Платформа для создания пептидных библиотек на основе фагового дисплея

Компания Alpha Lifetech обладает рядом технологий создания пептидных библиотек. В основном мы предоставляем услуги по созданию пептидных библиотек T7 и M13 в зависимости от типа фага; мы также предлагаем услуги по созданию пептидных библиотек с линейной петлей 7 и 12 в зависимости от размера последовательности пептидных молекул и т.д. Кроме того, мы предоставляем услуги по созданию пептидных библиотек на заказ. Мы также предлагаем услуги по синтезу и созданию пептидов на заказ.

Технология фагового дисплея — это метод, позволяющий наносить функциональные экзогенные пептиды на поверхность капсида фага, при этом структурная и функциональная активность экзогенного белка или пептида не влияет на способность рекомбинантного фага инфицировать клетку-хозяина. Каждая вирусная частица фага может отображать на своей поверхности только один случайный экзогенный пептид, а совокупность всех фагов, отображающих различные пептиды, образует пептидную библиотеку фагового дисплея. Пептидные библиотеки фагового дисплея являются мощными инструментами для экспрессии множества синтезированных на заказ пептидов и специфического скрининга пептидов и широко используются в области анализа антигенных эпитопов, скрининга лекарственных препаратов и разработки вакцин.

Введение в создание библиотеки пептидов

Создание пептидных библиотек заключается в амплификации пептидных библиотек путем лигирования пептидных ДНК-последовательностей в различных форматах с соответствующими последовательностями белков оболочки фага и использовании рекомбинации фага для отбора целевого пептида на поверхности фага. Создание пептидных библиотек на основе технологии фагового дисплея относится к категории биосинтеза пептидов, и на рынке существуют методы жидкофазного и твердофазного синтеза пептидов. В настоящее время компания Alpha Lifetech предлагает различные технологии создания пептидных библиотек, которые позволяют создавать как готовые, так и рандомизированные пептидные библиотеки в соответствии с размером последовательности пептидных молекул, включая создание 7-пептидных библиотек, 12-пептидных библиотек, 15-пептидных библиотек, циклических 7-пептидных библиотек и циклических 12-пептидных библиотек, а также может быть адаптировано для синтеза пептидных библиотек различных типов и применений.

Применение методов конструирования и скрининга пептидных библиотек.

Рандомизированные пептидные библиотеки, созданные с помощью технологии фагового дисплея, обеспечивают функциональный доступ к пептидам и создают физическую связь между фенотипом (экспонируемый пептид) и генотипом (кодируемая ДНК); эти библиотеки подходят для процессов скрининга, которые отделяют связанные клоны от несвязанных клонов путем аффинной очистки. Пептидные библиотеки, созданные с помощью фагового дисплея, могут быть использованы для (i) характеристики иммунных клеточных эпитопов, (ii) скрининга биоактивных пептидов, связанных с рецепторами или белками, пептидов, связанных с небелковыми мишенями, клеточно- или органоспецифических пептидов и т. д., и (iii) разработки систем доставки лекарств с помощью пептидов.

Процесс создания пептидной библиотеки методом фагового дисплея

Рис. 1. Платформа для создания пептидной библиотеки методом фагового дисплея.

Процесс создания библиотеки пептидов на основе фагового дисплея

Процесс	Содержание сервиса	Хронология
1. Синтез нуклеотидной последовательности	Случайный синтез нуклеотидных последовательностей заданной заказчиком длины.	2-3 недели
2. Полимеризация и переваривание	Полимеризация и расщепление синтезированной последовательности ДНК	1 день
3. Создание библиотек электропреобразования	Были созданы бактерии-хозяева ER2738, после чего бактерии E. coli были трансформированы с помощью хорошо сконструированной рекомбинантной плазмиды.	1 неделя
4. Определение размера и разнообразия пептидной библиотеки	Определение размера библиотеки пептидов методом подсчета колоний и разнообразия библиотеки пептидов методом секвенирования.	2-3 дня
5. Создание библиотеки пептидов на основе фагового дисплея.	Путем заражения библиотеки упаковочных пептидов фага	1 неделя