ෆේජ් සංදර්ශක පද්ධතිය

ඇල්ෆා ලයිෆ්ටෙක් විසින් විද්‍යාත්මක පර්යේෂණ කාලය හෝ ව්‍යාපෘති පර්යේෂණ සඳහා කාලය ඉතිරි කරන සහ පසුකාලීන නිෂ්පාදනයට පහසුකම් සපයන පරිපූර්ණ ස්ථාවර ෆේජ් සංදර්ශක පද්ධතියක් ගොඩනගා ඇත.

අපව අමතන්න

01 (අ)

ෆේජ් සංදර්ශක පද්ධතිය

ඇල්ෆා ලයිෆ්ටෙක් වසර ගණනාවක් තිස්සේ ෆේජ් සංදර්ශක තාක්ෂණයේ ගැඹුරින් නියැලී සිටී. ඇල්ෆා ලයිෆ්ටෙක් විසින් විද්‍යාත්මක පර්යේෂණ කාලය හෝ ව්‍යාපෘති පර්යේෂණ සඳහා කාලය ඉතිරි කරන සහ පසුව නිෂ්පාදනයට පහසුකම් සපයන පරිපූර්ණ ස්ථාවර ෆේජ් සංදර්ශක තාක්‍ෂණ වේදිකාවක් ගොඩනගා ඇත. M13 phage, T7 phage, T4 phage සහ λ phage සංදර්ශක පද්ධති ඇතුළුව පාරිභෝගිකයින්ට තෝරා ගැනීමට බහු phage සංදර්ශක පද්ධති අප සතුව ඇත. ඔබේ පර්යේෂණාත්මක අවශ්‍යතා අනුව, ඔබට සුදුසු ෆේජ් සංදර්ශක පද්ධතිය තෝරා ගත හැකිය. ඇල්ෆා ලයිෆ්ටෙක් හට vhh ප්‍රතිදේහ නිෂ්පාදනය, scfv ප්‍රතිදේහ නිෂ්පාදනය සහ Fab ප්‍රතිදේහ නිෂ්පාදනය වැනි පාරිභෝගික සේවාවන් ද සැපයිය හැකිය.

Phage සංදර්ශකය හඳුන්වාදීම

Phage display තාක්ෂණය යනු phages (බැක්ටීරියා ආසාදනය කරන වෛරසයක්) භාවිතා කර නිශ්චිත ප්‍රෝටීන හෝ පෙප්ටයිඩ වල ක්‍රියාකාරී බන්ධන අණු සෙවීමට භාවිතා කරන තාක්‍ෂණයකි. Phage ප්‍රතිදේහ පුස්තකාල ඉදිකිරීම් ශිල්පීය ක්‍රම අතරට Fab ප්‍රතිදේහ ප්‍රතිදේහ පුස්තකාල ඉදිකිරීම්, scFv ප්‍රතිදේහ පුස්තකාල ඉදිකිරීම්, vhh ප්‍රතිදේහ පුස්තකාල ඉදිකිරීම් යනාදිය ඇතුළත් වේ. බැක්ටීරියාභක්ෂක වර්ග අනුව, ඒවා බැක්ටීරියාභක්ෂක m13, T7 බැක්ටීරියාභක්ෂක, T4 බැක්ටීරියාභක්ෂක, λ බැක්ටීරියාභක්ෂක සහ අනෙකුත් බැක්ටීරියාභක්ෂක ලෙස බෙදිය හැකිය. පුස්තකාල වර්ගය අනුව, එය අහඹු පෙප්ටයිඩ පුස්තකාලය, cDNA පුස්තකාලය, ප්‍රතිදේහ පුස්තකාලය සහ ප්‍රෝටීන් පුස්තකාලය ලෙස බෙදිය හැකිය. Phage display තාක්ෂණය ක්‍රියාත්මක කිරීමට සරල වන අතර Fab phage display, scfv phage display, vhh phage display අඩංගු භාවිතා කිරීමට ලාභදායී වේ. කෙසේ වෙතත්, මෙම තාක්ෂණය පුස්තකාලයේ දිගු අනුපිළිවෙලවල් ප්‍රකාශ කළ නොහැකි අණුක ජාන විද්‍යාවේ විවිධත්වය සීමා කරයි.

ෆේජ් සංදර්ශක තාක්ෂණයට ප්‍රදර්ශනය කරන ලද අණුව සහ ප්‍රදර්ශනය කරන ලද අණුව කේතනය කරන DNA අනුපිළිවෙල අතර භෞතික සම්බන්ධතාවයක් ඇති කිරීමට හැකියාව ඇති අතර, ෆේජ් ජෙනෝමයේ අපේක්ෂිත කොටසෙහි DNA අනුපිළිවෙල මගින් නිශ්චිත සංයුක්තයක ඇමයිනෝ අම්ල අනුපිළිවෙල ක්ෂණිකව තීරණය කළ හැකිය.

