Platforma e Teknologjisë së Hibridomës
Alpha Lifetech ka përvojë të pasur në fushën e zhvillimit të antitrupave. Me kalimin e viteve, Alpha Lifetech ka krijuar një platformë gjithëpërfshirëse të zhvillimit të antitrupave (duke përfshirë zhvillimin e antitrupave monoklonalë, zhvillimin e antitrupave poliklonalë, zhvillimin e antitrupave monoklonalë rekombinantë dhe shërbime të tjera të përgatitjes dhe zhvillimit të antitrupave).
Alpha Lifetech u ofron klientëve produkte dhe shërbime me cilësi të garantuar për antitrupa dhe antitrupa rekombinantë, dhe antitrupat e përgatitur kanë specifikë të fortë dhe stabilitet të mirë. Instrumente dhe pajisje të shumëfishta për pastrimin e antitrupave mund të përdoren për të ofruar shërbime pastrimi të antitrupave nga burime të ndryshme, siç janë antitrupat monoklonalë të lepurit, deleve, pulave, miut, si dhe shërbime pastrimi me afinitet të proteinave A/G dhe shërbime të ndarjes së antitrupave.
Bazuar në teknika të ndryshme të përgatitjes së antitrupave, siç është teknologjia e qelizave hibridoma, Alpha Lifetech mund të ofrojë shërbime të personalizuara për antitrupat monoklonalë dhe poliklonalë të specieve të ndryshme. Përveç kësaj, mund të ofrohet edhe një gamë shërbimesh, nga sekuencimi me rendiment të lartë, përgatitja e antitrupave, pastrimi i antitrupave deri te validimi i antitrupave. Ne do të zgjedhim metodën e pastrimit bazuar në qëllimin specifik të klientit. Bazuar në sisteme gjithëpërfshirëse platformash, siç janë platforma e zhvillimit të antitrupave dhe platforma e proteinave, Alpha Lifetech mbulon shërbime të prodhimit të antitrupave në rrjedhën e sipërme dhe të poshtme, duke ofruar pastrim të antitrupave, sekuencim me rendiment të lartë të antitrupave, validim të antitrupave dhe shërbime të tjera teknike.
Teknologjia e Hibridomës
Teknologjia e hibridomës mund të përdoret për të përgatitur antitrupa monoklonalë. Duke bashkuar qelizat e shpretkës nga minjtë e imunizuar me qelizat e mielomës nga njerëzit ose minjtë, formohen qelizat hibridoma dhe sekretojnë antitrupa specifikë. Antitrupat monoklonalë të gjeneruar nga minjtë mund të përdoren në kërkime shkencore, të tilla si analiza imunosorbentike e lidhur me enzimat, radioimunojase, imunohistokimia, citometria e rrjedhës, pastrimi i proteinave, etj. Mostrat e antitrupave monoklonalë përfshijnë ascitin, supernatantin e hibridomës, etj. Mostra e marrë duke injektuar qelizat hibridoma në zgavrën e barkut të kafshëve dhe duke përdorur mjedisin fiziologjik të zgavrës së barkut të kafshës për të prodhuar antitrupa quhet mostër asciti. Qelizat hibridoma të injektuara në zgavrën e barkut të kafshëve mund të shumohen dhe të sekretojnë antitrupa monoklonalë, të cilët mund të grumbullohen në ascit. Për shkak të mundësisë së papastërtive (proteina shtazore, hormone, etj.) në këto antitrupa, kërkohet pastrim. Bazuar në funksionin e sekretimit të limfociteve B, antitrupat monoklonalë shpesh sekretohen në mjedisin e kulturës kur kultivohen qelizat hibridoma. Lëngu që përmban antitrupa monoklonalë në mjedisin e kulturës quhet supernatant i hibridomës. Pastërtia e antitrupave monoklonalë në supernatant është relativisht e lartë, por kërkohet pastrim i mëtejshëm për përgatitjen në shkallë të gjerë, pasi ato merren përmes kulturës in vitro.
Pastrimi i antitrupave mund të izolojë antitrupa me pastërti të lartë nga komplekset. Aktualisht, pastrimi i afinitetit të antitrupave dhe ndarja e pastrimi i antitrupave janë metoda të zakonshme të pastrimit të antitrupave, duke përfshirë kryesisht pastrimin e proteinave A/G, kromatografinë e shkëmbimit jonik, filtrimin e xhelit, reshjet dhe kromatografinë e ndërveprimit hidrofobik. Midis tyre, shërbimi i pastrimit të afinitetit të proteinave A/G është gjerësisht i popullarizuar në aplikime të ndryshme të pastrimit të antitrupave. Procesi i përgatitjes së antitrupave monoklonalë nga Alpha Lifetech bazuar në teknologjinë e hibridomës tregohet në Figurën 1.
