Platforma e Zhvillimit të Aptamer

Aptamerët janë oligonukleotide me një fije floku (ADN, ARN ose XNA) me veti të afinitetit të lartë dhe specifik të lartë që lidhen në mënyrë specifike me molekulat e synuara si antitrupat, dhe ato përdoren gjerësisht për zhvillimin e biosensorëve, diagnostikimit dhe terapisë.

Platforma e aptamerit e ofruar nga Alpha Lifetech përfshin dy kategori: platformën e sintezës së aptamerit, e cila kryesisht përfshin shërbimin e sintezës së bibliotekës së aptamerit SELEX dhe shërbimin e zhvillimit të aptamerit (ADN, ARN ose XNA), dhe platformën e shqyrtimit të aptamerit duke përfshirë shërbimet e shqyrtimit të bazuar në teknologjinë SELEX për proteinat, peptidet, qelizat, molekulat e vogla të shënjestrës dhe molekulat e tjera të optimizimit të metaleve dhe aptamerit. shërbimet e analizës së identifikimit.

Platforma e Sintezës Aptamer

Shërbimi i sintezës së bibliotekës së aptamerit SELEX

Shërbimi i sintezës së bibliotekës së aptamerit SELEX kryesisht përfshin ndërtimin e një biblioteke që përmban një numër të madh sekuencash të rastësishme oligonukleotide njëvargëshe me sintezë kimike in vitro sipas molekulave të synuara. Ndërtimi i bibliotekës është pika fillestare e teknologjisë SELEX, e cila ofron sekuenca të shumta kandidate për procesin e mëpasshëm të shqyrtimit duke ndërtuar biblioteka të mëdha të rastësishme dhe rrit mundësinë e shqyrtimit të aptamerëve me afinitet të lartë.

Sinteza e bibliotekës ndahet kryesisht në hapat e mëposhtëm:

Hapat	Detajet e teknologjisë
Identifikoni molekulat e synuara	Identifikoni molekulat e synuara që duhet të kontrollohen për aptamerë, të cilët mund të jenë proteina, acide nukleike, jone të vogla molekulare, metalike, etj.
Dizajni i sekuencës së rastësishme	Gjatësia e sekuencës së rastësishme, përbërja e bazës dhe parametrat e tjerë u projektuan sipas karakteristikave të molekulave të synuara dhe kërkesave të shqyrtimit. Në mënyrë tipike, sekuencat e rastësishme janë midis dhjetëra dhe qindra bazave në gjatësi.
Sinteza e sekuencave fikse	Dizenjohen dhe sintetizohen fragmente oligonukleotide me sekuenca fikse (të tilla si sekuencat e primerit PCR) në të dy skajet, të cilat do të përdoren në procesin e mëpasshëm të amplifikimit dhe shqyrtimit.

Biblioteka e sintetizuar ende duhet të përpunohet më tej për kontrollin e cilësisë. Përqendrimi i bibliotekës u përcaktua për të siguruar zbatueshmërinë e saj në procesin e mëpasshëm të shqyrtimit. Diversiteti dhe saktësia e sekuencave të rastësishme në bibliotekë u verifikuan me sekuencë dhe metoda të tjera për të siguruar që cilësia e bibliotekës plotësonte kërkesat e shqyrtimit.

Nëpërmjet hapave të mësipërm, mund të sintetizohet një bibliotekë aptameri SELEX me cilësi të lartë dhe shumë të larmishme, e cila mund të sigurojë sekuenca të shumta kandidate për procesin e mëpasshëm të shqyrtimit.

Shërbimet e zhvillimit të aptamerit (ADN, ARN ose XNA)

Aptamerët zakonisht i referohen aptamerëve të acidit nukleik. Aptamerët e acidit nukleik përfshijnë aptamerët e ADN-së, aptamerët e ARN-së dhe aptamerët XNA, i cili është aptamer i acidit nukleik të modifikuar kimikisht. Teknika SELEX përdoret gjerësisht për zhvillimin e aptamerëve. Rrjedha bazë e punës e shërbimeve të zhvillimit të aptamerit përfshin ndërtimin e bibliotekës, lidhjen e objektivit, izolimin dhe pastrimin, amplifikimin, raundet e shumta të shqyrtimit dhe identifikimin e sekuencës. Për shumë vite, ne jemi fokusuar në ndërtimin e bibliotekës dhe përvojën e pasur në zhvillimin e aptamerit. Ne jemi të përkushtuar t'i ofrojmë klientëve shërbime më të mira.

Procesi i teknologjisë SELEX

Procesi SELEX përbëhet nga raunde të shumta, secila prej të cilave përbëhet nga hapat kryesorë të mëposhtëm:

Biblioteka dhe Lidhja e Synimeve

Biblioteka e ndërtuar e acidit nukleik është e përzier me molekula specifike të synuara (si proteinat, komponimet me molekula të vogla, etj.), në mënyrë që sekuencat e acidit nukleik në bibliotekë të kenë mundësinë të lidhen me molekulat e synuara.

