от неиммунизированных доноров. Используя эту процедуру, антитела были получены до контакта с антигеном и не подвергались проверке на толерантность со стороны иммунной системы. Действительно, библиотека наивных антител представляет собой хороший источник антител против собственных, неиммуногенных и токсичных антигенов, если библиотека достаточно велика и разнообразна.

Для создания библиотеки антител большого размера,Alpha Lifetech Inc.В данной работе используется эффективная двухэтапная стратегия клонирования для создания фаговых библиотек антител, основанная на выделении рестрикционных фрагментов из плазмидных векторов вместо продуктов ПЦР. При расщеплении продуктов ПЦР рестрикционными сайтами, определяемыми олигонуклеотидным праймером, эффективность зависит от количества дополнительных нуклеотидов, добавленных к праймеру, но всегда низка по сравнению с расщеплением плазмидной ДНК. На первом этапе описанной процедуры первичные репертуары готовятся из продуктов ПЦР, кодирующих домены VH, Vκ и Vλ, что позволяет получить библиотеки типичного среднего размера (1–100 миллионов клонов). На втором этапе фрагменты VH выделяются путем расщепления плазмидной ДНК, очищенной из первичных репертуаров, и клонируются в акцепторный фагемидный вектор, содержащий репертуары легких цепей (LC). Это нововведение значительно увеличивает размер библиотек (10–100 миллиардов клонов).

На рисунке показана общая процедура разработки библиотек фагового дисплея наивных антител: мы собираем лимфоциты периферической крови (ЛППК) от неиммунизированных хозяев (человек, различные животные), выделяем интересующий нас ген антитела, затем клонируем его в фагемидный фрагмент гена и формируем библиотеку фагового дисплея со специфическим фрагментом антитела.

Почему выбирают нас?