Úvod do knižníc syntetizovaných protilátok

Knižnica syntetizovaných protilátok, tiež známa ako knižnica De novo, je syntetická metóda, ktorá využíva techniky, ako je syntéza DNA alebo fágový displej, na návrh a syntézu kompletných variabilných oblastí protilátky, vrátane rámcových oblastí a CDR, bez spoliehania sa na knižnice naivných protilátok.

Knižnica polosyntetických protilátok je vytvorená kombináciou knižníc prirodzene sa vyskytujúcich protilátok so syntetickou diverzitou. Zvyčajne zahŕňa syntézu DNA oligonukleotidov na produkciu súboru rôznych komplementárnych determinujúcich oblastí (CDR), ktoré sú potom kombinované s konštantným protilátkovým rámcom odvodeným z prirodzených zdrojov, ako sú ľudské alebo zvieracie B bunky. Syntetizovaná CDR zavádza diverzitu do knižnice, čo vedie k protilátkam zameraným na široký rozsah epitopov. Knižnica polosyntetických protilátok poskytuje kompromis medzi prirodzenou diverzitou imunitného systému a kontrolovanou diverzitou dosiahnutou syntetickými metódami.

Rozdiel medzi naivnými a syntetickými protilátkovými knižnicami závisí od zdroja imunoglobulínových génov. Medzitým rozdiel medzi polosyntetizovanou a syntetizovanou knižnicou protilátok spočíva v tom, že prvá pozostáva z časti naivných protilátkových segmentov, ako je ľahký reťazec alebo ťažký reťazec, a len jeden z nich je syntetizovaný in vitro; zatiaľ čo syntetizovaný je úplne odvodený z umelej syntézy pomocou PCR in vitro.

Alpha Lifetech môže poskytnúť

Spoločnosť Alpha Lifetech Inc.môže ponúknuť knižnicu polosyntetizovaných/syntetizovaných protilátok zo zvierat a ľudí na základe našej profesionálnej platformy na objavovanie protilátok. S dlhoročnými skúsenosťami s genetickou modifikáciou a konštrukciou knižníc je možné skonštruovať syntetizované knižnice, ktoré sú schopné produkovať syntetické protilátky s afinitou a špecifickosťou presahujúcou kapacitu prirodzených protilátok.Alpha Lifetechodborníci s hrdosťou oznamujú, že môžeme zaručiť vysokú mieru úspešnosti pri konštrukcii knižnice protilátok obsahujúcej 10^8 – 10^10 nezávislých klonov.

Spoločnosť Alpha Lifetech Inc.je hrdá na to, že ponúka komplexné služby tvorby knižníc protilátok, ktoré spĺňajú rôznorodé potreby globálnych výskumníkov, vrátane scFv, Fab, VHH protilátok a prispôsobených knižníc. Naším cieľom je pochopiť a splniť požiadavky rôznych zákazníkov a pomôcť s akýmikoľvek nadchádzajúcimi a vznikajúcimi problémami vo výskumnej práci.

Proces výstavby knižníc syntetizovaných protilátok

Dizajn
Fáza návrhu zahŕňa výber protilátkových rámcov a oblastí určujúcich komplementaritu (CDR) na základe existujúcich sekvencií protilátok alebo štruktúrnych údajov. Syntetické CDR protilátky môžu byť tiež navrhnuté tak, aby zaviedli špecifické funkcie alebo zlepšili väzbové vlastnosti.

Syntéza
Syntetická DNA kódujúca navrhnuté sekvencie protilátok, vrátane rámcových oblastí aj CDR, sa syntetizuje pomocou chemických alebo enzymatických metód.

Montáž
Syntetizované DNA fragmenty sú zostavené do protilátkových expresných vektorov s použitím techník, ako je PCR, ligácia alebo Gibsonovo zostavenie. Tieto vektory sa potom môžu zaviesť do expresných systémov, ako sú bakteriálne, kvasinkové alebo cicavčie bunky na produkciu protilátok.

Skríning a výber
Skonštruované knižnice protilátok sa skrínujú a selektujú na protilátky s požadovanými vlastnosťami pomocou vysokovýkonných skríningových metód. To môže zahŕňať techniky, ako je fágový displej, kvasinkový displej alebo ribozómový displej, v závislosti od formátu knižnice a aplikácie.

Služba výstavby knižníc syntetizovaných protilátok

Spoločnosť Alpha Lifetech Inc.poskytuje zákazníkom komplexný dizajn a syntetizovanú službu knižníc protilátok ligáciou repertoárov V-génu ťažkého a ľahkého reťazca do fágového vektora pomocou miestne špecifického rekombinačného systému Cre-lox na vytvorenie repertoáru Fab zobrazených na fágu obsahujúceho 6,5 × 10^10 klonov. Knižnica poskytla protilátky proti mnohým antigénom, niektoré s nanomolárnymi afinitami. Generovanie knižnice ľudských protilátok je založené na technológii fágového displeja M13 (zobrazenej na obrázku nižšie).