Fa'atomuaga o le Auaunaga Fa'aalia o le Phage

O le faʻaaliga o le phage, o se metotia faʻamolekula e faʻavae i luga o le suiga faʻasolopito o le DNA o le phage, ua avea ma meafaigaluega malosi faʻamolekula e faʻatupu ai ni suʻesuʻega faʻamolekula e faʻasaga i ni sini faʻapitoa e ala i le tuʻuina atu o nei fasi vaega i luga o le phage ma faʻapea ona filifilia ai fasi vaega o le peptide/antibody ma ni meatotino faʻapitoa e fusifusia ai mai le tele o ituaiga (faletusi).

E sefulu tausaga o le poto masani o le Alpha Lifetech i le atinaʻeina o antibodies o loʻo faʻaalia ai le phage ma e mafai ona tuʻuina atu le fausiaina faʻapolofesa o faletusi antibody ma le auaunaga suʻesuʻe mo a matou tagata faʻatau. E tusa ai ma manaʻoga o tagata faʻatau, e mafai ona matou tuʻuina atu ituaiga eseese o faletusi antibody, e pei o faletusi puipuiga, faletusi native, faletusi synthetic ma faletusi semi-synthetic. O le tekinolosi faletusi faʻaaliga phage, lea e faʻafefiloi ai genes antibody ma genes o porotini phage coat e pei o le M13, o le tekinolosi masani lea e saunia ai antibody recombinant ma e faʻaaogaina lautele i le atinaʻeina o antibodies e matua faʻapitoa lava.

O le a faia e le Alpha Lifetech tui puipui i le alpaca, llama, alpaca, ma malie, ma isi mea faapena, ina ia oo atu lo latou aoga i le 10^5. Matou te auina atu le lipoti o le suega aoga i le tagata faatau e faamautinoa ai le aoga ma le moni o faamatalaga. O faletusi moni e iai tulaga lelei o le maualalo o le oona ma le maualalo o le puipuiga o le tino. O le Alpha Lifetech e tele faletusi antibody moni ua uma ona saunia, e mafai ona faaaoga sa'o mo le su'esu'eina o antibody e aunoa ma le faia o tui puipui i manu, ma faapuupuu ai le taimi o le galuega faatino, faatelevaveina ai le alualu i luma o le suega a le tagata faatau, ma faamautinoa ai le atoatoa o le galue o le antibody.

Ata 1: Mataupu faavae o le fa'aalia o le phage

O La Matou Faiga Fa'aaliga Phage

O faʻamatalaga autū o le faiga faʻaalia o le phage M13/T4/T7 o loʻo faʻaalia i le Laulau 1.

Laulau 1 Ta'avale fa'aaliga phage eseese ma o latou uiga
	M13	T4	T7
Tele o le Genome	6407 bp	168895 bp	39937 bp
Fa'aali Porotini	pVI, pIII ma le pVIII	SOC ma le HOC	gp10B
Tele o le Fa'aaliga	>110 kDa o le pIII
Tele o le Fa'aaliga
Fa'aaliga Tele
Fa'aaliga Tele
Taamilosaga o le Olaga	Lisogeni	Litika	Litika

E Mafai e Alpha Lfetech ona Tuuina Atu

E tu'ufa'atasia e le Phage Display le genotype ma le phenotype i le tasi, e tu'ufa'atasia ai le selectivity ma le amplification fa'atasi ai ma le malosi o le screening. E mafai e le Alpha Lifetech ona tu'uina atu le tele o auaunaga mo le atina'eina o le phage display antibody.
O auaunaga autū e aofia ai: fa'avae o le faletusi o le antibody VHH, fa'avae o le faletusi o le antibody scFv, fa'avae o le faletusi o le antibody Fab, fa'avae o le fausiaina o le faletusi o le phage, fa'avae o le siakiina o le faletusi o le phage ma le auaunaga o le fa'atagataina o le antibody ma isi auaunaga.

