Technologická platforma hybridómov
Spoločnosť Alpha Lifetech poskytuje zákazníkom kvalitné protilátkové a rekombinantné protilátkové produkty a služby so zaručenou kvalitou.
Vyžiadať cenovú ponuku01
Technologická platforma hybridómov
Spoločnosť Alpha Lifetech má bohaté skúsenosti v oblasti vývoja protilátok. V priebehu rokov si spoločnosť Alpha Lifetech vybudovala komplexnú platformu pre vývoj protilátok (vrátane vývoja monoklonálnych protilátok, vývoja polyklonálnych protilátok, vývoja rekombinantných monoklonálnych protilátok a ďalších služieb v oblasti prípravy a vývoja protilátok).
Spoločnosť Alpha Lifetech poskytuje zákazníkom produkty a služby v oblasti protilátok a rekombinantných protilátok so zaručenou kvalitou a pripravené protilátky majú silnú špecificitu a dobrú stabilitu. Na poskytovanie služieb čistenia protilátok z rôznych zdrojov, ako sú napríklad monoklonálne protilátky z králikov, oviec, kurčiat a myší, ako aj na poskytovanie služieb afinitnej čistenia proteínov A/G a separácie protilátok, možno použiť viacero prístrojov a zariadení na čistenie protilátok.
Na základe rôznych techník prípravy protilátok, ako je technológia hybridómových buniek, môže spoločnosť Alpha Lifetech poskytovať prispôsobené služby pre monoklonálne a polyklonálne protilátky rôznych druhov. Okrem toho môže poskytnúť aj celý rad služieb od vysokokapacitného sekvenovania, prípravy protilátok, purifikácie protilátok až po validáciu protilátok. Metódu purifikácie vyberieme na základe špecifického účelu zákazníka. Na základe komplexných platformových systémov, ako je platforma pre vývoj protilátok a proteínová platforma, spoločnosť Alpha Lifetech pokrýva predbežné a následné služby produkcie protilátok, poskytuje purifikáciu protilátok, vysokokapacitné sekvenovanie protilátok, validáciu protilátok a ďalšie technické služby.
Hybridómová technológia
Hybridómová technológia sa môže použiť na prípravu monoklonálnych protilátok. Fúziou slezinových buniek imunizovaných myší s myelómovými bunkami ľudí alebo myší sa tvoria hybridómové bunky, ktoré vylučujú špecifické protilátky. Vygenerované monoklonálne protilátky odvodené z myší sa môžu použiť vo vedeckom výskume, ako je enzýmovo-imunoanalýza, rádioimunoanalýza, imunohistochémia, prietoková cytometria, purifikácia proteínov atď. Vzorky monoklonálnych protilátok zahŕňajú ascites, hybridómový supernatant atď. Vzorka získaná injekciou hybridómových buniek do brušnej dutiny zvierat a využitím fyziologického prostredia brušnej dutiny zvieraťa na produkciu protilátok sa nazýva vzorka ascitu. Hybridómové bunky injikované do brušnej dutiny zvierat sa môžu množiť a vylučovať monoklonálne protilátky, ktoré sa môžu hromadiť v ascite. Vzhľadom na možnosť prítomnosti nečistôt (živočíšne bielkoviny, hormóny atď.) v týchto protilátkach je potrebná purifikácia. Na základe sekrečnej funkcie B lymfocytov sa monoklonálne protilátky pri kultivácii hybridómových buniek často vylučujú do kultivačného média. Kvapalina obsahujúca monoklonálne protilátky v kultivačnom médiu sa nazýva hybridómový supernatant. Čistota monoklonálnych protilátok v supernatante je relatívne vysoká, ale pre prípravu vo veľkom meradle je potrebné ďalšie čistenie, pretože sa získavajú kultiváciou in vitro.
Purifikácia protilátok dokáže izolovať protilátky s vysokou čistotou z komplexov. V súčasnosti sú bežne používanými metódami purifikácie protilátok afinitná purifikácia protilátok a separácia a purifikácia protilátok, medzi ktoré patrí najmä purifikácia proteínu A/G, iónomeničová chromatografia, gélová filtrácia, precipitácia a hydrofóbna interakčná chromatografia. Medzi nimi je afinitná purifikácia proteínu A/G veľmi populárna v rôznych aplikáciách purifikácie protilátok. Proces prípravy monoklonálnych protilátok spoločnosťou Alpha Lifetech na základe hybridómovej technológie je znázornený na obrázku 1.
Obr. 1 Schéma procesu prípravy monoklonálnych protilátok na základe hybridómovej technológie.
Technológia konjugátov protilátok a liečiv a hybridómov
Konjugát protilátka-liečivo (ADC) je nové biologické činidlo, ktoré chemicky viaže protilátky s cytotoxickými liekmi. Konjugát protilátka-liečivo kombinuje špecifickú rozpoznávaciu schopnosť protilátok so silným účinkom cytotoxických liekov a presne dodáva cytotoxické lieky do nádorových buniek prostredníctvom protilátok, čím sa dosahuje presná liečba. Časť protilátok v liekoch ADC sa často pripravuje hybridómovou technológiou alebo inými technikami produkcie protilátok, ako je napríklad technológia genetického inžinierstva protilátok. Hybridómová technológia poskytuje vysokokvalitné protilátkové suroviny pre lieky ADC. Lieky ADC a monoklonálne protilátky pripravené hybridómovou technológiou zohrávajú dôležitú úlohu v oblastiach, ako je liečba rakoviny. Môžu sa použiť samostatne alebo v kombinácii na zvýšenie terapeutickej účinnosti.
