Hibridomska tehnološka platforma

Alpha Lifetech ima bogate izkušnje na področju razvoja protiteles. Skozi leta je Alpha Lifetech vzpostavil celovito platformo za razvoj protiteles (vključno z razvojem monoklonskih protiteles, razvojem poliklonskih protiteles, razvojem rekombinantnih monoklonskih protiteles in drugimi storitvami priprave in razvoja protiteles).

Alpha Lifetech strankam zagotavlja kakovostne izdelke in storitve na področju protiteles in rekombinantnih protiteles, pripravljena protitelesa pa imajo močno specifičnost in dobro stabilnost. Za zagotavljanje storitev čiščenja protiteles iz različnih virov, kot so monoklonska protitelesa kuncev, ovc, piščancev in miši, pa tudi storitev afinitetnega čiščenja proteinov A/G in storitev ločevanja protiteles, se lahko uporabi več instrumentov in opreme za čiščenje protiteles.

Alpha Lifetech lahko na podlagi različnih tehnik priprave protiteles, kot je tehnologija hibridomskih celic, nudi prilagojene storitve za monoklonska in poliklonska protitelesa različnih vrst. Poleg tega lahko ponudimo tudi vrsto storitev, od visokozmogljivega sekvenciranja, priprave protiteles, čiščenja protiteles do validacije protiteles. Metodo čiščenja bomo izbrali glede na specifičen namen stranke. Alpha Lifetech, ki temelji na celovitih platformnih sistemih, kot sta platforma za razvoj protiteles in platforma za beljakovine, pokriva storitve predhodnega in nadaljnjega razvoja protiteles, zagotavlja čiščenje protiteles, visokozmogljivo sekvenciranje protiteles, validacijo protiteles in druge tehnične storitve.

Hibridomska tehnologija

Hibridomska tehnologija se lahko uporablja za pripravo monoklonskih protiteles. Z zlitjem celic vranice imuniziranih miši z mielomskimi celicami ljudi ali miši nastanejo hibridomske celice, ki izločajo specifična protitelesa. Nastala mišja monoklonska protitelesa se lahko uporabljajo v znanstvenih raziskavah, kot so encimsko vezan imunski test, radioimunski test, imunohistokemija, pretočna citometrija, čiščenje beljakovin itd. Vzorci monoklonskih protiteles vključujejo ascites, hibridomski supernatant itd. Vzorec, pridobljen z injiciranjem hibridomskih celic v trebušno votlino živali in uporabo fiziološkega okolja trebušne votline živali za proizvodnjo protiteles, se imenuje vzorec ascitesa. Hibridomske celice, injicirane v trebušno votlino živali, se lahko razmnožujejo in izločajo monoklonska protitelesa, ki se lahko kopičijo v ascitesu. Zaradi možnosti nečistoč (živalskih beljakovin, hormonov itd.) v teh protitelesih je potrebno čiščenje. Zaradi izločevalne funkcije limfocitov B se monoklonska protitelesa pri gojenju hibridomskih celic pogosto izločajo v gojišče. Tekočina, ki vsebuje monoklonska protitelesa v gojišču, se imenuje hibridomski supernatant. Čistost monoklonskih protiteles v supernatantu je relativno visoka, vendar je za pripravo v velikem obsegu potrebno nadaljnje čiščenje, saj se pridobivajo z in vitro kulturo.

S čiščenjem protiteles je mogoče izolirati protitelesa visoke čistosti iz kompleksov. Trenutno so afinitetno čiščenje protiteles ter ločevanje in čiščenje protiteles pogosto uporabljene metode čiščenja protiteles, vključno s čiščenjem proteina A/G, ionsko izmenjevalno kromatografijo, gelsko filtracijo, precipitacijo in hidrofobno interakcijsko kromatografijo. Med njimi je storitev afinitetnega čiščenja proteina A/G zelo priljubljena pri različnih aplikacijah čiščenja protiteles. Postopek priprave monoklonskih protiteles na osnovi hibridomske tehnologije podjetja Alpha Lifetech je prikazan na sliki 1.

hibridomska tehnologija - Alpha Lifetech

Slika 1 Diagram postopka za pripravo monoklonskih protiteles na osnovi hibridomske tehnologije.

Konjugat protiteles in zdravil ter tehnologija hibridomov

Konjugat protitelesa in zdravila (ADC) je novo biološko sredstvo, ki kemično veže protitelesa s citotoksičnimi zdravili. Konjugat protitelesa in zdravila združuje specifično sposobnost prepoznavanja protiteles z močnim uničujočim učinkom citotoksičnih zdravil in natančno dostavlja citotoksična zdravila v tumorske celice s pomočjo protiteles, s čimer doseže natančno zdravljenje. Protitelesni del v zdravilih ADC se pogosto pripravi s hibridomsko tehnologijo ali drugimi tehnikami proizvodnje protiteles, kot je tehnologija genskega inženiringa protiteles. Hibridomska tehnologija zagotavlja visokokakovostne surovine za protitelesa za zdravila ADC. Zdravila ADC in monoklonska protitelesa, pripravljena s hibridomsko tehnologijo, igrajo pomembno vlogo na področjih, kot je zdravljenje raka. Uporabljajo se lahko posamezno ali v kombinaciji za povečanje terapevtske učinkovitosti.

