Uvod v knjižnice sintetiziranih protiteles

Knjižnica sintetiziranih protiteles, znana tudi kot knjižnica De novo, je sintetična metoda, ki uporablja tehnike, kot je sinteza DNK ali fagni prikaz, za oblikovanje in sintetiziranje celotnih variabilnih regij protiteles, vključno z ogrodnimi regijami in CDR, ne da bi se zanašala na naivne knjižnice protiteles.

Polsintetična knjižnica protiteles je ustvarjena s kombiniranjem naravno prisotnih knjižnic protiteles s sintetično raznolikostjo. Običajno vključuje sintetiziranje oligonukleotidov DNA za proizvodnjo niza različnih komplementarnih določujočih regij (CDR), ki se nato kombinirajo s konstantnim ogrodjem protiteles, pridobljenim iz naravnih virov, kot so človeške ali živalske celice B. Sintetizirani CDR uvaja raznolikost v knjižnico, kar povzroči protitelesa, ki ciljajo na širok spekter epitopov. Knjižnica polsintetičnih protiteles zagotavlja kompromis med naravno raznolikostjo imunskega sistema in nadzorovano raznolikostjo, doseženo s sintetičnimi metodami.

Razlika med naivnimi in sintetičnimi knjižnicami protiteles je odvisna od vira imunoglobulinskih genov. Medtem je razlika med polsintetizirano in sintetizirano knjižnico protiteles v tem, da je prva sestavljena iz dela naivnih segmentov protiteles, kot sta lahka ali težka veriga, in samo eden od njih je sintetiziran in vitro; medtem ko je sintetizirana v celoti pridobljena iz umetne sinteze s PCR in vitro.

Alpha Lifetech lahko zagotovi

Alpha Lifetech Inc.lahko ponudi knjižnico polsintetiziranih/sintetiziranih protiteles živali in ljudi, ki temelji na naši profesionalni platformi za odkrivanje protiteles. Z dolgoletnimi izkušnjami na področju genskega spreminjanja in gradnje knjižnic je mogoče zgraditi sintetizirane knjižnice, ki so sposobne proizvesti sintetična protitelesa z afiniteto in specifičnostjo, ki presega zmogljivost naravnih protiteles.Alpha Lifetech'sstrokovnjaki s ponosom sporočajo, da lahko zagotovimo visoko stopnjo uspešnosti pri izdelavi knjižnice protiteles, ki vsebuje 10^8 – 10^10 neodvisnih klonov.

Alpha Lifetech Inc.s ponosom ponuja celovite storitve gradnje knjižnice protiteles za izpolnjevanje raznolikih potreb svetovnih raziskovalcev, vključno s protitelesi scFv, Fab, VHH in prilagojenimi knjižnicami. Naš cilj je razumeti in izpolniti zahteve različnih strank ter pomagati pri vseh prihajajočih in nastajajočih težavah pri raziskovalnem delu.

Storitveni proces gradnje knjižnic sintetiziranih protiteles

Oblikovanje
Faza načrtovanja vključuje izbiro ogrodja protiteles in regij, ki določajo komplementarnost (CDR) na podlagi obstoječih sekvenc protiteles ali strukturnih podatkov. Sintetična protitelesa CDR so lahko zasnovana tudi za uvedbo specifičnih funkcij ali izboljšanje vezavnih lastnosti.

Sinteza
Sintetična DNA, ki kodira zasnovane sekvence protiteles, vključno z ogrodnimi regijami in CDR, se sintetizira s kemičnimi ali encimskimi metodami.

Montaža
Sintetizirani fragmenti DNA se sestavijo v ekspresijske vektorje protiteles z uporabo tehnik, kot so PCR, ligacija ali Gibsonova sestava. Te vektorje lahko nato uvedemo v ekspresijske sisteme, kot so celice bakterij, kvasovk ali sesalcev, za proizvodnjo protiteles.

Preverjanje in selekcija
Konstruirane knjižnice protiteles so pregledane in izbrane za protitelesa z želenimi lastnostmi z uporabo visoko zmogljivih presejalnih metod. To lahko vključuje tehnike, kot je prikaz faga, prikaz kvasovk ali prikaz ribosomov, odvisno od formata knjižnice in uporabe.

Storitev gradnje knjižnic sintetiziranih protiteles

Alpha Lifetech Inc.strankam zagotavlja zasnovo in sintetizirano storitev knjižnic protiteles na enem mestu z ligacijo repertoarjev V-gena težke in lahke verige v vektor faga z uporabo rekombinacijskega sistema Cre-lox, specifičnega za mesto, za ustvarjanje repertoarja Fabs, prikazanega na fagu, ki obsega 6,5 ​​× 10^10 klonov. Knjižnica je dala Abs proti številnim antigenom, nekateri z nanomolarnimi afinitetami. Generiranje knjižnice človeških protiteles temelji na tehnologiji prikaza faga M13 (prikazano na spodnji sliki).