Shërbimi i Zbulimit të Antitrupave scFv

Alpha Lifetech Inc.është krenare që ofron shërbime gjithëpërfshirëse të ndërtimit të bibliotekave scFv për të përmbushur nevojat e larmishme të shkencëtarëve globalë. Qëllimi ynë është të kuptojmë dhe të përmbushim kërkesat e klientëve të ndryshëm dhe të ndihmojmë me çdo problem të ardhshëm dhe në zhvillim në punën kërkimore.

Çfarë është antitrupi scFv- i fragmentit të ndryshueshëm me zinxhir të vetëm?

Një antitrup me një zinxhir të vetëm përbëhet nga një fragment i lehtë (VL) dhe një fragment i rëndë (VH) i ndryshueshëm i antitrupit i bashkuar nga një lidhës peptidik fleksibël, i cili mund të shprehet lehtësisht në një formë funksionale në sipërfaqen e fagut dhe për këtë arsye njihet zakonisht si një fragment i ndryshueshëm me një zinxhir të vetëm (scFv). Fragmenti scFv është njësia më e vogël e molekulës së imunoglobulinës (përveç nanotrupave) me funksion në aktivitetet e lidhjes së antigjenit dhe lejon që inxhinieria e proteinave të përmirësojë vetitë e scFv (fragment i ndryshueshëm me një zinxhir të vetëm) siç është rritja e afinitetit dhe ndryshimi i specifikës. Në Alpha Lifetech Inc., antitrupat scFv janë ndërtuar kryesisht nga hibridoma, qelizat e shpretkës nga minjtë e imunizuar dhe limfocitet B nga njerëzit. ARN totale ose ARNm së pari izolohet nga hibridoma, shpretka, qelizat limfatike dhe qelizat e palcës së kockave, e ndjekur nga transkriptimi i kundërt në ADNc për të shërbyer si një shabllon për amplifikimin e gjenit të antitrupave (PCR).

Zhvillimi i Antitrupave scFv - Teknologjia e Shfaqjes së Fagëve

Diversiteti i një biblioteke përcaktohet nga numri i kloneve të pavarura. Për të prodhuar një bibliotekë të madhe të antitrupave scFv, shkencëtarët tanë do të përdorin strategjinë tonë të patentuar me dy hapa për gjenerimin e bibliotekës. Në hapin e parë të procedurës së përshkruar, repertorët primarë përgatiten nga produktet PCR që kodojnë domenet VH, Vκ dhe Vλ, duke dhënë biblioteka tipike me madhësi mesatare (1 - 100 milion klone). Në hapin e dytë, fragmentet VH (ose VL) izolohen me anë të tretjes së ADN-së plazmid të pastruar nga repertorët primarë dhe klonohen në vektorin fagemid pranues që përmban repertorët VL (ose VH). Ky inovacion rrit ndjeshëm madhësinë e bibliotekave (1010-1012 klone).

Shqyrtim në shkallë të gjerë dhe me rendiment të lartë i antitrupave scFv

Për përgatitjen në shkallë të gjerë të scFv, është e qartë se zgjedhja e strehuesit të shprehjes do të ketë një ndikim të rëndësishëm në hartimin e procesit, strategjitë e përpunimit në fazën pasuese dhe koston e procesit. Zgjedhja e rrugës së prodhimit do të varet nga rëndësia e modifikimit pas-përkthimor dhe afati kohor për zhvillimin klinik dhe ekonominë, të cilat gjithashtu varen në thelb nga 'sistemi strehues'. Nuk ka një sistem universal shprehjeje që siguron nivele të larta të shprehjes së produktit për një gamë të gjerë antitrupash ose edhe proteinash të ndryshme.