Ata 2: Faiga o le atina'eina o le fa'aaliga o le Phage

Faiga o le Atina'eina o le Antibody o le Fa'aaliga o le Phage

E mafai ona matou puipuia manu i porotini o loʻo faʻaalia i totonu o la matou fale suʻesuʻe pe tuʻuina mai e a matou tagata faʻatau, e aofia ai porotini macromolecular eseese, peptides ma porotini membrane. E ala i le suʻega lelei o le ELISA, na faʻatinoina ai e a matou tagata suʻesuʻe le vavaeʻeseina o le PBMC ma le faʻamamāina o le RNA mai le toto o alpacas ma taunuuga sili ona lelei o le puipuiga. E ala i le faʻaliliuga faʻafeagai ma le faʻateleina o kene, na matou fausia ai le kene i luga o le pMESC, pComb3XSS poʻo le pCANTAB 5E phage vectors. E ala i le electrotransformation o sela agavaa o le TG1 E. coli, e mafai ona maua ai faletusi antibody phage ma le gafatia o le faletusi e sili atu i le 10^9. O faletusi antibody ma le gafatia tele o le faletusi e iai le eseesega lelei ma fesoasoani e suʻe ai antibodies e iai le affinity. Ina ia mautinoa le lelei o le faletusi antibody, o le a matou faʻamatalaina le gafatia o le faletusi ma le fua faatatau o le faʻaofiina o le faletusi. Matou te faʻasolosolo mulimuli ane faletusi e tuʻuina atu ai i a matou tagata faʻatau le 30-50 faʻasologa manaʻomia. Ona matou faia lea o le su'esu'ega o le faletusi o le fa'aaliga o le phage. Muamua, e fa'amautu le antigen i luga o polypropylene microplates, ma e ala i le 3-5 taamilosaga o le su'esu'ega, e aveese ai phage-antibodies e vaivai le malosi e fusifusia ai, ma taofia ai clones patino e fusifusia i le antigen. Mo le fa'aaliga o le phage, e fa'aaoga le metotia ELISA e i'u ai i se clone lelei, ae mo le fa'aaliga o le yeast, e fa'aaoga le metotia FACS e fa'aalia ai e sela ni vaega o le antibody recombinant e fa'aaoga ai antigens ua fa'ailogaina. E ala i le su'esu'ega, matou te saunia ni antibodies e maualuga le maaleale, fa'apitoa ma le maualuga o le affinity.

Ata 3 Fa'aaliga o le Phage i le fa'agasologa o le faia o antibody

FA'AOGA O LE AUAUNAGA
penefiti o le tautua

E matuā tuuto atu Alpha Lifetech i le tekinolosi o le fa'aalia o le phage, ma e mafai ona tu'uina atu i tagata fa'atau ni auaunaga phage lautele ma sili atu.

Vaitaimi ma le lelei maualuga

E mafai e la matou kamupani ona suʻe ni antibodies e faamalieina i se taimi puupuu; e mafai ona matou faatinoina ni faataitaiga eseese o le siakiina o le antibody e tusa ai ma manaoga o tagata faatau.

Maualuga le tulaga lelei o oloa

E fesoasoani la matou kamupani i tagata faʻatau e saunia ni antibodies e maualuga le saʻo ma le mautu, ma faʻateleina ai le tulaga o suʻesuʻega faasaienisi.

Tuuina atu le tele o filifiliga

E mafai e la matou kamupani ona fausia ni faletusi antibody mo ituaiga eseese (tagata, isumu, lapiti, alpaca, ma isi) ma e mafai ona fausia le tele o ituaiga (scfv, Fab, VHH, ma isi) o faletusi antibody.

Malosiaga Tele

O la matou faletusi o antibody e tele lona gafatia e sili atu i le 10^9 antibodies.

FAQ-Faʻafitauli lautele o le faʻaalia o phage

Fesili e uiga i le fa'aalia o le phage ◢

F.
O le ā le tekinolosi o le fa'aaliga o le phage?

A.
O le tekinolosi fa'aaliga o le phage o le fa'aofiina lea o le gene fa'amoemoe ese i totonu o le tulaga patino o le porotini phage capsid, ma fa'aalia le gene ese i luga o le fogāeleele o le phage e aunoa ma le a'afia ai o le galuega masani a le phage. A mae'a ni nai taamilosaga o su'esu'ega, na iu lava ina maua le porotini fa'amoemoe e malosi le fa'apitoa ma le maualuga o le gaioiga fa'aola.
F.
O a ni fa'amanuiaga o le tekonolosi o le fa'aaliga o le phage?

