Shërbim Ndërtimi të Linjave Qelizore Stabile

Alpha Lifetech është angazhuar thellësisht në fushën e zhvillimit të procesit të ndërtimit të linjave qelizore të qëndrueshme për shumë vite. Ajo ka ndërtuar një platformë të përsosur të procesit të ndërtimit të linjave qelizore të qëndrueshme, me më shumë se 300 lloje qelizash tumorale dhe qelizash primare, që mund të ofrojnë linja qelizore të qëndrueshme duke kursyer kohë për kërkime shkencore ose kërkime projektesh, dhe duke lehtësuar prodhimin pasues. Alpha Lifetech gjithashtu mund t'u ofrojë klientëve shërbime të tilla si zhvillimi i procesit të llojit, shqyrtimi i llojit, ndërtimi i llojit, proteina rekombinante dhe prodhimi i antitrupave, duke ofruar një bazë kërkimore për barnat e reja.

Alpha Lifetech ka një platformë qelizore të infektuar me lentivirus, e cila mund të personalizojë procesin eksperimental për lloje të ndryshme të llojeve të transmutacionit të qëndrueshëm të qelizave. Ne përdorëm teknologjinë e heqjes së gjenit për të ndërtuar linjat qelizore CRISPR/Cas9. Teknikat e mbishprehjes së gjenit dhe heshtjes së gjenit u përdorën për të stabilizuar llojet e transmutacionit. Integrimi specifik i vendit të gjenit përfundon shërbimet e ndërtimit të linjës qelizore të integrimit të kulmeve.

Hyrje në ndërtimin e linjave qelizore të qëndrueshme

Një linjë qelizore e qëndrueshme i referohet linjës qelizore që integron gjenet e huaja në gjenomën e qelizës pritëse në mënyrë që gjenet e huaja të mund të shprehen në mënyrë të qëndrueshme në qelizën pritëse për një kohë të gjatë. Parimi është që gjeni i huaj të reduktohet në një vektor me një rezistencë të caktuar, të transfektohen qelizat pritëse, të integrohet gjeni i huaj në kromozomin pritës dhe të shqyrtohen gjenet e rezistencës të përmbajtura në vektor për të përftuar linja qelizore të qëndrueshme me shprehje të lartë të proteinës së synuar ose heshtje të qëndrueshme të gjenit të synuar që plotësojnë kërkesat e eksperimentit.

Alpha Lifetech ka një punishte të pavarur ruajtjeje, sistemin perfekt të menaxhimit të ngrirjes dhe ruajtjes së qelizave, dhe më shumë se 300 lloje qelizash tumorale dhe qelizash primare nga të cilat mund të zgjidhni, të dedikuara për kërkimin tuaj shkencor.

Procesi i ndërtimit të qëndrueshëm të linjës qelizore

Metoda e ndërtimit të linjës qelizore të qëndrueshme

Metodat e ndërtimit të linjave qelizore të qëndrueshme përfshijnë shqyrtimin e ndërmjetësuar nga lentivirusi, të ndërmjetësuar nga transpozoni, të ndërmjetësuar nga CRISPR/Cas9 dhe të plazmideve.

Metoda e ndërmjetësuar nga lentivirusi është një nga metodat më të përdorura për të ndërtuar linja qelizore të qëndrueshme. Kjo qasje ka avantazhin e infektimit të pothuajse të gjitha llojeve të qelizave dhe integrimit të materialit gjenetik në gjenomën e qelizës pritëse për shprehje të qëndrueshme gjatë një periudhe të gjatë. Megjithatë, ky sistem ka kufizime të caktuara, dhe lentivirusi ka një kapacitet të kufizuar paketimi, kështu që nuk është i përshtatshëm për transkriptimin e gjeneve me rajone të gjata transkriptimi.

Krahasuar me ndërmjetësimin e lentivirusit, ndërmjetësimi i transpozonit nuk ka kufizime në madhësinë e gjenit, dhe me optimizimin e vazhdueshëm të teknologjisë, efikasiteti i futjes së transpozonit është përmirësuar disa herë. Disavantazhi është se disa kufizime në qelizat primare dhe qelizat janë të vështira për t'u transfektuar.

CRISPR/Cas9 i ndërmjetësuar nga CRISPR përmban eliminimin e gjenit crispr dhe eliminimin e gjenit crispr. Eliminimi i gjenit crispr i referohet futjes së prerjes së dyfishtë të ADN-së, duke rezultuar në humbjen e funksionit të gjenit të synuar. Eliminimi i gjenit crispr i referohet fragmenteve të huaja të ADN-së në gjene specifike, të cilat mund të përdoren për të riparuar gjenet defektoze ose për të futur gjene të reja funksionale.

