Введение в библиотеки синтезированных антител

Синтезированная библиотека антител, также известная как библиотека De novo, представляет собой синтетический метод, который использует такие методы, как синтез ДНК или фаговый дисплей, для проектирования и синтеза полных вариабельных областей антител, включая каркасные области и CDR, без использования наивных библиотек антител.

Библиотека полусинтетических антител создается путем объединения библиотек антител естественного происхождения с синтетическим разнообразием. Обычно это включает синтез олигонуклеотидов ДНК для получения набора различных комплементарно определяющих областей (CDR), которые затем объединяются с постоянным каркасом антитела, полученным из природных источников, таких как человеческие или животные В-клетки. Синтезированный CDR вносит разнообразие в библиотеку, в результате чего антитела нацелены на широкий спектр эпитопов. Библиотека полусинтетических антител обеспечивает компромисс между естественным разнообразием иммунной системы и контролируемым разнообразием, достигаемым с помощью синтетических методов.

Различие между библиотеками наивных и синтетических антител зависит от источника генов иммуноглобулинов. Между тем, разница между библиотеками полусинтезированных и синтезированных антител заключается в том, что первая состоит из части сегментов наивных антител, таких как легкая цепь или тяжелая цепь, и только один из них синтезируется in vitro; в то время как синтезированная полностью получена из искусственного синтеза с помощью ПЦР in vitro.

Alpha Lifetech может предоставить

Альфа Лайфтех Инк.может предложить полусинтезированную/синтезированную библиотеку антител от животных и людей на основе нашей профессиональной платформы обнаружения антител. Благодаря многолетнему опыту в генетической модификации и создании библиотек, можно создать синтезированные библиотеки, которые способны производить синтетические антитела с аффинностью и специфичностью, превышающими возможности природных антител.Alpha Lifetech'sЭксперты с гордостью сообщают, что мы можем гарантировать высокий уровень успеха в создании библиотеки антител, содержащей 10^8 – 10^10 независимых клонов.

Альфа Лайфтех Инк.с гордостью предлагает комплексные услуги по созданию библиотек антител для удовлетворения разнообразных потребностей исследователей по всему миру, включая библиотеки антител scFv, Fab, VHH и индивидуальные библиотеки. Наша цель — понять и удовлетворить потребности разных клиентов и помочь с любыми предстоящими и возникающими проблемами в исследовательской работе.

Процесс создания библиотек синтезированных антител

Дизайн
Фаза проектирования включает выбор каркасов антител и областей определения комплементарности (CDR) на основе существующих последовательностей антител или структурных данных. Синтетические антитела CDR также могут быть разработаны для введения специфических функций или улучшения свойств связывания.

Синтез
Синтетическая ДНК, кодирующая разработанные последовательности антител, включая как каркасные области, так и CDR, синтезируется с использованием химических или ферментативных методов.

Сборка
Синтезированные фрагменты ДНК собираются в векторы экспрессии антител с использованием таких методов, как ПЦР, лигирование или сборка Гибсона. Затем эти векторы могут быть введены в системы экспрессии, такие как бактериальные, дрожжевые или млекопитающие клетки для производства антител.

Проверка и отбор
Сконструированные библиотеки антител проверяются и отбираются на наличие антител с желаемыми свойствами с использованием методов высокопроизводительного скрининга. Это может включать такие методы, как фаговый дисплей, дрожжевой дисплей или рибосомный дисплей, в зависимости от формата библиотеки и применения.

Служба создания библиотек синтезированных антител

Альфа Лайфтех Инк.предоставляет клиентам комплексный дизайн и синтезированную услугу библиотек антител путем лигирования репертуаров V-генов тяжелой и легкой цепи в фаговый вектор с использованием системы сайт-специфической рекомбинации Cre-lox для создания репертуара Fab, отображаемых на фаге, включающего 6,5 × 10^10 клонов. Библиотека вырабатывала Abs против многочисленных антигенов, некоторые с наномолярным сродством. Создание библиотеки человеческих антител основано на технологии отображения фага M13 (показано на рисунке ниже).