Uvod v knjižnice sintetiziranih protiteles

Sintetizirana knjižnica protiteles, znana tudi kot De novo knjižnica, je sintetična metoda, ki uporablja tehnike, kot sta sinteza DNK ali fagni prikaz, za načrtovanje in sintezo celotnih variabilnih regij protiteles, vključno z ogrodnimi regijami in CDR-ji, ne da bi se zanašala na naivne knjižnice protiteles.

Knjižnica polsintetičnih protiteles nastane z združevanjem naravno prisotnih knjižnic protiteles s sintetično raznolikostjo. Običajno vključuje sintezo DNA oligonukleotidov za proizvodnjo niza različnih komplementarno določajočih regij (CDR), ki se nato združijo s konstantnim ogrodjem protiteles, pridobljenim iz naravnih virov, kot so človeške ali živalske celice B. Sintetizirana CDR vnese raznolikost v knjižnico, kar ima za posledico protitelesa, ki ciljajo na širok spekter epitopov. Knjižnica polsintetičnih protiteles zagotavlja kompromis med naravno raznolikostjo imunskega sistema in nadzorovano raznolikostjo, doseženo s sintetičnimi metodami.

Razlika med naivnimi in sintetičnimi knjižnicami protiteles je odvisna od vira imunoglobulinskih genov. Razlika med delno sintetizirano in sintetizirano knjižnico protiteles pa je v tem, da prva sestoji iz dela naivnih segmentov protiteles, kot sta lahka ali težka veriga, in le eden od njiju je sintetiziran in vitro, medtem ko sintetizirana v celoti izhaja iz umetne sinteze s PCR in vitro.

Alpha Lifetech lahko zagotovi

Alpha Lifetech Inc.Na podlagi naše profesionalne platforme za odkrivanje protiteles lahko ponudimo knjižnico delno sintetiziranih/sintetiziranih protiteles iz živali in ljudi. Z dolgoletnimi izkušnjami na področju genskega spreminjanja in gradnje knjižnic lahko zgradimo sintetizirane knjižnice, ki so sposobne proizvajati sintetična protitelesa z afiniteto in specifičnostjo, ki presega zmogljivost naravnih protiteles.Alpha LifetechStrokovnjaki s ponosom sporočajo, da lahko zagotovimo visoko stopnjo uspešnosti pri izdelavi knjižnice protiteles, ki vsebuje 10^8 – 10^10 neodvisnih klonov.

Alpha Lifetech Inc.s ponosom ponuja celovite storitve gradnje knjižnic protiteles, ki ustrezajo raznolikim potrebam svetovnih raziskovalcev, vključno s protitelesi scFv, Fab, VHH in prilagojenimi knjižnicami. Naš cilj je razumeti in izpolniti zahteve različnih strank ter pomagati pri vseh prihajajočih in nastajajočih težavah pri raziskovalnem delu.

Postopek gradnje sintetiziranih knjižnic protiteles

Oblikovanje
Faza načrtovanja vključuje izbiro ogrodja protiteles in regij, ki določajo komplementarnost (CDR), na podlagi obstoječih zaporedij protiteles ali strukturnih podatkov. Sintetična protitelesa CDR so lahko zasnovana tudi tako, da uvedejo specifične funkcionalnosti ali izboljšajo vezavne lastnosti.

Sinteza
Sintetična DNK, ki kodira zasnovana zaporedja protiteles, vključno z ogrodnimi regijami in CDR-ji, se sintetizira z uporabo kemičnih ali encimskih metod.

Skupščina
Sintetizirani fragmenti DNK se sestavijo v vektorje za izražanje protiteles z uporabo tehnik, kot so PCR, ligacija ali Gibsonovo sestavljanje. Te vektorje je nato mogoče vnesti v ekspresijske sisteme, kot so bakterijske, kvasne ali sesalske celice, za proizvodnjo protiteles.

Presejanje in izbor
Konstruirane knjižnice protiteles se pregledajo in izberejo za protitelesa z želenimi lastnostmi z uporabo visokozmogljivih presejalnih metod. To lahko vključuje tehnike, kot so fagni prikaz, prikaz kvasovk ali prikaz ribosomov, odvisno od formata knjižnice in uporabe.

Storitev gradnje sintetiziranih knjižnic protiteles

Alpha Lifetech Inc.Strankam zagotavlja celovito storitev načrtovanja in sintetizacije knjižnic protiteles z ligacijo repertoarja genov V težke in lahke verige v fagni vektor z uporabo sistema Cre-lox rekombinacije na mestu, da ustvari repertoar Fab, prikazanih na fagu, ki obsega 6,5 ​​× 10^10 klonov. Knjižnica je dala protitelesa proti številnim antigenom, nekateri z nanomolarno afiniteto. Generiranje knjižnice človeških protiteles temelji na tehnologiji fagnega prikaza M13 (prikazano na spodnji sliki).