Платформа за синтезу аптамера
У зависности од циља, аптамери нуклеинских киселина укључују ДНК аптамере, РНК аптамере, протеинске аптамере и аптамере ћелијске мембране.
КОНТАКТИРАЈТЕ НАС01
Платформа за синтезу аптамера
Увод у аптамере нуклеинских киселина
Аптамери нуклеинских киселина, такође познати као аптамери, комплекси и хемијска антитела, добијају се ин витро селекс скринингом техником еволуције система експоненцијалног обогаћивања лиганда (SELEX). То је једноланчана дезоксирибонуклеинска киселина (ссДНК) или рибонуклеинска киселина (РНК) која се специфично и ефикасно везује за циљни молекул и обично се састоји од 20-80 база.
Нуклеински аптамери добијени ин витро скринингом су структурно стабилни, једноставни за синтезу и лако модификацију, и супериорнији су у односу на уобичајено коришћена биолошки изведена антитела у погледу синтезе и примене; поред тога, нуклеински аптамери се могу специфично везати за своје мете путем различитих сила, генерално, они интерагују са малим молекулима на основу широког спектра конформација (нпр. укоснице, конкавно-конвексне, псеудо-увијене итд.) путем водоничних веза, електростатичких сила, хидрофобних интеракција итд. У зависности од мете, нуклеински аптамери укључују ДНК аптамере, РНК аптамере, протеинске аптамере и аптамере ћелијске мембране.
Платформа за синтезу аптамера компаније Alpha Lifetech, која углавном укључује услугу синтезе SELEX аптамерске библиотеке и услугу развоја аптамера (ДНК, РНК или XNA), као и услуге низводног скрининга аптамера, оптимизације аптамера и анализе идентификације аптамера.
Технички процес синтезе аптамера
Основни принцип и технолошки процес
Процес синтезе аптамера нуклеинских киселина је такав да се библиотека једноланчаних олигонуклеотида хемијски синтетише in vitro, помеша са циљном супстанцом, и комплекс циљне супстанце и нуклеинске киселине је присутан у смеши, нуклеинска киселина која се не везује за циљну супстанцу се испира, а молекули нуклеинске киселине који се везују за циљну супстанцу се изолују, а молекули нуклеинске киселине се користе као шаблони за извођење PCR амплификације за следећу рунду скрининга. Поновљеним селекс скринингом и амплификацијом, неки молекули ДНК или РНК који се не везују за циљну супстанцу или имају низак или умерен афинитет за циљну супстанцу биће испрани, а аптамери, тј. ДНК или РНК са високим афинитетом за циљну супстанцу, биће одвојени из веома велике насумичне библиотеке, а њихова чистоћа ће се повећавати са SELEX процесом, и на крају ће заузети велики део библиотеке.
Кључне тачке техничког процеса
Процес селекс скрининга аптамера нуклеинских киселина почиње састављањем хемијски синтетизованих библиотека случајних олигонуклеотида. Библиотеке случајних олигонуклеотида имају велики капацитет библиотеке. Велика разноликост је њихова значајна предност. Теоретски, ако се случајна секвенца у олигонуклеотиду састоји од n база, капацитет библиотеке је 4n. Ако узмемо у обзир библиотеку вештачке модификације, то ће повећати разноликост случајних секвенци. Тренутно, дужина случајних секвенци олигонуклеотида које се обично користе у SELEX експериментима је генерално 30 база, а капацитет библиотеке може бити и до 10^18. Капацитет библиотеке је кључан за селекс скрининг лиганда високог афинитета. Међутим, пошто је концентрација синтетичких библиотека одређена, предугачке случајне секвенце ће смањити обиље сваког олигонуклеотида у библиотекама, што ће смањити вероватноћу селекс скрининга за одређени аптамер. Генерално, капацитет библиотеке од 10^13~10^15 у првом кругу селекс скрининга може задовољити практичне потребе.
Сл. 1 SELEX технички процес
Предности аптамера нуклеинских киселина
| Предности | Детаљи |
|---|---|
| Директно | Избегавање традиционалног процеса експеримената на животињама и директна селекција из in vitro библиотека; селекс скрининг за аптамере циљних молекула који су неимуногени, ниско имуногени или чак токсични. |
| Широк спектар примене | Циљни молекули могу бити органске боје, аминокиселине, протеини, антибиотици, пептиди, витамини, лекови, чак и ћелије, патогени, вируси, ткива итд. |
| Јак афинитет | Аптамери показују високу специфичност и афинитет за ин витро скрининг циљних молекула. |
| Стабилност | Аптамери су мале величине, лако се добијају, репродуцибилни су у синтези, а њихова стабилност се може побољшати хемијском синтезом и модификацијом. Аптамери су хемијски стабилни, имају дуг рок трајања и могу се транспортовати на собној температури. |
01/
Клиничка медицина: циљана терапија тумора, технике дијагностике рака
Кредитни извештаји компаније Gladtrust су успешно израђени на основу највеће онлајн базе података о пословним кредитима - CreditVision.
База података благовремено прикупља и динамички ажурира информације из више од 200.000 извора података. Процес ажурирања и управљања информацијама може гарантовати тачност информација.
База података благовремено прикупља и динамички ажурира информације из више од 200.000 извора података. Процес ажурирања и управљања информацијама може гарантовати тачност информација.
02/
Област аналитичког испитивања: детекција органских загађивача, детекција лекова малих молекула, детекција патогена који се преносе храном
У овој области, технологија синтезе аптамера нуклеинских киселина биће коришћена заједно са имунохроматографијом колоидног злата, у којој ће се колоидно злато прво припремити и идентификовати квалитет, а затим повезати са аптамером нуклеинских киселина, окарактерисати и прскати на везујућу подлогу, а тест траке ће бити припремљене коришћењем поликлоналног антитела које треба детектовати као линије детекције и комплементарне секвенце аптамера нуклеинских киселина као линије контроле квалитета, како би се анализирало присуство циљне супстанце на основу резултата негативних и позитивних експеримената.
03/
Биолошка област: развој биосензора
Сензори нуклеинских аптамера користе аптамер као елемент препознавања за препознавање циљне супстанце и претварање резултата препознавања у сигнал који се може мерити. Конверзија сигнала може бити електрохемијска, оптичка, температурска, пиезоелектрична, магнетна и микромеханичка или комбинација ових техника. У поређењу са постојећим методама детекције, сензори засновани на нуклеинским аптамерима су генерално једноставни за руковање, специфични, брзо реагују и осетљиви, а ове предности их чине лакшим за примену у реалним узорцима и имају добре изгледе за развој.
SELEX услуга синтезе аптамера
Алфа Лајфтекова услуга синтезе SELEX аптамера укључује изградњу библиотеке SELEX аптамера, оптимизацију SELEX-а итд. Алфа Лајфтекова циља је да добије SELEX аптамере високог афинитета и високе специфичности за купце путем процеса скрининга in vitro.
ПРОЧИТАЈ ВИШЕ
Служба за развој аптамера нуклеинских киселина
Услуга развоја аптамера нуклеинских киселина компаније Alpha Lifetech углавном се бави SELEX технологијом за скрининг SELEX аптамера, укључујући развој ДНК аптамера, РНК аптамера и XNA аптамера, што укључује дизајн библиотека, синтезу олигонуклеотида, изградњу и верификацију библиотека.
ПРОЧИТАЈ ВИШЕАко имате било каквих питања, слободно нас контактирајте у било ком тренутку.
Leave Your Message
16.07.2018. 
0102