A.
E mafai ona fa'atupuina ni faletusi antibody e maualuga le gafatia e fa'aaoga ai lenei tekinolosi. E pu'upu'u le ta'amilosaga o le su'esu'ega, e faigofie le fa'agasologa o galuega, ma e lautele le tele o fa'aoga, e mafai ai ona fa'ailoa mai fa'asologa sili ona lelei mo peptides po'o porotini fa'atatau. I fa'aoga e feso'ota'i ma siama, e mafai e le au su'esu'e ona maua ni antibodies e fusifusia i epitopes taua o siama e ala i le su'esu'eina o faletusi antibody tetele. E mafai e lenei faiga ona fa'alavelaveina le ulufale atu, toe fa'ateleina, po'o auala e 'alo'ese ai mai siama, ma fa'atuina ai se fa'avae mo togafitiga o fa'ama'i.
F.
O le a le eseesega i le va o le tekinolosi hybridoma ma le tekinolosi phage?

A.
E sili atu ona lautele le fa'aaogaina o le tekinolosi o le fa'aaliga o le phage nai lo le tekinolosi o le hybridoma, lea e fa'atapula'aina i le gaosia o sina vaega itiiti o antibodies e fa'asaga i ni immunogens fa'apitoa. I se fa'atusatusaga, e mafai e le tekinolosi o le fa'aaliga o le phage ona fa'aalia se faletusi atoa o antibody e maua mai i ituaiga eseese o puipuiga.
F.
O a faʻaoga o tekinolosi faʻaaliga phage?

A.
E tele fa'aoga o le tekinolosi o le fa'aaliga o le phage, e aofia ai le su'esu'eina o mea e maua ai siama fa'ama'i, su'esu'eina o fegalegaleaiga o porotini, siakiina o le fesiita'iga o fa'ailoilo i le va o sela, su'esu'eina o fa'ama'i o manu, ma le atina'eina o tui puipui, fa'atasi ai ma isi matā'upu.
F.
O le a le avanoa e faʻaaogaina ai le tekinolosi o le faʻaalia o le phage?

A.
E tele fa'amanuiaga e ofoina mai e le tekinolosi o le fa'aaliga o le phage ma e mafai ona fa'aaogaina i vaega eseese. Peita'i, o le lu'itau autu i le atina'eina o antibodies recombinant e fa'aaoga ai le metotia o le fa'aaliga o le phage o le faigata ma le tau e feso'ota'i ma le faiga. O lenei auala e mana'omia ai le tu'ufa'atasia o metotia o le biology molecular, e aofia ai le mutation, cloning, ma le fa'aalia, fa'atasi ai ma au'ili'iliga fa'afoma'i, biochemical, ma biophysical e iloa ai ma fa'ailoa ai antibodies e mana'omia.

Fesili e Fesootaʻi ma Antigen ◢

F.
O a metotia o le faʻaalia o antigen?

A.
O le fa'aalia o antigen o se so'otaga taua tele. O auala e fa'aalia ai antigen e aofia ai le fa'aalia tuusa'o o antigen ua ufiufiina, fa'aalia lē tuusa'o o antigen ua ufiufiina, fa'aalia o antigen e ala i le su'esu'eina o le sela atoa, fa'aalia o antigen e ala i liposomes, nano-phospholipid disks ma VLPs.
F.
O a eseesega i le va o ituaiga eseese o le faʻaalia o antigen?

A.
O le auala e ufiufi tuusa'o ai e fai si faigofie, ae o le fausaga o le antigen e faigofie ona suia, ma o le fa'agaioiga o le ufiufi lē tuusa'o e faigata, ae e mafai ona fa'atumauina le fausaga o le antigen ma fa'aleleia atili ai le lelei o le fa'aalia. E mafai e le su'esu'ega o sela ona fa'ata'ita'i le vaaiga moni i totonu o le tino ola, ae o lo'o i ai se fa'afitauli o le fusifusia e lē fa'apitoa. O le tisiketi nano-phospholipid e la'ititi lona lapo'a, maualuga le lelei o le tu'uina atu ma lelei le mautu; O VLP e fa'apipi'i fa'atasi ma le antigen pe afīfī i le antigen, lea e maualuga le puipuiga o le tino ma lelei le saogalemu, ma e mafai ona fa'aosofia ai se tali malosi o le puipuiga o le tino.
F.
O le ā le aafiaga o le maualuga o le antigen i taunuuga o le suʻesuʻega o le tekinolosi o le faʻaalia o le phage?

