Платформа для разработки антител с фаговым дисплеем

На основе комплексной системной платформы антител Alpha Lifetech может предоставлять технические услуги по подготовке антител, очистке антител, секвенированию антител и т. д.

СВЯЗАТЬСЯ С НАМИ

Платформа для разработки антител с фаговым дисплеем

Alpha Lifetech, с ее обширным опытом проектов по открытию антител, может предоставлять индивидуальные услуги по моноклональным и поликлональным антителам для нескольких видов, а также услуги по созданию и скринингу библиотек антител. Alpha Lifetech может предоставлять клиентам продукты антител и рекомбинантных антител гарантированного качества, а также соответствующие услуги по подготовке эффективных, высокоспецифичных и стабильных антител. Используя комплексные платформы антител и инженерию антител, мы предоставляем услуги, охватывающие как восходящий, так и нисходящий поток производства антител, включая технические услуги, такие как подготовка антител, очистка, секвенирование антител и валидация.

Alpha Lifetech имеет зрелую платформу обнаружения антител, которая предоставляет клиентам ряд услуг, включая иммунитет животных, создание и скрининг библиотеки антител с фаговым дисплеем, секвенирование антител, экспрессию антител, очистку антител, проверку антител и маркировку антител на основе технологии гибридом, технологию отдельных В-клеток, технологию фагового дисплея и многое другое. Alpha Lifetech имеет стандартную производственную линию, и в дополнение к услугам по подготовке антител также могут быть предоставлены вспомогательные услуги, такие как гуманизация антител, созревание аффинности антител, проектирование и разработка лекарств ADC и последующее проектирование последовательности CAR-T. В то же время Alpha Lifetech создала библиотеку антител на основе платформ технологии фагового дисплея M13, T4 и T7 с емкостью хранения до 10^8-10^9. Положительный показатель, показатель вставки и разнообразие библиотеки могут достигать более 90%.

Технология фагового дисплея

Производство моноклональных антител изначально было подготовлено с использованием технологии гибридомных моноклональных антител для получения мышиных гибридомных моноклональных антител. В частности, путем слияния клеток селезенки иммунизированных мышей с клетками миеломы людей или мышей образуются гибридомные клетки, которые секретируют специфические гибридомные моноклональные антитела. Путем гуманизированной модификации мышиных моноклональных антител и генно-инженерной модификации антител для придания им постоянного региона человеческого иммуноглобулина можно снизить их иммуногенность. Инженерия моноклональных антител широко используется в биомедицинских и клинических приложениях.

Alpha Lifetech может предоставить комплексные услуги по разработке антител от разработки протокола доклинических исследований до открытия конъюгатов антител и лекарственных препаратов (ADC) и проверки на животных. Конъюгаты антител и лекарственных препаратов (ADC) могут доставлять химиотерапевтические препараты в раковые клетки. После связывания с определенными мишенями, экспрессируемыми на раковых клетках, ADC высвобождает цитотоксические препараты в раковые клетки. Alpha Lifetech также может предоставить клиентам комплексные услуги по созреванию аффинности антител. Благодаря передовой оптимизации мутаций и высокопроизводительной технологии скрининга фагового дисплея сначала скринируются антитела с определенной аффинностью, а затем вводятся аминокислотные мутации для создания различных вариантов. Впоследствии высокоаффинные антитела были оценены и скринированы с использованием методов скрининга. После нескольких раундов оптимизации и структурного анализа в конечном итоге были получены антитела с более высокой аффинностью и более сильной специфичностью.

Alpha Lifetech может создавать различные типы библиотек фагового дисплея антител, включая иммунные библиотеки, нативные библиотеки, полусинтетические библиотеки и синтетические библиотеки. На основе высокой емкости библиотек антител можно получать высокоспецифичные антитела. Могут быть предоставлены множественные фагмидные векторы, такие как pMECS, pComb3X и pCANTAB 5E, а также штаммы, такие как TG1 E. coli, XL1 Blue и ER2738. В дополнение к емкости библиотеки до 10^9, скорость вставки целевых фрагментов библиотеки также высока, что создает достаточные условия для скрининга антител, которые удовлетворяют клиентов. Блок-схема услуги по подготовке антител Alpha Lifetech на основе технологии фагового дисплея представлена на рисунке 1.

