Платформа библиотеки пептидов фагового дисплея
На основе технологии фагового дисплея Alpha Lifetech может предоставить клиентам высококачественные услуги по созданию и скринингу библиотек пептидов фагового дисплея, включая библиотеки линейных 7 пептидов, библиотеки линейных 9 пептидов, библиотеки линейных 10 пептидов, библиотеки линейных 15 пептидов, библиотеки линейных 12 пептидов, библиотеки циклических 7 пептидов и другие библиотеки пептидов. Разнообразие библиотек, скорость вставки, положительный процент могут достигать более 90%, что позволяет удовлетворить различные потребности различных клиентов в библиотеках пептидов фагового дисплея.
Библиотеки фагового дисплея широко используются в биомедицинских исследованиях и приложениях. Например, в инженерии антител и разработке антител библиотеки фагового дисплея могут использоваться для скрининга и улучшения вариантов антител; в скрининге лекарств и обнаружении мишеней для лекарств библиотеки фагового дисплея могут использоваться для поиска белков или пептидов с лекарственным потенциалом. В исследовании вакцин библиотека фагового дисплея может использоваться для выбора вакцинного антигена и разработки вакцины. Кроме того, библиотеки фагового дисплея могут также использоваться во многих областях, таких как исследование взаимодействия белков, диагностика и лечение рака.
Технология отображения фагов
Технология фагового дисплея — это технология, которая объединяет ген целевого белка с геном поверхностного белка фага и делает целевой белок присутствующим на поверхности фага в форме белка слияния посредством экспрессии гена. Эти белки, отображаемые на поверхности фага, могут поддерживать относительную пространственную структуру и биологическую активность, и могут быть проверены, обнаружены и распознаны путем взаимодействия со специфическими антителами или другими молекулами. Объектами отображения технологии фагового дисплея являются антитело, фрагмент антитела, сегмент пептида, кДНК и т. д.
Система технологии фагового дисплея в основном включает в себя систему отображения фага M13 (такую как система отображения PⅢ, система отображения PⅧ и т. д.), систему отображения фага λ, систему отображения фага T4, систему отображения фага T7 и т. д. Каждая из этих систем имеет свои собственные характеристики и подходит для различных исследовательских нужд. Фаг M13, благодаря своим лизогенным свойствам, фаг M13 не лизирует клетку-хозяина после ее заражения, что позволяет ему непрерывно реплицироваться и экспрессировать чужеродные фрагменты внутри клетки-хозяина, что подходит для долгосрочного скрининга и стабильной экспрессии. Благодаря своему короткому жизненному циклу и высокой эффективности репликации фаг T7 может быстро производить большое количество потомственных фагов, что подходит для высокопроизводительного скрининга и быстрой экспрессии.
Фаг М13 | Фаг Т7 | |
---|---|---|
1. Морфологическая структура | Нитчатый фаг | Полиэдральный фаг |
2. Генетический материал | Кольцевая одноцепочечная молекула ДНК | Линейная, двухцепочечная, терминально избыточная ДНК |
3. Репликация и заражение | Лизогенные фаги, собранные в периплазме, могут секретироваться из бактериальных мембран без лизиса клеток хозяина. | Вирулентные фаги, потомки фагов, собранные в цитоплазме бактерий, высвобождаются путем лизиса клеточной мембраны. |
4. Система отображения | Была создана дисплейная система с использованием капсидных белков pIII и PVIII, подходящая для отображения чужеродных пептидов/белков разных размеров. | Система отображения построена на основе капсидного белка 10B, который не требует процесса секреции и подходит для отображения пептидов/белков, оказывающих ингибирующее действие на процесс секреции. |
5. Преимущество применения | Подходит для отображения и долгосрочного скрининга низкомолекулярных пептидов. | Его преимущества заключаются в быстрой экспрессии и высокопроизводительном скрининге макромолекулярных белков. |
Типы библиотек пептидов фагового дисплея
Alpha Lifetech имеет опыт в создании и скрининге пептидных библиотек фагового дисплея и имеет на выбор множество типов пептидных библиотек. В зависимости от длины пептида его можно разделить на 7 пептидных библиотек, 9 пептидных библиотек, 10 пептидных библиотек, 12 пептидных библиотек и 15 пептидных библиотек. В зависимости от пространственной конформации полипептидов его можно разделить на линейную фаговую пептидную библиотеку и циклическую фаговую пептидную библиотеку.
Линейная фаговая пептидная библиотека
Ген пептида вставляется в область кодирования белка оболочки генома фага, обычно pIII или PVIII, и отображается в виде линейной прямой цепи. Линейные пептиды с линейной цепью могут легко деградировать in vivo, и их связывающая способность и стабильность могут быть затронуты.
библиотека циклических фаговых пептидов
Модифицированный кольцевой пептид будет образовывать фиксированную конформацию под действием дисульфидных связей или других связывающих связей, что не только значительно улучшит метаболическую стабильность и биодоступность, но и лучше будет соответствовать требованиям связывания конформации рецептор-лиганд (антитело-антиген).
Процесс создания библиотеки пептидов на фаговом дисплее
Выбор фагов
В качестве носителей обычно выбирают фаги типа М13 или фаги типа Т7.
Фаговый дисплей пептидная библиотека Строительство
Сконструировать фаговый вектор, способный содержать последовательность кодирования чужеродного белка или полипептида, которая обычно включает промотор, селективные маркеры и соответствующие регуляторные элементы. Вставка кодирующей последовательности чужеродного белка или пептида в носитель фага, обычно с помощью методов разрезания рестриктазой и лигирования. Сконструированный фаговый вектор трансформируется в клетку-хозяина, позволяя фагу реплицировать и экспрессировать чужеродные белки или пептиды внутри клетки. Фаговые библиотеки, содержащие несколько различных чужеродных белков или пептидов, готовятся путем обширной трансформации и амплификации.
фаговый дисплей пептидная библиотека скрининг
Зафиксируйте целевые молекулы (такие как белки, рецепторы или антитела) на твердофазном носителе. Инкубируйте сконструированную библиотеку пептидов фагового дисплея с фиксированной мишенью, чтобы пептиды на фаге связались с целевой молекулой. Во время этого процесса несвязанные бактериофаги удаляются промывкой, при этом сохраняются бактериофаги, которые связываются с мишенью, а связанные с высокой аффинностью бактериофаги элюируются. Восстановленные бактериофаги амплифицируются путем инфицирования Escherichia coli, а затем подвергаются следующему раунду скрининга. Обычно требуется 3-5 раундов скрининга, чтобы получить пептиды с высокой эффективностью связывания.
Разработка и синтез пептидов
Синтезировать пептиды на основе сайтов скрининга.

Рис.1 Процесс создания и скрининга библиотеки пептидов фагового дисплея

Платформа для построения библиотеки пептидов фагового дисплея
Alpha Lifetech имеет ряд технологий построения пептидных библиотек. Мы в основном предоставляем услуги по построению пептидных библиотек T7 и M13 в соответствии с типами фагов.
ЧИТАТЬ ДАЛЕЕ
Платформа скрининга библиотеки пептидов с фаговым дисплеем
Компания Alpha Lifetech имеет богатый опыт в скрининге пептидных фаговых библиотек, обеспечивая мощную техническую поддержку для разработки низкомолекулярных лекарственных препаратов, клинической диагностики, лечения заболеваний и биологических исследований.
ЧИТАТЬ ДАЛЕЕ Если у вас возникнут какие-либо вопросы, пожалуйста, обращайтесь к нам в любое время.
Leave Your Message
0102