Хибридомска технолошка платформа

Алфа Лајфтек има богато искуство у области развоја антитела. Током година, Алфа Лајфтек је успоставио свеобухватну платформу за развој антитела (укључујући развој моноклонских антитела, развој поликлонских антитела, развој рекомбинантних моноклонских антитела и друге услуге припреме и развоја антитела).

Алфа Лајфтек пружа купцима производе и услуге у вези са антителима и рекомбинантним антителима гарантованог квалитета, а припремљена антитела имају јаку специфичност и добру стабилност. Вишеструки инструменти и опрема за пречишћавање антитела могу се користити за пружање услуга пречишћавања антитела из различитих извора као што су моноклонска антитела зеца, оваца, пилетине, миша, као и услуге афинитетног пречишћавања протеина А/Г и услуге раздвајања антитела.

На основу различитих техника припреме антитела, као што је технологија хибридомских ћелија, Алфа Лајфтек може да пружи прилагођене услуге за моноклонска и поликлонска антитела различитих врста. Поред тога, може се пружити и низ услуга, од секвенцирања високог протока, припреме антитела, пречишћавања антитела до валидације антитела. Изабраћемо метод пречишћавања на основу специфичне намене купца. На основу свеобухватних платформских система као што су платформа за развој антитела и протеинска платформа, Алфа Лајфтек покрива узводне и низводне услуге производње антитела, пружајући пречишћавање антитела, секвенцирање антитела високог протока, валидацију антитела и друге техничке услуге.

Хибридомска технологија

Технологија хибридома може се користити за припрему моноклонских антитела. Спајањем ћелија слезине имунизованих мишева са ћелијама мијелома људи или мишева, формирају се хибридомске ћелије које луче специфична антитела. Генерисана моноклонска антитела изведена из миша могу се користити у научним истраживањима као што су ензимски имуносорбентни тест, радиоимунолошки тест, имунохистохемија, проточна цитометрија, пречишћавање протеина итд. Узорци моноклонских антитела укључују асцитес, супернатант хибридома итд. Узорак добијен убризгавањем ћелија хибридома у трбушну дупљу животиња и коришћењем физиолошког окружења трбушне дупље животиње за производњу антитела назива се узорак асцитеса. Ћелије хибридома убризгане у трбушну дупљу животиња могу се размножавати и лучити моноклонска антитела, која се могу акумулирати у асцитесу. Због могућности присуства нечистоћа (животински протеини, хормони итд.) у овим антителима, потребно је пречишћавање. На основу функције секреције Б лимфоцита, моноклонска антитела се често луче у медијум за култивацију приликом култивације ћелија хибридома. Течност која садржи моноклонска антитела у медијуму за култивацију назива се супернатант хибридома. Чистоћа моноклонских антитела у супернатанту је релативно висока, али је потребно даље пречишћавање за припрему великих размера јер се добијају ин витро културом.

Пречишћавање антитела може изоловати антитела високе чистоће из комплекса. Тренутно су афинитетно пречишћавање антитела и раздвајање и пречишћавање антитела уобичајене методе пречишћавања антитела, углавном укључујући пречишћавање протеина А/Г, јоноизмењивачку хроматографију, гел филтрацију, таложење и хидрофобно-интеракцијску хроматографију. Међу њима, услуга афинитетног пречишћавања протеина А/Г је веома популарна у различитим применама пречишћавања антитела. Процес припреме моноклонских антитела компаније Алфа Лајфтек на основу хибридомске технологије приказан је на слици 1.

Сл.1 Дијаграм процеса за припрему моноклонских антитела заснованих на хибридомској технологији.

Конјугат антитела и лекова и технологија хибридома

Коњугат антитела и лека (ADC) је нови биолошки агенс који хемијски спаја антитела са цитотоксичним лековима. Коњугат антитела и лека комбинује специфичну способност препознавања антитела са снажним дејством убијања цитотоксичних лекова и прецизно испоручује цитотоксичне лекове у туморске ћелије путем антитела, чиме се постиже прецизан третман. Део антитела у ADC лековима се често припрема помоћу хибридомске технологије или других техника производње антитела, као што је технологија генетског инжењеринга антитела. Хибридомска технологија обезбеђује висококвалитетне сировине за антитела за ADC лекове. ADC лекови и моноклонска антитела припремљена помоћу хибридомске технологије играју важну улогу у областима као што је лечење рака. Могу се користити сами или у комбинацији ради побољшања терапијске ефикасности.