A.
Afai e maualalo tele le malosi o le vailaʻau, o le a faʻaitiitia le avanoa e fusifusia ai ma le phage, ma iʻu ai ina faʻaitiitia le lelei o le suʻesuʻega. I se isi itu, o le maualuga tele o le malosi e mafai ona faʻateleina ai le avanoa e fusifusia ai e le faʻapitoa, faʻateleina ai le faʻailoga i tua, ma faʻalavelaveina ai le faʻailoaina o clones lelei.
F.
E faʻapefea ona tatou faʻamautinoa e faatumauina e le antigen lona foliga masani i le taimi o le faagasologa o le suʻesuʻega?

A.
E mafai ona fa'aaogaina le metotia fa'amautu māmā e 'alofia ai le vevela maualuga, 'āsi malosi ma le alkali. O le metotia ufiufi lē tuusa'o ma le faiga biotin-streptavidin na fa'aaogaina e fa'aitiitia ai le fa'aleagaina o le fausaga o le antigen. Afai o le antigen o se porotini membrane, e mafai ona fa'aalia i luga o le fogāeleele o sela e le'i a'afia pe fa'aaoga e fa'ata'ita'i ai le siosiomaga o le membrane, e pei o le nano-disk, e fa'atumauina ai lona fausaga masani o le porotini membrane.
F.
E faʻapefea ona faʻamaonia le faʻapitoa o le fusifusia o antibodies e suʻesuʻeina e le tekinolosi faʻaaliga phage i antigens?

A.
I le fa’aopoopoga i fa’ata’ita’iga masani e pei o le ELISA, Western Blotting (WB), ma le Immunofluorescence (IF), e mafai ona fa’aaogaina metotia e iloa ai le Surface Plasmon Resonance (SPR) ma le Bio-Layer Interferometry (BLI) e mata’ituina ai le fa’agasologa o le fusifusia ma le vavae’eseina o antibodies ma antigens i le taimi moni, e mafai ai ona fuafuaina le affinity ma le kinetic parameters.

Fesili e Fesootaʻi ma le Puipuiga o le Tino ◢

F.
O a ni tali lautele o le puipuiga o manu i le tekinolosi o le faʻaalia o le phage?

A.
E mafai ona faʻaaogaina le faʻaaliga o le phage e faʻatupu ai ni antibodies monoclonal e maualuga le affinity mo le tele o ituaiga meaola e gaosia ai antibody, e aofia ai ae le gata i tagata, isumu, lapiti, moa, kamela, alpacas, povi, maile, mamoe, manuki, ma malie.
F.
O a uiga ma faʻataʻitaʻiga talafeagai o faletusi antibody e maua mai i ituaiga eseese o manu i le tekinolosi faʻaalia o le phage?

A.
Ua leva ona fa'atuina le tekinolosi o le fausiaina o faletusi o antibody i isumu, taugofie, ma e pu'upu'u le umi o fa'ata'ita'iga, ma talafeagai ai mo le su'esu'eina muamua o antibody ma su'esu'ega fa'avae. E iai le malosi o le vavalalata ma le fa'apitoa o antibody i lapiti, fa'atasi ai ma se lautele o le iloa o epitope pe a fa'atusatusa i antibody i isumu. E mafai ona maua sa'o antibody i tagata mai faletusi o antibody i tagata, ma 'alofia ai ni tali atu i le puipuiga o le tino e ono tula'i mai pe a fa'aogaina ni antibody heterologous i le tino o le tagata. O lenei auala e taua tele i su'esu'ega ma atina'e o vaila'au, aemaise lava i le faia o antibody fa'amalolo.
F.
O le ā le immunogen lautele o manu e faʻaaogaina i tekinolosi faʻaaliga phage?

