1960. године предложен је концепт биспецифичних антитела. Биспецифична антитела, позната и као биспецифична моноклонска антитела, су вештачки синтетизована антитела коришћењем технологије генетског инжењеринга. Као конструисано вештачко антитело, биспецифична антитела обично припадају подкласи ИгГ и садрже фрагмент који се везује за антиген који циља на ЦД3 подјединицу. Биспецифична антитела имају два специфична места за везивање антигена која могу истовремено да вежу и препознају два различита антигена, или два различита епитопа антигена. У поређењу са моноклонским антителима, биспецифична антитела имају додатно специфично место везивања антигена, чиме поседују јачу специфичност и способност циљања, што може прецизније да циља туморске ћелије и смањи токсичност ван циља. Биспецифична антитела могу истовремено да обављају више биолошких функција, као што су регрутовање имуних ћелија, блокирање сигналних путева и директно убијање туморских ћелија. Рана биспецифична антитела су углавном припремана хемијском коњугацијом или фузијом ћелија, али овај метод је можда споро напредовао због насумичне комбинације и потешкоћа у изоловању циљне комбинације. Уз континуирани развој технологије генетског инжењеринга, развијене су многе нове технолошке платформе, као што су чворови у рупама (КИХ), ЦроссМаб, ДВД Иг, итд. Ове платформе ефикасно решавају проблеме као што су неусклађеност тешког и лаког ланца, и побољшавају униформност и принос биспецифичних антитела.

Главне методе за производњу биспецифичних антитела укључују хемијско спајање, хибридом из четири извора и припрему антитела генетског инжењеринга. Међу њима, метод хемијског спајања спаја два интактна ИгГ или два Ф (аб ') 2 фрагмента антитела у биспецифична антитела коришћењем хемијских средстава за спајање као што су фталимид и дитиоацилбензојева киселина. Овај метод је једноставан и лак за употребу, али може оштетити место везивања антигена, смањити активност антитела, а сам агенс за спајање такође има одређени степен канцерогености. Метода хибридома са четири извора заснива се на фузији соматских ћелија из две различите ћелијске линије хибридома да би се експримирао одговарајући мишји ИгГ. Кроз технологију генетског инжењеринга, антитела се могу генетски модификовати да би се формирала биспецифична антитела. Конструисана су два различита моноклонска антитела, а Фаб фрагменти или варијабилни региони тешког и лаког ланца два антитела су одвојено одвојени. Кроз реакцију унакрсног повезивања или технологију ланчане рекомбинације, два фрагмента су комбинована да би се формирало биспецифично антитело. Иако је сложеност технологије генетског инжењеринга релативно висока, она је тренутно најчешће коришћена метода за производњу биспецифичних антитела за прилагођавање структуре и функције антитела. Када се спроводи дизајн биспецифичних антитела, може се користити принцип унакрсне реактивности антитела, али унакрсна реактивност антитела може изазвати неспецифичне реакције, тако да ће се пажљиво размотрити у практичној примени дизајна биспецифичних антитела, као што је терапија биспецифичним антителима.

Пречишћавање биспецифичних антитела је процес изоловања и пречишћавања циљних антитела високе чистоће. За уклањање неких растворљивих нечистоћа користе се две методе, центрифугирање и дубинска филтрација. Циљно биспецифично антитело се иницијално хвата афинитетном хроматографијом. За биспецифична антитела слична ИгГ користи се афинитетна хроматографија за протеин А, док се за биспецифична антитела слична ИгГ може користити афинитетна хроматографија заснована на лаком ланцу. Након тога, антитело се инкубира у условима ниског пХ током одређеног временског периода, што доводи до поремећаја структуре протеина на површини омотача вируса, чиме се губи способност да инфицира ћелије. Интермедијерна дубока филтрација се врши да би се даље уклониле нечистоће као што су протеини ћелије домаћина (ХЦП). Чистоћа антитела се побољшава методама као што је хроматографија измене јона, а сви заостали вируси се уклањају нанофилтрацијом или техникама ултрафилтрације. Коначно, узорак је концентрован и замењен одговарајућим пуфером за формулацију.