Услуга по поиску антител scFv

Alpha Lifetech Inc.Мы гордимся тем, что предлагаем комплексные услуги по созданию библиотек scFv, отвечающие разнообразным потребностям ученых по всему миру. Наша цель — понимать и удовлетворять запросы различных клиентов, а также оказывать помощь в решении любых возникающих проблем в исследовательской работе.

Что такое scFv — антитело к одноцепочечному вариабельному фрагменту?

Одноцепочечное антитело состоит из вариабельного легкого (VL) и тяжелого (VH) фрагментов антитела, соединенных гибким пептидным линкером, которое легко экспрессируется в функциональной форме на поверхности фага и поэтому обычно известно как одноцепочечный вариабельный фрагмент (scFv). Фрагмент scFv является наименьшей единицей молекулы иммуноглобулина (за исключением наноантител), выполняющей функцию связывания антигена, и позволяет с помощью белковой инженерии улучшать свойства scFv (одноцепочечного вариабельного фрагмента), такие как повышение аффинности и изменение специфичности. В компании Alpha Lifetech Inc. антитела scFv были созданы в основном из гибридом, клеток селезенки иммунизированных мышей и В-лимфоцитов человека. Сначала из гибридом, клеток селезенки, лимфоцитов и клеток костного мозга выделяют общую РНК или мРНК, а затем проводят обратную транскрипцию в кДНК, которая служит матрицей для амплификации гена антитела (ПЦР).

Разработка антител scFv с использованием технологии фагового дисплея

Разнообразие библиотеки определяется количеством независимых клонов. Для создания библиотеки антител scFv большого размера наши ученые используют нашу запатентованную двухэтапную стратегию генерации библиотек. На первом этапе описанной процедуры первичные репертуары подготавливаются из ПЦР-продуктов, кодирующих домены VH, Vκ и Vλ, что позволяет получить библиотеки типичного среднего размера (1–100 миллионов клонов). На втором этапе фрагменты VH (или VL) выделяются путем расщепления плазмидной ДНК, очищенной из первичных репертуаров, и клонируются в акцепторный фагемидный вектор, содержащий репертуары VL (или VH). Это нововведение значительно увеличивает размер библиотек (10).¹⁰-10¹²клонов).

Крупномасштабный и высокопроизводительный скрининг антител scFv

При крупномасштабном производстве scFv очевидно, что выбор системы экспрессии окажет существенное влияние на проектирование процесса, стратегии последующей обработки и себестоимость процесса. Выбор способа производства будет зависеть от значимости посттрансляционной модификации и сроков для клинической разработки и экономики, которые также в значительной степени зависят от «системы-хозяина». Не существует универсальной системы экспрессии, которая обеспечивала бы высокий уровень экспрессии продукта для широкого спектра различных антител или даже белков.