Izolimi i molekulave të palidhura

Sekuencat e acidit nukleik që nuk janë të lidhura me molekulën e synuar ndahen nga përzierja me metoda specifike si kromatografia e afinitetit, ndarja e rruazave magnetike, etj.

Amplifikimi i molekulave lidhëse

Sekuenca e acidit nukleik i lidhur me një molekulë të synuar përforcohet, zakonisht duke përdorur teknologjinë e reaksionit zinxhir polimerazë (PCR). Për fazën pasuese të shqyrtimit, sekuencat e përforcuara do të përdoren si bibliotekë fillestare.

Fig 1: Procesi i shqyrtimit SELEX

Platforma e shqyrtimit të Aptamer

Shërbimi i shqyrtimit të aptamerit

Alpha Lifetech ofron një gamë të larmishme shërbimesh të specializuara të shqyrtimit të aptamerit duke aplikuar metodologji të ndryshme SELEX për lloje të ndryshme të molekulave tuaja:

Llojet e synimeve	Detajet Teknike
Screening Protein Aptamer nga SELEX	Qëllimi kryesor i shqyrtimit të aptamerëve të proteinave është të ekzaminojë aptamerët që mund të lidhen në mënyrë specifike me molekulat e proteinave të synuara. Këta aptamerë janë më të thjeshtë për t'u sintetizuar, më të qëndrueshëm dhe më pak të ndjeshëm ndaj faktorëve mjedisorë.
Screening Peptide Aptamer nga SELEX	Aptamerët peptidikë janë një klasë e sekuencave të shkurtra peptide me specifikë dhe afinitet të lartë, të cilat mund të lidhen në mënyrë specifike me substancat e synuara dhe të tregojnë një gamë të gjerë potenciali aplikimi në fushën biomjekësore. Nëpërmjet një procesi të veçantë shqyrtimi, aptamerët peptidë që mund të lidhen në mënyrë specifike me molekulat e synuara ekzaminohen nga një numër i madh bibliotekash të sekuencave peptide të rastësishme.
Ekzaminimi i Aptamer-it specifik të qelizave (Cell-SELEX)	Qelizat e synuara ose molekulat specifike në sipërfaqen e qelizës përgatiten si objektiva. Objektivat mund të jenë qeliza të tëra, receptorë në membranën qelizore, proteina ose molekula të tjera të vogla.
Ekzaminimi i Aptamerit me molekulë të vogël nga Capture SELEX	Capture SELEX është një teknikë ekzaminimi in vitro për skanimin e aptamerëve me molekula të vogla, që është një variant i SELEX. Capture SELEX është veçanërisht i përshtatshëm për ekzaminimin aptamer të objektivave të molekulave të vogla, të cilat zakonisht kanë më pak grupe funksionale dhe janë të vështira për t'u imobilizuar drejtpërdrejt në mbështetëset e fazës së ngurtë.
Shërbime SELEX të bazuara në kafshë të gjalla	Shërbimi i shqyrtimit të bazuar në kafshë të gjalla është një teknikë eksperimentale e përdorur gjerësisht në fushat e bioshkencës, mjekësisë dhe bioteknologjisë, e cila përdor kafshë të gjalla si modele eksperimentale për të ekzaminuar dhe vlerësuar molekula specifike, mjekë, terapeutikë ose procese biologjike. Shërbimet janë krijuar për të simuluar mjedisin fiziologjik në trupin e njeriut për të parashikuar dhe vlerësuar më saktë efikasitetin dhe sigurinë e rezultateve eksperimentale në trupin e njeriut.

Shërbimi i optimizimit të aptamerit

Hidrofiliteti, humbja e lartë e afinitetit gjatë prodhimit dhe ekskretimi i shpejtë i aptamerëve kufizojnë aplikimin e tyre. Aktualisht, janë eksploruar një sërë metodash optimizimi për të rritur performancën e aptamerëve.

Ne gjithashtu kemi një shumëllojshmëri mënyrash për të optimizuar aptamerin që përbëhet nga shkurtimi, modifikimet, konjugimi në grupin e duhur (tiol, karboksi, aminë, fluorofore, etj.).

Shërbimi i analizës së karakterizimit të aptamerit

Shërbimi i analizës së karakterizimit të aptamerit i referohet shërbimit profesional të zgjidhjes së strukturës së vlerësimit të performancës dhe verifikimit funksional të aptamerit të marrë për të siguruar që aptameri plotëson kërkesat specifike të aftësisë, stabilitetit dhe specifikës lidhëse. Kryesisht përfshin analizën e afinitetit dhe specifikës, vlerësimin e stabilitetit dhe verifikimin e funksionit biologjik.