වර්තමානයේ, ෆේජ් සංදර්ශක තාක්ෂණය බහුලව භාවිතා වේ. ඒ අතර, නව එන්නත් පර්යේෂණ සහ සංවර්ධනය (අඩු වියදම් සහ කාර්යක්ෂම කෘතිම එන්නත්), ප්‍රතිදේහ ඖෂධ සංවර්ධනය (එන්සයිම නිෂේධක පරීක්ෂා කිරීම), සෛල සංඥා සම්ප්‍රේෂණය (සිමියුලේටඩ් එපිටෝප් පරීක්ෂා කිරීම) සහ ප්‍රතිදේහජනක එපිටෝප් පර්යේෂණ (මොනොක්ලෝනල් ප්‍රතිදේහ සකස් කිරීම) යන අංශවල සැලකිය යුතු ජයග්‍රහණ තිබේ.

ෆේජ් සංදර්ශකයේ මූලධර්මය

ෆේජ් සංදර්ශකය යනු ෆේජ් DNA වල ජානමය වෙනස් කිරීම මත පදනම් වූ අණුක තාක්‍ෂණයකි, එය ඉලක්කගත කොටස ෆේජ් කබා ප්‍රෝටීනයට බන්ධනය කර එමඟින් ෆේජ් මතුපිට ප්‍රකාශ කරයි. විදේශීය DNA අනුක්‍රමය ෆේජ් කබා ප්‍රෝටීනයක් සංකේතනය කරන ෆේජ් ජෙනෝමයේ නියුක්ලියෝටයිඩ අනුපිළිවෙලෙහි නිශ්චිත ස්ථානයකට හඳුන්වා දෙනු ලැබේ (රූපය 1).

ෆේජ් ආසාදනයක් ඇති වූ විට, ෆේජ් ජානය බැක්ටීරියා ධාරකය තුළ ප්‍රකාශ වීමට පටන් ගන්නා අතර, ඇතුළු කරන ලද ඉලක්ක කොටස ෆේජ් මතුපිට මත කබා ප්‍රෝටීනය සහ ක්ලෝන කරන ලද අනුපිළිවෙල කේතනය කරන අදාළ ජානයේ සංයෝජනයක් ලෙස ප්‍රදර්ශනය කෙරේ.

රූපය 1 බැක්ටීරියාභක්ෂක M13 වයිරියන් ගෘහ නිර්මාණ ශිල්පය සහ ෆේජ් සංදර්ශක තාක්ෂණයේ මූලධර්මය.(යොමු මූලාශ්‍රය: ෆේජ් සංදර්ශකය සහ අනෙකුත් පෙප්ටයිඩ සංදර්ශක තාක්ෂණයන් | FEMS ක්ෂුද්‍රජීව විද්‍යා සමාලෝචන | ඔක්ස්ෆර්ඩ් අධ්‍යයන (oup.com))

phage සංදර්ශක පද්ධති

සූතිකාමය ෆේජ් යනු බහුලව භාවිතා වන ෆේජ් සංදර්ශක පද්ධතිය වන අතර, ෆේජ් සංදර්ශක පද්ධති අනෙකුත් ෆේජ් භාවිතයෙන් ගොඩනගා ගත හැකිය. එවැනි පද්ධතිවලට සූතිකාමය ෆේජ් පාදක පද්ධතිවලට වඩා සාපේක්ෂව විශාල පෙප්ටයිඩ ප්‍රදර්ශනය කිරීමට හෝ cDNA පුස්තකාල තිරගත කිරීමට හැකිය.

රූපය 2 ෆේජ් සංදර්ශකයේදී භාවිතා කරන බැක්ටීරියාභක්ෂක වර්ග.(යොමු මූලාශ්‍රය: ෆේජ් සංදර්ශකය සහ අනෙකුත් පෙප්ටයිඩ සංදර්ශක තාක්ෂණයන් | FEMS ක්ෂුද්‍රජීව විද්‍යා සමාලෝචන | ඔක්ස්ෆර්ඩ් අධ්‍යයන (oup.com))

Phage සංදර්ශක පද්ධතියේ වාසිය

Phage සංදර්ශක පද්ධති සාමාන්‍යයෙන් M13, fd සහ f1 ඇතුළුව සූතිකාමය phages භාවිතා කරයි. M13 phages හා සසඳන විට, T7 බැක්ටීරියාභක්ෂක phages ද්විත්ව නූල් සහිත DNA වලින් සමන්විත වන අතර, එය වැඩි ස්ථායිතාවයක් පෙන්නුම් කරන අතර ප්‍රතිනිර්මාණය කිරීමේදී විකෘති වීමට ඇති ඉඩකඩ අඩුය. T7 phage, වාහකයක් ලෙස, ඉක්මනින් වර්ධනය වන අතර පැය 3 ක් ඇතුළත ඵලක සෑදිය හැකි අතර, එමඟින් ක්ලෝනකරණය සහ පරීක්ෂාව සඳහා බොහෝ කාලයක් ඉතිරි වේ.

