Увод у услугу дисплеја фага

Приказ фага, као молекуларна техника заснована на генетској модификацији ДНК фага, постао је молекуларно моћан алат за генерисање молекуларних сонди против специфичних циљева представљањем ових фрагмената на површини фага и на тај начин селектовањем фрагмената пептида/антитела са специфичним својствима везивања из великог броја варијанти (библиотека). А технологија приказа фага има следеће предности:

1. Фаг дисплеј је једноставан за руковање, ниске цене и траје само неколико недеља.

2. Фаг дисплеј има велики опсег скрининга од 10^7-10^9.

3. Фаг дисплеј је погодан за рад на нивоу гена, тако да се ген и фенотип могу објединити.

4. Антитела за приказ фага могу се бирати за више циклуса елуирања и могу се чувати током дужег временског периода

5. Фаг дисплеј омогућава производњу хуманизованих антитела са већом вредношћу употребе.

Слика 1: Принцип приказа фага

Наш систем за приказ фага

Главне информације система за приказ фага М13/Т4/Т7 приказане су у табели 1.

Алпха Лфетецх може да обезбеди

Пхаге Дисплаи обједињује генотип и фенотип у једно, комбинујући селективност и појачање са моћним могућностима скрининга. Алпха Лифетецх може да пружи широк спектар услуга за развој антитела са екраном фага.
Главне услуге укључују: платформу библиотеке ВХХ антитела, платформу библиотеке сцФв антитела, платформу библиотеке Фаб антитела, платформу за изградњу библиотеке фага, платформу за скрининг библиотеке фага и услугу хуманизације антитела и друге услуге.

Процес развоја антитела на дисплеју фага

1. Укупна РНК или мРНК се екстрахује из периферне крви или лимфоидног ткива;
2. Да се ​​преокрене транскрипција РНК у цДНК првог ланца коришћењем насумичних шест-базних прајмера;
3. Користимо цДНК за амплификацију протеинског гена и дизајнирамо више комбинација прајмера за реплицирање и амплификацију гена В фрагмента лаког ланца и гена В фрагмента тешког ланца, респективно, из библиотеке цДНК;
4. Користили смо преклапајући ПЦР да спојимо секвенце гена В фрагмента лаког ланца и В фрагмента тешког ланца у један комад
5. Успешно везани лаки и тешки ланци су интегрисани у вектор фага;
6. Пламид фага који је успешно повезан са егзогеним протеинским генима уведен је у бактерију домаћина Е. цоли;
7. Користимо помоћне фаге за суперинфицирање бактерија домаћина;
8. Фаг иницира репликацију ролне, генеришући једноланчану ДНК и реплицирајући капсидни протеин;
9. Састављање фага је завршено и сазревање фага се ослобађа из цитоплазме домаћина у околину;
10. Елуција библиотеке фага.

Слика 3 Процес синтезе антитела дисплеја фага