Monoklonálne protilátky pripravené hybridómovou technológiou majú vysokú špecificitu, dokážu presne viazať a rozpoznávať špecifické antigény a možno ich vyrábať vo veľkom meradle. Prostredníctvom technológie sekvenovania hybridómov je možné extrahovať a sekvenovať gény protilátok v hybridómových bunkách, aby sa získali zodpovedajúce sekvencie, čo je prospešné pre následnú expresiu protilátok. Monoklonálne protilátky pripravené hybridómovou technológiou sa môžu použiť na detekciu špecifických markerov ochorenia, ako sú nádorové markery, vírusové antigény atď., čo poskytuje silnú podporu pre včasnú diagnostiku ochorení. Okrem toho sa môžu použiť aj v experimentoch, ako je imunoblotting a imunohistochémia, na štúdium expresie, lokalizácie, štruktúry a funkcie proteínov.
hybridómová technológia, pracovný postup pre produkciu protilátok
| Kroky | Obsah služby | Časová os |
|---|---|---|
| Krok 1: Imunizácia zvierat | (1) Imunizácia zvierat 4-krát, posilňovacia imunizácia 1 dávka, celkovo 5 imunizovaných dávok. (2) Pred imunizáciou bolo odobraté negatívne sérum a pri štvrtej dávke bol vykonaný test ELISA na zistenie titra séra. (3) Ak titer sérových protilátok po štvrtej dávke spĺňa požiadavky, 7 dní pred odberom krvi sa podá jedna ďalšia dávka imunizácie. Ak nespĺňa požiadavky, bude pokračovať rutinná imunizácia. (4) Kvalifikovaná účinnosť, slezinné bunky sa izolujú na bunkovú fúziu. | 10-12 týždňov |
| Krok 2: Fúzia a skríning | (1) Fúzia: Po imunizácii boli bunky sleziny myší odobraté a fúzované s bunkami myelómu. (2) Proliferácia a skríning: Získané hybridómové bunky boli podrobené proliferácii a skríningu ELISA s cieľom získať vysoko účinné klony. | 6 týždňov |
| Krok 3: Subklon | Subklonovanie 15 – 25 pozitívnych materských buniek metódou obmedzeného riedenia a nakoniec určenie 10 – 15 pozitívnych klonov | 3-4 týždne |
| Krok 4: Produkcia ascitu a čistenie protilátok | (1) Produkcia ascitu: Na produkciu ascitu u myší sa používa 10 – 15 hybridómových kmeňov (ak sa získa veľký počet hybridómových kmeňov, budú odoslané v bunkovej forme) (2) Identifikácia ascitu: Detekcia ascitu ELISA, účinnosť (proteín/vírus > 10^5, malá molekula/peptid > 10^4) pre následnú purifikáciu (3) Čistenie proteínu A/G: Čistenie ascitu | 3-4 týždne |
| Krok 5: Dodanie | (1) Poskytnite 3 – 5 hybridómových kmeňov monoklonálnych protilátok. (2) Každá hybridómová bunka poskytuje 1 mg purifikovanej protilátky (purifikácia ascitu). (3) Správa o experimentálnom procese | 1 týždeň |
Viaceré druhy
Imunita sa môže poskytnúť rôznym zvieratám vrátane, ale nie výlučne, myší, králikov, oviec atď.
Viacero cieľov
Na základe hybridómovej technológie sú k dispozícii služby objavovania viacerých cieľových protilátok: proteíny, peptidy, malé molekuly, vírusy, membránové proteíny, mRNA atď.
Záznamy o sledovateľnosti
Štandardy kontroly kvality QC (kontrola imunitnej účinnosti, kontroly kvality PBMC, kontroly kvality knižnice a kontroly kvality skríningovej validácie), anglické experimentálne správy, originálne experimentálne záznamy
Personalizovaný program
Individuálne prispôsobenie programu tak, aby vyhovoval potrebám výskumných projektov rôznych klientov
Služba vývoja monoklonálnych protilátok
Ponúkame vývoj vysoko kvalitných, vysoko čistých a vysoko špecifických monoklonálnych protilátok vrátane produkcie myších monoklonálnych protilátok a králičích monoklonálnych protilátok.
Technologická platforma hybridómov
Vrátane imunizačného programu, služieb prípravy protilátok, purifikácie protilátok, vysokokapacitného sekvenovania protilátok, validácie protilátok atď.
Platforma na triedenie jednotlivých B buniek
Alpha Lifetech má výhody v čase skríningu a získavaní vysokokvalitných protilátok. Dokáže zabezpečiť návrh, syntézu a modifikáciu antigénov, imunitu zvierat, skríning obohatenia jednotlivých B buniek a sekvenovanie jednotlivých buniek.
Platforma pre vývoj protilátok s fágovým displejom
Spoločnosť Alpha Lifetech môže poskytovať technické služby v oblasti vývoja protilátok pre fágový displej, od prípravy protilátok, purifikácie protilátok, sekvenovania protilátok atď.
Súvisiaci technologický zdroj
Úvod do hybridómovej technológieVIDEO
Ak máte akékoľvek otázky, neváhajte nás kedykoľvek kontaktovať.
Leave Your Message
16. júla 2018 
0102