Система отображения фагов

Компания Alpha Lifetech создала идеальную и стабильную систему отображения фагов, которая экономит время научных исследований или проектных исследований и облегчает последующее производство.

СВЯЗАТЬСЯ С НАМИ

Система отображения фагов

Alpha Lifetech много лет глубоко вовлечена в технологию фагового дисплея. Alpha Lifetech создала идеальную стабильную платформу технологии фагового дисплея, которая экономит время на научные исследования или проектные исследования и облегчает последующее производство. У нас есть несколько систем фагового дисплея, доступных для выбора клиентами, включая системы отображения фага M13, фага T7, фага T4 и λ. В зависимости от ваших экспериментальных потребностей вы можете выбрать подходящую систему фагового дисплея. Alpha Lifetech также может предоставлять клиентам такие услуги, как производство антител vhh, производство антител scfv и производство антител Fab.

Введение в фаговый дисплей

Технология фагового дисплея — это метод, который использует фаги (вирус, который заражает бактерии) для поиска функциональных связывающих молекул определенных белков или пептидов. Методы построения фаговой библиотеки антител включают построение библиотеки антител Fab, построение библиотеки антител scFv, построение библиотеки антител vhh и т. д. В зависимости от типов бактериофагов их можно разделить на бактериофаг m13, бактериофаг T7, бактериофаг T4, бактериофаг λ и другие бактериофаги. В зависимости от типа библиотеки ее можно разделить на библиотеку случайных пептидов, библиотеку кДНК, библиотеку антител и библиотеку белков. Технология фагового дисплея проста в эксплуатации и недорога в использовании, она содержит дисплей фага Fab, дисплей фага scfv, дисплей фага vhh. Однако этот метод ограничивает разнообразие молекулярной генетики в библиотеке, которая не может выражать слишком длинные последовательности.

Технология фагового дисплея позволяет сформировать физическую связь между отображаемой молекулой и последовательностью ДНК, кодирующей отображаемую молекулу, а аминокислотную последовательность конкретного конъюгата можно мгновенно определить путем секвенирования ДНК нужного фрагмента в геноме фага.

В настоящее время широко используется технология фагового дисплея. Среди них можно отметить значительные достижения в исследовании и разработке новых вакцин (недорогих и эффективных синтетических вакцин), разработке препаратов антител (скрининг ингибиторов ферментов), трансдукции клеточного сигнала (скрининг моделируемых эпитопов), исследовании эпитопов антигенов (получение моноклональных антител).

Принцип фагового дисплея

Фаговый дисплей — это молекулярная технология, основанная на генетической модификации ДНК фага, которая связывает целевой фрагмент с белком оболочки фага и таким образом экспрессирует его на поверхности фага. Чужеродная последовательность ДНК вводится в определенное место в нуклеотидной последовательности генома фага, кодирующей белок оболочки фага (рис.1).

При заражении фагом ген фага начинает экспрессироваться в бактериальном хозяине, а вставленный целевой фрагмент отображается на поверхности фага в виде комбинации родственного гена, кодирующего белок оболочки, и клонированной последовательности.

Рис.1 Архитектура вириона бактериофага М13 и принцип работы технологии фагового дисплея.(Источник ссылки:Фаговый дисплей и другие технологии отображения пептидов | Обзоры микробиологии FEMS | Oxford Academic (oup.com))

Системы отображения фагов

Нитчатые фаги являются наиболее часто используемой системой отображения фагов, и системы отображения фагов могут быть сконструированы с использованием других фагов. Такие системы могут отображать относительно большие пептиды или скрининговые библиотеки кДНК более эффективно, чем системы на основе нитчатых фагов.

Рис.2 Типы бактериофагов, используемых в фаговом дисплее.(Источник ссылки:Фаговый дисплей и другие технологии отображения пептидов | Обзоры микробиологии FEMS | Oxford Academic (oup.com))

Преимущество системы фагового дисплея

Системы отображения фагов обычно используют нитевидные фаги, включая M13, fd и f1. По сравнению с фагами M13, фаги бактериофага T7 состоят из двухцепочечной ДНК, которая проявляет большую стабильность и менее подвержена мутациям во время репликации. Фаг T7, как носитель, быстро растет и может образовывать бляшки в течение 3 часов, что экономит много времени на клонирование и скрининг.

Конструирование библиотеки фага T7 использовалось для поверхностной и неповерхностной экспрессии генов и для конструирования библиотек отображения пептидов, кДНК, геномной ДНК и антител. Это позволяет использовать фаг T7 не только как антимикробный агент, но и для скрининга целевых препаратов в скрининге целевых органов (таких как мозг, печень и легкие), скрининга целевых антител, исследования физиологических механизмов и т. д. Его также можно использовать для диагностики и лечения различных заболеваний.

Другие формы бактериофагов

Избирательно инфекционный фаг

В отличие от традиционного фагового дисплея, селективный инфекционный фаг (SIP) напрямую связывает взаимодействия белка и лиганда с фаговой инфекцией и экспансией без необходимости этапов элюирования.

Рис.3 Селективно инфекционный фаг (СИП).(Источник ссылки:Фаговый дисплей и другие технологии отображения пептидов | Обзоры микробиологии FEMS | Oxford Academic (oup.com))

Ландшафтные фаги

Ландшафтные фаги вызваны тысячами копий чужеродных пептидов, расположенных вокруг трубчатых капсидов в сверхплотно повторяющихся узорах, а поливалентное проявление на ландшафтных фагах стимулирует высокоаффинный отбор, поэтому невозможно различить высокое и низкое сродство пептидных лигандов.

Рис.4 Идея ландшафтных фагов. (Источник ссылки:Фаговый дисплей и другие технологии отображения пептидов | Обзоры микробиологии FEMS | Oxford Academic (oup.com))

Преимущества систем фагового дисплея

Системы множественного фагового дисплея

Система отображения фага M13, фага T7, фага T4, фага λ на выбор клиентов.

Высокая пропускная способность скрининга

Мы можем использовать системы фагового дисплея для быстрого создания крупномасштабных фаговых библиотек и проведения высокопроизводительных скрининговых экспериментов.

Индивидуальная услуга фагового дисплея

Клиенты могут настраивать комплексные услуги в соответствии с требованиями проекта, например, скрининг высокоаффинных антител и т. д.

Широкий спектр применения

Применяется в таких областях, как инженерия антител, пептидная и белковая инженерия, открытие и разработка лекарственных препаратов, исследование взаимодействия белков и т. д.