A.
E masani ona vaevaeina immunogens manu i le protein antigen, polypeptide antigen, nucleic acid antigen ma le pathogen-related antigen, e aofia ai le pathogen-related antigen e aofia ai le virus antigen (atoatasi o le virus particle, virus protein, virus non-structural protein, ma isi), bacterial antigen (atoa o le bacterial extract, cell wall component, secreted protein, toxin, ma isi) ma parasite antigen.
F.
E faʻapefea ona tatou foia le mataupu o le onosaʻi o le puipuiga o le tino i manu i le taimi o le tali atu o le puipuiga o le tino?

A.
Fetuuna'i immunogens e ala i le suiina o antigens puipuia i porotini recombinant ma sui vaega o siama e tineia ai le afi i porotini fa'atulagaina o siama. Fetuuna'i le mamanu fa'ata'ita'i ma fa'asa'o le fua o le puipuiga o le tino.
F.
E faʻapefea ona faʻaleleia atili le puipuiga o le tino (immunogenicity) o immunogens i tekinolosi o le faʻaalia o le phage?

A.
E mafai ona fa'aleleia atili le puipuiga o le tino e ala i le fa'apipi'iina o antigens ma porotini feavea'i, e pei o le bovine serum albumin. E le gata i lea, o mea e fesoasoani i le puipuiga o le tino, e aofia ai le Freund's adjuvant ma le aluminum adjuvant, e mafai ona fa'aaogaina e fa'aumiumi ai le taimi e nofo ai i totonu o le tino ma fa'aosofia ai le fa'agaoioiga ma le fa'ateleina o sela puipuia o le tino, ma fa'aleleia atili ai le puipuiga o le tino.

Fesili e uiga i le Fausiaina o le Faletusi ◢

F.
O le ā le faletusi o antibody phage?

A.
O le faletusi o antibody phage o se fa'aputuga o antibody phage eseese na faia e ala i le tu'ufa'atasia o se seti atoa o genes o vaega eseese mai antibody i totonu o phage vectors ma fa'aalia i luga o luga o phages. O lenei faiga e i'u ai i le fausiaina o se faletusi o antibody phage.
F.
Fa'agasologa o le fausiaina o se faletusi o antibody phage

A.
O le faagasologa lautele o le faʻaaliga o le phage e aofia ai ni laasaga taua se tele: aveeseina o sela mononuclear toto peripheral (PBMC) mai manu ua tui puipuia, vavaeeseina le RNA atoa ma faʻaliliuina i le DNA faʻaopoopo (cDNA), faʻateleina le gene faʻamoemoe e faʻaaoga ai le tekinolosi o le polymerase chain reaction (PCR), faʻapipiʻiina o le gene faʻamoemoe i totonu o se vector phage, ma liua le vector i totonu o se sela talimalo mo le faʻaalia. O lenei faagasologa e mafua ai le fausiaina o se faletusi faʻaaliga phage, lea e mafai ona vave iloa ai antibodies e maualuga le affinity. Mulimuli ane, o lenei faletusi e mafai ona avea o se punaoa taua mo le atinaʻeina o tui puipui, vailaʻau faʻamalolo, ma vailaʻau faʻamaʻi.
F.
O a ni manatu autū o le fausiaina o se faletusi maualuga le tulaga lelei?

A.

Ia mautinoa ua lava le aofaʻi atoa o le PBMC. Ia mautinoa le lelei o le RNA e aunoa ma le faʻaleagaina.

Ina ia mautinoa le aofaiga atoa o transformants, e masani ona manaʻomia le gafatia o le faletusi ia 10 i le 100 taimi o le eseesega faʻavae.
F.
O a fa'avasegaga o le faletusi o antibody phage?

A.
E tusa ai ma le puna o le faletusi o antibody, e mafai ona vaevaeina faletusi o antibody phage i ni faletusi o antibody phage immune ma faletusi o antibody phage native. O le eseesega autu i le va o nei ituaiga e lua o loʻo taoto i le pe ua uma ona tui puipui manu. E le gata i lea, e mafai ona gaosia faletusi o antibody native e ala i le semi-synthesis poʻo le synthesis.
F.
E faʻapefea ona iloilo le lelei o se faletusi o antibody phage?

