Платформа для построения библиотеки пептидов фагового дисплея

Alpha Lifetech имеет ряд технологий построения пептидных библиотек. В основном мы предоставляем услуги по построению библиотеки пептидов T7 и M13 в соответствии с типами фагов; мы предоставляем услуги по построению библиотеки пептидов линейной петли 7 и 12 в соответствии с размером последовательности молекул пептидов и т. д. Мы также предоставляем услуги по построению библиотек пептидов по индивидуальному заказу. Мы также предоставляем услуги по синтезу и построению пептидов по индивидуальному заказу.

Технология фагового дисплея как метод панорамирования функциональных экзогенных пептидов в фаге на поверхность капсида, поддержание структурной и функциональной активности экзогенного белка или пептида не влияет на способность рекомбинантного фага инфицировать клетку-хозяина. Каждая вирусная частица фага может отображать только один экзогенный случайный пептид на своей поверхности, а коллекция всех фагов, отображающих различные пептиды, составляет библиотеку пептидов фагового дисплея. Библиотеки пептидов фагового дисплея являются мощными инструментами для экспрессии нескольких синтезированных на заказ пептидов и специфического скрининга пептидов и широко используются в областях анализа антигенных эпитопов, скрининга лекарственных средств и разработки вакцин.

Введение в построение пептидной библиотеки

Создание пептидной библиотеки заключается в амплификации пептидных библиотек путем лигирования последовательностей пептидной ДНК в различных форматах с соответствующими последовательностями белков оболочки фага и использования повторной сборки фага для панорамирования целевого пептида на поверхность фага. Создание пептидной библиотеки на основе технологии фагового дисплея относится к категории биосинтеза пептидного синтеза, и на рынке существуют методы жидкофазного пептидного синтеза и твердофазного пептидного синтеза. В настоящее время Alpha Lifetech имеет множество технологий создания пептидной библиотеки, которые могут предоставлять готовые пептидные библиотеки и рандомизированные пептидные библиотеки в соответствии с размером последовательности пептидных молекул, включая создание 7-пептидной библиотеки, создание 12-пептидной библиотеки, создание 15-пептидной библиотеки, создание циклической 7-пептидной библиотеки и создание циклической 12-пептидной библиотеки, а также может быть настроено для синтеза пептидных библиотек для различных типов и применений.

Применение построения и скрининга пептидной библиотеки

Рандомизированные библиотеки пептидов с помощью технологии фагового дисплея обеспечивают функциональный доступ к пептидам и обеспечивают физическую связь между фенотипом (отображаемым пептидом) и генотипом (кодируемой ДНК); эти библиотеки подходят для процессов скрининга, которые отделяют связанные клоны от несвязанных клонов с помощью аффинной очистки. Библиотеки пептидов, отображаемых с помощью фага, могут использоваться для (i) характеристики иммунных клеточных эпитопов (ii) скрининга биоактивных пептидов, связанных с рецепторами или белками, пептидов, связанных с небелковыми мишенями, пептидов, специфичных для клеток или органов, и т. д. и (iii) разработки систем доставки лекарств, опосредованных пептидами.

Процесс создания библиотеки пептидов на фаговом дисплее

Рис.1 Платформа для построения библиотеки пептидов фагового дисплея

Рабочий процесс создания библиотеки пептидов фагового дисплея

Процесс	Содержание услуги	Хронология
1. Синтез нуклеотидной последовательности	Случайный синтез нуклеотидных последовательностей заданной заказчиком длины	2-3 недели
2. Полимеризация и расщепление	Полимеризация и расщепление синтезированной последовательности ДНК	1 день
3. Строительство библиотек электропреобразования	Были сконструированы бактерии-хозяева ER2738, а затем E. coli была трансформирована хорошо сконструированной рекомбинантной плазмидой.	1 неделя
4. Размер пептидной библиотеки и обнаружение разнообразия	Определение размера библиотеки пептидов путем подсчета колоний и разнообразия библиотеки пептидов путем секвенирования	2-3 дня
5. Создание библиотеки пептидов фагового дисплея	Заражая фаговую упаковочную пептидную библиотеку	1 неделя