T7 phage පුස්තකාල ඉදිකිරීම මතුපිට සහ මතුපිට නොවන ජාන ප්‍රකාශනය සඳහා සහ පෙප්ටයිඩ, cDNA, ජෙනෝමික් DNA සහ ප්‍රතිදේහවල ප්‍රදර්ශන පුස්තකාල ගොඩනැගීම සඳහා භාවිතා කර ඇත. මෙය T7 phage ප්‍රති-ක්ෂුද්‍ර ජීවී කාරකයක් ලෙස පමණක් නොව, අවයව ඉලක්ක පරීක්ෂාව (මොළය, අක්මාව සහ පෙනහළු වැනි), ප්‍රතිදේහ හඳුනාගැනීමේ ඉලක්ක පරීක්ෂාව, භෞතික විද්‍යාත්මක යාන්ත්‍රණ පර්යේෂණ ආදියෙහි ඖෂධ ඉලක්ක පරීක්ෂාව සඳහා ද භාවිතා කිරීමට ඉඩ සලසයි. එය විවිධ රෝග හඳුනා ගැනීම සහ ප්‍රතිකාර කිරීම සඳහා ද භාවිතා කළ හැකිය.

බැක්ටීරියාභක්ෂක වල අනෙකුත් ආකාර

තෝරාගත් ආසාදිත ෆේජ්

සාම්ප්‍රදායික phage සංදර්ශකයට ප්‍රතිවිරුද්ධව, වරණීය infective phage (SIP) නිෂ්පාදන ප්‍රෝටීන්-ලිගන්ඩ් අන්තර්ක්‍රියා, elution පියවරයන් අවශ්‍ය නොවී phage ආසාදනය හා ප්‍රසාරණයට සෘජුවම සම්බන්ධ කරයි.

රූපය 3 තෝරාගත් ආසාදිත ෆේජ් (SIP).(යොමු මූලාශ්‍රය: ෆේජ් සංදර්ශකය සහ අනෙකුත් පෙප්ටයිඩ සංදර්ශක තාක්ෂණයන් | FEMS ක්ෂුද්‍රජීව විද්‍යා සමාලෝචන | ඔක්ස්ෆර්ඩ් අධ්‍යයන (oup.com))

භූ දර්ශන ෆේජ්

භූ දර්ශන භක්ෂක ඇතිවන්නේ අතිශය තද පුනරාවර්තන රටා වලින් නල කැප්සිඩ වටා සකස් කර ඇති විදේශීය පෙප්ටයිඩ පිටපත් දහස් ගණනක් නිසා වන අතර, භූ දර්ශන භක්ෂක මත බහුසංයුජ සංදර්ශකය ඉහළ-සම්බන්ධතා තේරීමක් ඇති කරයි, එබැවින් පෙප්ටයිඩ ලිගන්ඩ් වල ඉහළ සහ අඩු සම්බන්ධතාවය අතර වෙනස හඳුනා ගැනීමට නොහැකිය.

රූපය 4 භූ දර්ශන ෆේජ් පිළිබඳ අදහස. (යොමු මූලාශ්‍රය: ෆේජ් සංදර්ශකය සහ අනෙකුත් පෙප්ටයිඩ සංදර්ශක තාක්ෂණයන් | FEMS ක්ෂුද්‍රජීව විද්‍යා සමාලෝචන | ඔක්ස්ෆර්ඩ් අධ්‍යයන (oup.com))

ෆේජ් සංදර්ශක පද්ධතිවල වාසි

බහු ෆේජ් සංදර්ශක පද්ධති

පාරිභෝගිකයින්ට තෝරා ගැනීමට M13 phage, T7 phage, T4 phage, λ phage සංදර්ශක පද්ධතිය.

ඉහළ ප්‍රතිදාන පිරික්සුම් හැකියාව

අපට phage සංදර්ශක පද්ධති භාවිතා කර ඉක්මනින් මහා පරිමාණ phage පුස්තකාල ගොඩනඟා ගැනීමට සහ ඉහළ ප්‍රතිදාන පරීක්ෂණ අත්හදා බැලීම් ලබා ගත හැකිය.

අභිරුචිකරණය කළ ෆේජ් සංදර්ශක සේවාව

පාරිභෝගිකයින්ට ඉහළ සම්බන්ධතා ප්‍රතිදේහ පරීක්ෂා කිරීම වැනි ව්‍යාපෘති අවශ්‍යතා අනුව පුළුල් සේවාවන් අභිරුචිකරණය කළ හැකිය.

පුළුල් යෙදුම් පරාසය

ප්‍රතිදේහ ඉංජිනේරු විද්‍යාව, පෙප්ටයිඩ සහ ප්‍රෝටීන් ඉංජිනේරු විද්‍යාව, ඖෂධ සොයා ගැනීම සහ සංවර්ධනය, ප්‍රෝටීන් අන්තර්ක්‍රියා පර්යේෂණ යනාදී ක්ෂේත්‍රවල යෙදේ.