Платформа для создания пептидных библиотек на основе фагового дисплея
Компания Alpha Lifetech, используя технологию фагового дисплея, может предоставлять клиентам высококачественные услуги по созданию и скринингу пептидных библиотек на основе фагового дисплея, включая библиотеки линейных 7-пептидов, 9-пептидов, 10-пептидов, 15-пептидов, 12-пептидов, циклических 7-пептидов и другие пептидные библиотеки. Разнообразие библиотек, процент вставки и процент положительных результатов могут достигать более 90%, что позволяет удовлетворить различные потребности клиентов в пептидных библиотеках на основе фагового дисплея.
Библиотеки фагового дисплея широко используются в биомедицинских исследованиях и приложениях. Например, в инженерии и разработке антител библиотеки фагового дисплея могут использоваться для скрининга и улучшения вариантов антител; в скрининге лекарств и поиске мишеней для лекарств библиотеки фагового дисплея могут использоваться для поиска белков или пептидов с потенциалом лекарственного средства. В исследованиях вакцин библиотеки фагового дисплея могут использоваться для отбора антигенов вакцин и разработки вакцин. Кроме того, библиотеки фагового дисплея могут также использоваться во многих областях, таких как исследование белковых взаимодействий, диагностика и лечение рака.
Технология фагового дисплея
Технология фагового дисплея — это технология, при которой ген целевого белка сливается с геном поверхностного белка фага, и целевой белок, присутствующий на поверхности фага, образуется в виде гибридного белка посредством экспрессии гена. Эти белки, отображаемые на поверхности фага, сохраняют относительную пространственную структуру и биологическую активность, а также могут быть обнаружены, распознаны и идентифицированы путем взаимодействия со специфическими антителами или другими молекулами. Объектами отображения в технологии фагового дисплея могут служить антитела, фрагменты антител, пептидные сегменты, кДНК и т. д.
Система фагового дисплея в основном включает в себя систему фагового дисплея M13 (например, системы дисплея PⅢ, PⅧ и др.), систему фагового дисплея λ, систему фагового дисплея T4, систему фагового дисплея T7 и др. Каждая из этих систем имеет свои особенности и подходит для различных исследовательских задач. Фаг M13, благодаря своим лизогенным свойствам, не вызывает лизис клетки-хозяина после заражения, что позволяет ему непрерывно реплицироваться и экспрессировать чужеродные фрагменты внутри клетки-хозяина, что подходит для долговременного скрининга и стабильной экспрессии. Благодаря короткому жизненному циклу и высокой эффективности репликации, фаг T7 может быстро производить большое количество потомков, что подходит для высокопроизводительного скрининга и быстрой экспрессии.
| Фаг М13 | Фаг Т7 | |
|---|---|---|
| 1. Морфологическая структура | Нитевидный фаг | Многогранный фаг |
| 2. Генетический материал | Кольцевая одноцепочечная молекула ДНК | Линейная, двухцепочечная, концевая избыточная ДНК |
| 3. Репликация и инфицирование | Лизогенные фаги, собранные в периплазме, могут секретироваться из бактериальных мембран, не вызывая лизиса клеток хозяина. | Вирулентные фаги, потомство фагов, собравшихся в цитоплазме бактерий, высвобождаются путем лизиса клеточной мембраны. |
| 4. Система отображения | Была создана система отображения с использованием капсидных белков pIII и PVIII, подходящая для отображения чужеродных пептидов/белков различных размеров. | Система отображения построена на основе капсидного белка 10B, который не требует процесса секреции и подходит для отображения пептидов/белков, оказывающих ингибирующее действие на процесс секреции. |
| 5. Преимущества применения | Он подходит для демонстрации и долговременного скрининга пептидов с малыми молекулами. | Этот метод обладает преимуществами в быстрой экспрессии и высокопроизводительном скрининге макромолекулярных белков. |
Типы пептидных библиотек фагового дисплея
Компания Alpha Lifetech имеет опыт в создании и скрининге пептидных библиотек методом фагового дисплея и предлагает широкий выбор типов пептидных библиотек. В зависимости от длины пептида, они подразделяются на 7-пептидные, 9-пептидные, 10-пептидные, 12-пептидные и 15-пептидные библиотеки. В зависимости от пространственной конформации полипептидов, они делятся на линейные и циклические фаговые пептидные библиотеки.
Библиотека линейных фаговых пептидов
Ген пептида встраивается в кодирующую область белка оболочки генома фага, обычно pIII или PVIII, и представляет собой линейную прямую цепь. Линейные цепные пептиды могут легко разрушаться in vivo, что может повлиять на их связывающую способность и стабильность.
библиотека циклических фаговых пептидов
Модифицированный кольцевой пептид под действием дисульфидных или других связывающих связей образует фиксированную конформацию, что не только значительно повышает метаболическую стабильность и биодоступность, но и лучше соответствует требованиям связывания рецептор-лиганд (антитело-антиген) в конформации.
Процесс создания пептидной библиотеки методом фагового дисплея
Отбор фагов
В качестве носителей обычно выбирают фаги типа M13 или фаги типа T7.
Создание библиотеки пептидов для фагового дисплея
Создание фагового вектора, способного содержать кодирующую последовательность чужеродного белка или полипептида, обычно включающую промотор, селективные маркеры и соответствующие регуляторные элементы. Вставка кодирующей последовательности чужеродного белка или пептида в фаговый носитель, обычно с помощью методов разрезания рестрикционными ферментами и лигирования. Созданный фаговый вектор трансформируется в клетку-хозяина, позволяя фагу реплицироваться и экспрессировать чужеродные белки или пептиды внутри клетки. Фаговые библиотеки, содержащие множество различных чужеродных белков или пептидов, создаются путем обширной трансформации и амплификации.
скрининг пептидной библиотеки с использованием фагового дисплея
Целевые молекулы (такие как белки, рецепторы или антитела) фиксируются на твердофазном носителе. Созданная библиотека пептидов для фагового дисплея инкубируется с фиксированной целевой молекулой, чтобы пептиды на фаге могли связываться с целевой молекулой. В ходе этого процесса несвязанные бактериофаги удаляются путем промывки, при этом сохраняются бактериофаги, связывающиеся с целевой молекулой, а бактериофаги с высокой аффинностью связывания элюируются. Выделенные бактериофаги амплифицируются путем заражения Escherichia coli, а затем подвергаются следующему раунду скрининга. Обычно требуется 3-5 раундов скрининга для получения пептидов с высокой эффективностью связывания.
Разработка и синтез пептидов
Синтез пептидов на основе участков скрининга.

Рис. 1. Процесс создания и скрининга пептидной библиотеки с использованием фагового дисплея.

Платформа для создания пептидных библиотек на основе фагового дисплея
Компания Alpha Lifetech предлагает ряд технологий для создания пептидных библиотек. В основном мы предоставляем услуги по созданию пептидных библиотек T7 и M13 в зависимости от типа фага.
ЧИТАТЬ ДАЛЕЕ
Платформа для скрининга пептидных библиотек с использованием фагового дисплея
Компания Alpha Lifetech обладает богатым опытом в области скрининга пептидных фаговых библиотек, предоставляя мощную техническую поддержку для разработки лекарственных препаратов на основе малых молекул, клинической диагностики, лечения заболеваний и биологических исследований.
ЧИТАТЬ ДАЛЕЕ Если у вас возникнут какие-либо вопросы, пожалуйста, не стесняйтесь обращаться к нам в любое время.
Leave Your Message
0102