Shqyrtimi i plazmideve është skema më primitive e ndërtimit të linjës qelizore, e cila vetëm duhet të transfektojë me sukses plazmidin e synuar në qelizë dhe të përdorë rezistencën përkatëse në shqyrtimin afatgjatë. Pastaj një probabilitet i caktuar për të marrë linja qelizore të qëndrueshme.

Metodat e ndërtimit të linjave të ndryshme qelizore të qëndrueshme

Metoda e Ndërmjetësimit	Sistemi i Lentivirusit	Sistemi i Transpozonit	Ndërmjetësuar nga CRISP/Cas9	Shqyrtimi i plazmideve
Kapaciteti i transportuesit	5 kb	10 kb	5 kb	10 kb
Efikasitet i Ndërmjetësuar	I lartë	Normale	Normale	I ulët
Kronologjia	1-2 javë	3-4 javë	3-4 javë	4-6 javë
Avantazhi	I shpejtë dhe efikas	Siguria dhe stabiliteti	Integrimi i pikave fikse	Kosto më e ulët
Mangësi	Rreziku i biosigurisë	Bollëku i shprehjeve normal	Transduksioni CAS9 është i vështirë dhe i kushtueshëm	Efikasitet i ulët dhe paqëndrueshmëri

Vështirësi teknike në ndërtimin e linjave qelizore të qëndrueshme

Përpara shkallëzimit të procesit, përdoret një bioreaktor i vogël për të përcaktuar parametra të tillë si gazi, sistemi i lëngjeve të kulturës, stresi minimal hidrodinamik i aplikuar në qeliza, etj., për të siguruar kulturë në shkallë të ndërthurur. Megjithatë, edhe nëse përcaktohen parametrat përkatës të procesit, mjedisi i bioreaktorëve të mëdhenj në prodhues do të jetë i pabarabartë dhe është e lehtë të dështojë. Alpha Lifetech ka shumë vite përvojë në kulturën në shkallëzim të procesit, e cila mund të shmangë gabimet në një farë mase, të zvogëlojë rreziqet dhe të përmirësojë shumë shkallën e suksesit. Në të njëjtën kohë, Alpha Lifetech siguron qëndrueshmërinë e lëndëve të para dhe grupeve të mediave të përdorura, duke zvogëluar shkallën e dështimit të shkallëzimit të procesit të kulturës qelizore.

Alpha Lifetech ka një platformë gjithëpërfshirëse dhe të qëndrueshme të zhvillimit të proceseve të linjave qelizore për të siguruar stabilitetin e linjave qelizore gjatë prodhimit. Ne gjithashtu mund t'ju ofrojmë shërbime të personalizuara për të përmbushur nevojat tuaja.

Shërbimi i Ndërtimit të Linjave të Qelizave Stabile

Përmbajtja	Kronologjia
Kultura e linjës qelizore HEK293 e ofruar nga klienti.	3-5 muaj
Ndërtimi i plazmidit sgRNA-Cas9 (me gjenin skrining G418).
Shablloni i sgRNA-Cas9 dhe shablloni i ADN-së së riparimit u transferuan së bashku në linjën qelizore HEK293.
Shqyrtimi i linjës qelizore monoklonale (gjeni GFP klon pozitiv me trokitje).
Dorëzimi: Vektor, lloji i knock-in i gjenit GFP, rezultatet e sekuencimit, të gjitha të dhënat e papërpunuara, raporti i laboratorit

Qelizat mund të gjurmohen

Qelizat blihen nga organizata profesionale si ATCC dhe mund të ofrojnë prova për të përmbushur kërkesat tuaja të regjistrimit.

Avantazhi i prodhimit

Alpha Lifetech ka shumë vite përvojë për të përmbushur nevojat e ndryshme të zhvillimit; Ne kemi një shumëllojshmëri qelizash, një punishte të pavarur magazinimi, ngrirje perfekte të qelizave dhe një sistem menaxhimi magazinimi.

Kontrolli i cilësisë së projektit

Çdo projekt i nënshtrohet proceseve të rrepta të kontrollit të cilësisë për të siguruar ofrimin e linjave qelizore që përmbushin standarde të larta për klientët.

Avantazhi teknik

Përveç inxhinierëve me përvojë të gjerë celulare, ne kemi algoritme evolucionare të teknologjisë së përparuar për të përmirësuar kushtet e reaktorit dhe për të modifikuar parametrat e procesit.

Nëse keni ndonjë pyetje, ju lutemi të na kontaktoni në çdo kohë.

Leave Your Message

Shërbim i Sugjeruar

0102