Рис.1 Схема процесса получения моноклональных антител на основе технологии фагового дисплея.

Рабочий процесс производства антител с помощью фагового дисплея

Шаги	Содержание услуги	Хронология
Шаг 1: Иммунизация животных	(1) Животное вакцинировано 4 раза, ревакцинировано 1 дозой, всего вакцинировано 5 доз. (2) Была собрана отрицательная сыворотка до иммунизации, и был проведен ИФА на четвертой дозе для определения титра сыворотки. (3) Если титр сывороточных антител четвертой дозы соответствует требованиям, то за 7 дней до забора крови вводится одна дополнительная доза иммунизации. Если он не соответствует требованиям, то продолжается плановая иммунизация. (4) Квалифицированная эффективность, сбор крови и разделение моноцитов	10 недель
Шаг 2: Подготовка кДНК	(1) Извлечение общей РНК из PBMC (набор для извлечения РНК) (2) Высокоточная подготовка ОТ-ПЦР кДНК (набор для обратной транскрипции)	1 день
Шаг 3: Создание библиотеки антител	(1) Используя кДНК в качестве матрицы, гены были амплифицированы с помощью двух раундов ПЦР. (2) Конструирование и трансформация фага: вектор фагмиды для сплайсинга генов, электропорационная трансформация бактерий-хозяев TG1, конструирование библиотеки антител. (3) Идентификация: случайным образом выбирают 24 клона, положительный результат ПЦР-идентификации + показатель вставки. (4) Вспомогательная подготовка фага: амплификация+очистка фага М13. (5) Спасение библиотеки фагового дисплея	3-4 недели
Шаг 4: Скрининг библиотеки антител (3 раунда)	(1) Стандартный трехэтапный скрининг (твердофазный скрининг): скрининг под давлением для максимально возможного удаления неспецифических антител. (2) Амплификация одного клона выбранного бактериофага + экспрессия, индуцированная IPTG + ИФА-обнаружение положительных клонов. (3) Все положительные клоны были отобраны для секвенирования генов.	4-5 недель

Преимущество технологии фагового дисплея

Alpha Lifetech имеет богатый опыт в области разработки антител. За эти годы Alpha Lifetech создала комплексную платформу разработки антител.

Службы поддержки

Мы можем предоставить различные услуги по созданию иммунной библиотеки на основе животных и услуги по скринингу библиотеки природных антител в соответствии с потребностями клиентов.

Множественная цель

Доступны услуги по обнаружению антител к нескольким целевым объектам: белкам, пептидам, малым молекулам, вирусам, мембранным белкам, мРНК и т. д.

Множественные векторы

Персонализированная услуга по созданию библиотеки: мы можем предоставить различные векторы бактериофагов, включая PMECS, pComb3X и pCANTAB 5E, и модифицировать их в соответствии с потребностями клиента.

Зрелая платформа

Емкость хранения может достигать 10^8-10^9, скорость вставки превышает 90%, а аффинность антител, полученных в результате скрининга, обычно находится на уровне нМ-пМ.

Связанные УСЛУГИ

Стратегии разработки множественных антител

Служба разработки моноклональных антител

Гибридомная технологическая платформа

Платформа сортировки отдельных В-клеток

Платформа для разработки антител с фаговым дисплеем

разработка моноклональных антител-Alpha Lifetech

Служба разработки моноклональных антител

Мы можем предоставить услуги по разработке высококачественных, высокочистых и высокоспецифичных моноклональных антител, включая производство мышиных моноклональных антител и кроличьих моноклональных антител.

Гибридомная технологическая платформа

Включая программу иммунизации, услуги по подготовке антител, очистку антител, высокопроизводительное секвенирование антител, проверку антител и т. д.

Платформа сортировки отдельных В-клеток

Alpha Lifetech имеет преимущества во времени скрининга и получении высококачественных антител. Он может обеспечить разработку, синтез и модификацию антигена, иммунитет животных, скрининг обогащения отдельных В-клеток, секвенирование отдельных клеток.