Fig. 1 Diagrama e procesit për përgatitjen e antitrupave monoklonalë bazuar në teknologjinë e hibridomës.
Teknologjia e Konjugatit të Barnave me Antitrupa dhe Hibridomës
Konjugati i antitrupave dhe ilaçeve (ADC) është një agjent i ri biologjik që çiftëzon kimikisht antitrupat me ilaçet citotoksike. Konjugati i antitrupave dhe ilaçeve kombinon aftësinë specifike të njohjes së antitrupave me efektin e fuqishëm vrasës të ilaçeve citotoksike dhe i dërgon me saktësi ilaçet citotoksike në qelizat tumorale përmes antitrupave, duke arritur kështu një trajtim të saktë. Pjesa e antitrupave në ilaçet ADC shpesh përgatitet përmes teknologjisë së hibridomës ose teknikave të tjera të prodhimit të antitrupave, siç është teknologjia e antitrupave të inxhinierisë gjenetike. Teknologjia e hibridomës siguron lëndë të para të antitrupave me cilësi të lartë për ilaçet ADC. Ilaçet ADC dhe antitrupat monoklonalë të përgatitur përmes teknologjisë së hibridomës luajnë role të rëndësishme në fusha të tilla si trajtimi i kancerit. Ato mund të përdoren vetëm ose në kombinim për të rritur efikasitetin terapeutik.
Antitrupat monoklonalë të përgatitur me anë të teknologjisë së hibridomës kanë specifikë të lartë, mund të lidhen dhe njohin me saktësi antigjene specifike dhe mund të prodhohen në shkallë të gjerë. Përmes teknologjisë së sekuencimit të hibridomës, gjenet e antitrupave në qelizat e hibridomës mund të nxirren dhe të sekuencohen për të marrë sekuenca përkatëse, gjë që është e dobishme për shprehjen pasuese të antitrupave. Antitrupat monoklonalë të përgatitur me anë të teknologjisë së hibridomës mund të përdoren për të zbuluar shënjues specifikë të sëmundjeve, siç janë shënjuesit tumoralë, antigjenet virale, etj., duke ofruar mbështetje të fortë për diagnostikimin e hershëm të sëmundjeve. Përveç kësaj, mund të përdoret edhe në eksperimente të tilla si imunoblottimi dhe imunohistokimia për të studiuar shprehjen, lokalizimin, strukturën dhe funksionin e proteinave.
Teknologjia e hibridomës Prodhimi i Shërbimit të Antitrupave Fluksi i Punës
| Hapat | Përmbajtja e Shërbimit | Kronologjia |
| Hapi 1: Imunizimi i kafshëve | (1) Imunizimi i kafshëve 4 herë, imunizimi përforcues 1 dozë, gjithsej 5 doza të imunizuara. (2) U mblodh serum negativ para imunizimit dhe u krye ELISA në dozën e katërt për të zbuluar titrin e serumit. (3) Nëse titri i antitrupave në serum i dozës së katërt i plotëson kërkesat, një dozë shtesë e imunizimit do të administrohet 7 ditë para mbledhjes së gjakut. Nëse nuk i plotëson kërkesat, imunizimi rutinë do të vazhdojë. (4) Potencë e kualifikuar, qelizat e shpretkës janë të izoluara për bashkimin e qelizave. | 10-12 javë |
| Hapi 2: Bashkimi dhe Shqyrtimi | (1) Bashkimi: Pas imunizimit, qelizat e shpretkës së miut u mblodhën dhe u bashkuan me qelizat e mielomës. (2) Përhapja dhe shqyrtimi: Qelizat hibridome të përftuara iu nënshtruan përhapjes dhe shqyrtimit ELISA për të përftuar klone me efikasitet të lartë. | 6 javë |
| Hapi 3: Nënklonimi | Nënklonimi i 15-25 qelizave mëmë pozitive duke përdorur metodën e hollimit të kufizuar dhe së fundmi përcaktimi i 10-15 kloneve pozitive | 3-4 javë |
| Hapi 4: Prodhimi i ascites dhe pastrimi i antitrupave | (1) Prodhimi i ascitit: 10-15 lloje hibridomash përdoren për prodhimin e ascitit te minjtë (nëse merret një numër i madh llojesh hibridomash, ato do të dërgohen në formë qelizore) (2) Identifikimi i ascitit: Zbulimi i ascitit me ELISA, fuqia (proteina/virus>10^5, molekulë e vogël/peptid>10^4) për pastrimin pasues (3) Pastrimi i Proteinës A/G: Pastrimi i Ascitit | 3-4 javë |
| Hapi 5: Dorëzimi | (1) Jepni 3-5 lloje hibridomash të antitrupave monoklonalë. (2) Çdo qelizë hibridome ofron 1 mg antitrup të pastruar (pastrim i ascitit). (3) Raporti i Procesit Eksperimental | 1 javë |