A.
E lua fa'ailoga autū mo le iloiloina o le lelei o se faletusi o antibody: le gafatia e teu ai ma le eseesega. O le tele o le gafatia e teu ai, fa'atasi ai ma le tele o le eseesega, e fa'amautinoa ai le su'esu'eina lelei o antibody ma le maualuga o le affinity ma le specificity.

Fesili e Su'esu'e ai le Faletusi ◢

F.
O le ā le faagasologa o le siakiina o se faletusi o antibody phage?

A.
I le faagasologa o le fa'amamaina o meaola, e fa'afefiloi le faletusi fa'aaliga i ni sini tumau ona fufuluina lea ma le tele e aveese ai phages e le tali atu. E masani ona fa'amamaina conjugates e fa'aaoga ai se vaila'au acidic po'o se vaila'au masima maualuga ma fa'ateleina i totonu o sela talafeagai mo le fa'aleleia atili. A mae'a le 3 i le 5 ta'amilosaga o le su'esu'ega, e maua ai antibodies e maualuga le affinity.
F.
O a metotia e faʻaaogaina mo le suʻesuʻeina o faletusi o antibody phage?

A.
O auala e su'esu'e ai phage e aofia ai le solid-phase panning, liquid-phase screening, ma le cell-based screening. O le filifilia o se auala talafeagai e su'esu'e ai e tatau ona mafaufau i uiga o mole mole fa'amoemoeina, fa'amoemoega o le faiga o le su'esu'ega, ma le siosiomaga o le fale su'esu'e.
F.
O a ni su'esu'ega lelei ma ni su'esu'ega leaga o phages?

A.
O le su'esu'ega lelei o le metotia sili ona fa'avae mo le su'esu'eina o phage antibodies e fusifusia i porotini fa'atatau. O le su'esu'ega leaga e fa'aaoga e aveese ai antibodies e le fa'apitoa. I le taimi o le fa'agasologa o le su'esu'ega o le phage antibody, e ono iloa ai antibodies e le fa'apitoa ona o le fa'alavelave mai le fa'ailoga o le antigen fa'atatau, meafaitino, po'o isi antigens e tutusa le fausaga ma le antigen fa'atatau. I ia tulaga, o le su'esu'ega leaga e mafai ona fa'aleleia atili ai le lelei o le fa'agasologa o le su'esu'ega.
F.
E fa'apefea ona 'alofia le su'esu'eina o ni antibody e lē fa'apitoa?

A.

E mafai ona fa'amuamua antigens ua fa'ailogaina i ituaiga eseese o fa'ailoga mo le su'esu'ega muamua, pe mafai fo'i ona fa'aogaina le su'esu'ega le lelei e fa'aitiitia ai le pasene o antibodies e le o ni fa'ailoga patino.

E mafai ona e filifili e sui le vai fa'amaufa'ailoga talafeagai pe fa'aaoga ni vai fa'amaufa'ailoga eseese e puipuia ai lenei tulaga. Afai e siakiina le antibody e iloa ai le laina o le sela i tua (CHO po'o le HEK293), e mafai ona e sui ni laina eseese o sela i tua mo fa'amoemoega o le siakiina po'o le siakiina e le lelei.
F.
E fa'apefea ona fa'amaonia ma iloilo ia antibodies ua maua?

A.
O auala mo le fa'amaonia o le antibody e masani ona aofia ai le ELISA, Western Blotting (WB), flow cytometry, immunoprecipitation (IP), immunofluorescence (IF), immunohistochemistry, ma isi metotia fa'ata'ita'i eseese. O le Alpha Lifetech e iai le poto masani tele i le iloa o le antibody ma e iai lana 'au fa'ata'ita'i fa'apolofesa, e fa'amautinoa ai le aoga o antibodies i fa'ata'ita'iga o lo'o mulimuli mai.

Afai e iai ni au fesili, fa'amolemole fa'afeso'ota'i matou i so'o se taimi.

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Auaunaga Fa'apitoa

Fa'avae mo le Sailiga o Antibody