Моноклонална антитела припремљена хибридомском технологијом имају високу специфичност, могу прецизно да се вежу и препознају специфичне антигене и могу се производити у великим размерама. Помоћу технологије секвенцирања хибридома, гени антитела у хибридомским ћелијама могу се екстраховати и секвенцирати да би се добиле одговарајуће секвенце, што је корисно за каснију експресију антитела. Моноклонална антитела припремљена хибридомском технологијом могу се користити за детекцију специфичних маркера болести, као што су туморски маркери, вирусни антигени итд., пружајући снажну подршку раној дијагнози болести. Поред тога, могу се користити и у експериментима као што су имуноблотинг и имунохистохемија за проучавање експресије, локализације, структуре и функције протеина.

хибридомска технологија Производња антитела ток рада

Кораци	Садржај услуге	Временска линија
Корак 1: Имунизација животиња	(1) Имунизација животиња 4 пута, додатна имунизација 1 доза, укупно 5 доза имунизовано. (2) Прикупљен је негативан серум пре имунизације, а ELISA је урађена на четвртој дози ради детекције титра серума. (3) Ако титар серумских антитела четврте дозе испуњава захтеве, једна додатна доза имунизације ће бити примењена 7 дана пре узимања крви. Ако не испуњава захтеве, рутинска имунизација ће бити настављена. (4) Квалификована потенција, ћелије слезине се изолоју за ћелијску фузију.	10-12 недеља
Корак 2: Фузија и скрининг	(1) Фузија: Након имунизације, ћелије слезине миша су сакупљене и спојене са ћелијама мијелома. (2) Пролиферација и скрининг: Добијене хибридомске ћелије су подвргнуте пролиферацији и ELISA скринингу како би се добили високо ефикасни клонови.	6 недеља
Корак 3: Подклонирање	Субклонирање 15-25 позитивних матичних ћелија коришћењем методе ограниченог разблаживања и коначно одређивање 10-15 позитивних клонова	3-4 недеље
Корак 4: Производња асцитеса и пречишћавање антитела	(1) Производња асцитеса: 10-15 хибридомских сојева се користи за производњу асцитеса код мишева (ако се добије велики број хибридомских сојева, они ће бити послати у ћелијском облику) (2) Идентификација асцитеса: ELISA детекција асцитеса, потенција (протеин/вирус>10^5, мали молекул/пептид>10^4) за даље пречишћавање (3) Пречишћавање протеина А/Г: Пречишћавање асцитеса	3-4 недеље
Корак 5: Достава	(1) Обезбедите 3-5 сојева хибридома моноклонских антитела. (2) Свака хибридомска ћелија обезбеђује 1 мг пречишћеног антитела (пречишћавање асцитеса). (3) Извештај о експерименталном процесу	1 недеља

Предност хибридомске технологије

Алфа Лајфтек има богато искуство у области развоја антитела. Током година, Алфа Лајфтек је успоставио свеобухватну платформу за развој антитела.

Више врста

Имунитет се може пружити разним животињама, укључујући, али не ограничавајући се на мишеве, зечеве, овце итд.

Вишеструки циљ

На основу хибридомске технологије, доступне су услуге откривања вишеструких циљних антитела: протеини, пептиди, мали молекули, вируси, мембрански протеини, мРНК итд.

Записи о следљивости

Стандарди контроле квалитета контроле квалитета (имунолошки потенцијал, контрола квалитета PBMC, контрола квалитета библиотеке и контрола квалитета валидације скрининга), експериментални извештаји на енглеском језику, оригинални експериментални записи

Персонализовани програм

Индивидуално персонализовано прилагођавање програма како би се задовољиле потребе истраживачких пројеката различитих клијената

Повезана УСЛУГА

Вишеструке стратегије развоја антитела

Служба за развој моноклонских антитела

Хибридомска технолошка платформа

Платформа за сортирање појединачних Б ћелија

Платформа за развој антитела са фагним приказом

развој моноклонских антитела - Алфа Лајфтех

Служба за развој моноклонских антитела

Можемо да пружимо висококвалитетне, високочисте и високо специфичне услуге развоја моноклонских антитела, укључујући производњу мишјих моноклонских антитела и зечјих моноклонских антитела.