Monoklonska protitelesa, pripravljena s hibridomsko tehnologijo, imajo visoko specifičnost, se lahko natančno vežejo na specifične antigene in jih je mogoče proizvajati v velikem obsegu. S tehnologijo hibridomskega sekvenciranja je mogoče gene protiteles v hibridomskih celicah ekstrahirati in sekvencirati, da se dobijo ustrezna zaporedja, kar je koristno za nadaljnjo ekspresijo protiteles. Monoklonska protitelesa, pripravljena s hibridomsko tehnologijo, se lahko uporabljajo za odkrivanje specifičnih bolezenskih markerjev, kot so tumorski markerji, virusni antigeni itd., kar zagotavlja močno podporo za zgodnjo diagnozo bolezni. Poleg tega se lahko uporabljajo tudi v poskusih, kot sta imunobloting in imunohistokemija, za preučevanje ekspresije, lokalizacije, strukture in delovanja beljakovin.

hibridomska tehnologija, potek dela za proizvodnjo protiteles

Koraki	Vsebina storitve	Časovnica
1. korak: Imunizacija živali	(1) Imunizacija živali 4-krat, poživitvena imunizacija 1 odmerek, skupno 5 odmerkov imunizacije. (2) Pred imunizacijo je bil zbran negativen serum, pri četrtem odmerku pa je bil opravljen test ELISA za ugotavljanje titra seruma. (3) Če titer serumskih protiteles po četrtem odmerku izpolnjuje zahteve, se 7 dni pred odvzemom krvi da še en odmerek imunizacije. Če ne izpolnjuje zahtev, se nadaljuje rutinska imunizacija. (4) Kvalificirana potenca, celice vranice so izolirane za celično fuzijo.	10–12 tednov
2. korak: Fuzija in presejanje	(1) Fuzija: Po imunizaciji so bile mišje vranične celice zbrane in spojene z mielomskimi celicami. (2) Proliferacija in presejanje: Pridobljene hibridomske celice so bile podvržene proliferaciji in presejanju z ELISA, da bi dobili visoko učinkovite klone.	6 tednov
3. korak: Podklon	Subkloniranje 15–25 pozitivnih matičnih celic z metodo omejenega redčenja in končna določitev 10–15 pozitivnih klonov	3–4 tedne
4. korak: Nastajanje ascitesa in čiščenje protiteles	(1) Proizvodnja ascitesa: za proizvodnjo ascitesa pri miših se uporabi 10–15 hibridomskih sevov (če se pridobi veliko število hibridomskih sevov, se ti pošljejo v celični obliki) (2) Identifikacija ascitesa: ELISA test za detekcijo ascitesa, učinkovitost (beljakovine/virus > 10^5, majhne molekule/peptidi > 10^4) za nadaljnje čiščenje (3) Čiščenje proteina A/G: Čiščenje ascitesa	3–4 tedne
5. korak: Dostava	(1) Zagotovite 3–5 hibridomskih sevov monoklonskih protiteles. (2) Vsaka hibridomska celica vsebuje 1 mg prečiščenega protitelesa (čiščenje ascitesa). (3) Poročilo o eksperimentalnem postopku	1 teden

Prednost hibridomske tehnologije

Alpha Lifetech ima bogate izkušnje na področju razvoja protiteles. Skozi leta je Alpha Lifetech vzpostavil celovito platformo za razvoj protiteles.

Več vrst

Imunost se lahko zagotovi različnim živalim, vključno z, vendar ne omejeno na, miši, kunce, ovce itd.

Več ciljev

Na podlagi hibridomske tehnologije so na voljo storitve odkrivanja več ciljnih protiteles: beljakovin, peptidov, majhnih molekul, virusov, membranskih beljakovin, mRNA itd.

Zapisi o sledljivosti

Standardi za nadzor kakovosti QC (imunska učinkovitost, nadzor kakovosti PBMC, nadzor kakovosti knjižnic in nadzor kakovosti validacije presejanja), angleška eksperimentalna poročila, originalni eksperimentalni zapisi

Prilagojen program

Individualna prilagoditev programa za potrebe raziskovalnih projektov različnih strank

Sorodna STORITEV

Strategije za razvoj več protiteles

Storitev za razvoj monoklonskih protiteles

Hibridomska tehnološka platforma

Platforma za sortiranje posameznih celic B

Platforma za razvoj protiteles s fagnim prikazom

razvoj monoklonskih protiteles - Alpha Lifetech

Storitev za razvoj monoklonskih protiteles

Nudimo vam visokokakovostne, visoko čiste in zelo specifične storitve razvoja monoklonskih protiteles, vključno s proizvodnjo mišjih in kunčjih monoklonskih protiteles.