Услуга скрининга аптамера за више мета

Вишециљни аптамер је посебан аптамер нуклеинске киселине који има способност да се веже за неколико различитих циљних молекула истовремено. Скрининг вишециљних аптамера компаније Alpha Lifetech углавном користи SELEX технологију или варијанте SELEX технологије за идентификацију и изолацију аптамера који се могу ефикасно везати за више циљних молекула истовремено из великог броја насумичних једноланчаних секвенци нуклеинских киселина.

Вишециљни аптамери могу се истовремено везати за више циљева, пружајући свеобухватнији и прецизнији терапеутски ефекат. Развој вишециљних аптамера има за циљ побољшање специфичности и ефикасности терапеутских средстава и смањење нежељених ефеката. Ова стратегија дизајна помаже у превазилажењу ограничења терапије са једним циљем и побољшању укупне ефикасности и безбедности лечења. Ови аптамери имају широк потенцијал примене у развоју лекова, идентификацији болести, развоју биосензора и другим областима.

Увод у магнетне перле SELEX

SELEX метода са магнетним куглицама је често коришћена метода у скринингу вишециљних аптамера. На основу карактеристика раздвајања магнетних куглица, она може ефикасно и практично да скринира аптамере са високим афинитетом и високом специфичношћу везивања за циљне молекуле из великог броја кандидатских аптамера.

Суштина SELEX методе магнетних перли је коришћење карактеристика раздвајања магнетних перли. Површина магнетне перле може се спојити са специфичним циљним молекулима. Када се кандидатски аптамер веже за циљни молекул, аптамер везан за површину магнетне перле може се лако одвојити од слободног аптамера дејством магнета. Ова метода је једноставна за употребу, не захтева сложене инструменте и има високу ефикасност и чистоћу раздвајања.

Општи кораци за магнетне перле SELEX

Изградња и припрема библиотеке Аптамера

Прво, потребно је да направите библиотеку аптамера која садржи велики број случајних секвенци које имају потенцијал да се вежу за више циљних молекула. Секвенце нуклеинских киселина у библиотеци се затим денатуришу и ренатуришу како би се везале за циљни молекул.

Спајање циљног молекула на површини магнетне перле

Магнетна куглица се активира тако да њена површина има функционалне групе које се могу везати за циљни молекул. Циљни молекул се затим спаја са површином магнетне куглице да би се формирао комплекс куглица-циљ.

Везивање аптамера за циљ

Третирана нуклеинска киселина из библиотеке се инкубира са комплексом магнетних куглица-циљ, омогућавајући аптамеру да се веже за циљни молекул. Фактори као што су време инкубације, температура и количина магнетних куглица и библиотеке утицаће на ефикасност везивања, тако да је потребна оптимизација.

Магнетна сепарација и обогаћивање

Користећи дејство магнета, аптамер везан за површину магнетне куглице се одваја од слободног аптамера. Затим су невезане секвенце нуклеинских киселина уклоњене испирањем и центрифугирањем, и добијени су обогаћени аптамери.

Амплификација и итеративни скрининг

Обогаћени SELEX аптамери су амплификовани PCR методом како би се добио довољан број SELEX аптамера за следећу рунду скрининга. Кроз више рунди скрининга и амплификације, могу се постепено скринирати аптамери са високим афинитетом и високом специфичношћу за више циљева.

Сл. 1 Аптамер SELEX скринингом магнетних куглица

Друга техника скрининга вишециљних аптамера

Комплексни циљеви SELEX

SELEX за комплексне циљеве је метода скрининга за комплексне циљеве као што су протеински комплекси, рецептори на површини ћелија итд. Због вишеструких места везивања и сложене просторне структуре комплексних циљева, традиционалним SELEX методама може бити тешко да добију аптамере високог афинитета и високе специфичности. Стога, SELEX за комплексне циљеве побољшава способност везивања аптамера за комплексне циљеве оптимизацијом услова скрининга, увођењем помоћних молекула или усвајањем вишестепених стратегија скрининга.

Бројач SELEX

Контра SELEX је метода за побољшање специфичности аптамера увођењем SELEX негативне селекције. У процесу скрининга, поред SELEX позитивне селекције (везивање за циљне молекуле), врши се и SELEX негативна селекција (везивање за нециљне молекуле) како би се уклониле секвенце које се везују за ове нециљне молекуле.

Укључи/искључи SELEX

Тоггл СЕЛЕКС је метода скрининга за вишеструке циљеве или динамички променљиве циљеве. Наизменичним коришћењем различитих циљних молекула за скрининг, могу се скринирати аптамери који се могу везати за више циљева истовремено или се везати за исту мету у различитим стањима. Ова метода има потенцијалне примене у областима развоја лекова, идентификације болести и праћења лечења.

Услуге скрининга аптамера за ток рада вишеструких мета

	Процес	Садржај услуге	Временска линија
1	Скрининг аптамера нуклеинских киселина	--Купац пружа информације о циљевима скрининга, а Алфа Лајфтек спроводи евалуацију пројекта и рад на модификацији (конвенционална модификација: модификација биотина). --Обогаћивање и скрининг библиотеке: 6-10 рунди скрининга, скрининг са негативним SA перлама. NGS секвенцирање. --Испорука: 10-50 аптамерних секвенци, укључујући учесталост појављивања. Експериментални извештај.	8-12 недеља
2	Синтеза аптамера и одређивање афинитета	--Синтетички аптамери обележени биотином (дизајнирани и синтетизовани према специфичним условима). --Брзо одређивање афинитета аптамера и циља (афинитетно секвенцирање). --Испорука: извештај о синтези, извештај о тесту афинитета, оригинални подаци.	3-4 недеље

ПредностиУслуга скрининга аптамера

Посвећени смо пружању висококвалитетних услуга скрининга аптамера са високим афинитетом нашим клијентима.

Више циљева

Широк спектар циљева скрининга, укључујући протеине, мале молекуле, пептиде и металне јоне итд.
више метода

Доступне су различите методе скрининга, укључујући традиционалне SELEX, CE-SELEX, Cell-SELEX, GO-SELEX и Capture-SELEX.
осигурање квалитета

Имамо професионални тим са искуством у развоју адаптера, а наши експериментални подаци су аутентични и поуздани, пружајући решења.
Техничка подршка

Имамо комплетну опрему за завршетак низводне оптимизације и валидације, производњу аптамера високог афинитета и високе специфичности, са повољним ценама и вишим квалитетом.