Leave Your Message
слајд1

Платформа за развој антитела са фагним приказом

На основу свеобухватне изградње платформе система антитела, Алфа Лајфтек може да пружи техничке услуге од припреме антитела, пречишћавања антитела, секвенцирања антитела итд.

КОНТАКТИРАЈТЕ НАС
01

Платформа за развој антитела са фагним приказом


Алфа Лајфтек, са својим богатим искуством у пројектима откривања антитела, може да пружи прилагођене услуге моноклонских и поликлонских антитела за више врста, као и услуге изградње библиотека антитела и скрининга. Алфа Лајфтек може да пружи купцима производе антитела и рекомбинантних антитела гарантованог квалитета, као и одговарајуће услуге, за припрему ефикасних, високо специфичних и стабилних антитела. Коришћењем свеобухватних платформи антитела и инжењеринга антитела, пружамо услуге које покривају узводно и низводно деловање производње антитела, укључујући техничке услуге као што су припрема антитела, пречишћавање, секвенцирање антитела и валидација.

Алфа Лајфтек има зрелу платформу за откривање антитела која пружа купцима низ услуга, укључујући имунитет животиња, изградњу и скрининг библиотеке антитела за фагни дисплеј, секвенцирање антитела, експресију антитела, пречишћавање антитела, валидацију антитела и обележавање антитела засновано на технологији хибридома, технологији појединачних Б ћелија, технологији фагног дисплеја и још много тога. Алфа Лајфтек има стандардну производну линију, а поред услуга припреме антитела, могу се пружити и пратеће услуге као што су хуманизација антитела, сазревање афинитета антитела, дизајн и развој лекова ADC и дизајн накнадног секвенцирања CAR-T. Истовремено, Алфа Лајфтек је конструисао библиотеку антитела засновану на платформама технологије фагног дисплеја M13, T4 и T7, са капацитетом складиштења до 10^8-10^9. Стопа позитивних реакција, стопа уметања и разноликост библиотеке могу достићи преко 90%.

Технологија фагног приказа

Производња моноклонских антитела је првобитно припремљена коришћењем технологије хибридомских моноклонских антитела за производњу мишјег хибридомског моноклонског антитела. Конкретно, спајањем ћелија слезине имунизованих мишева са ћелијама мијелома људи или мишева, формирају се хибридомске ћелије које луче специфична хибридомска моноклонска антитела. Хуманизованом модификацијом мишјих моноклонских антитела и модификацијом генетског инжењеринга антитела како би им се дао константни регион хуманог имуноглобулина, може се смањити њихова имуногеност. Инжењеринг моноклонских антитела се широко користи у биомедицинским и клиничким применама.

Алфа Лајфтек може да пружи свеобухватне услуге инжењеринга антитела, од дизајна преклиничких истраживачких протокола до откривања коњугата антитела и лекова (ADC) и валидације на животињама. Коњугати антитела и лекова (ADC) могу да испоруче лекове за хемотерапију ћелијама рака. Након везивања за специфичне циљеве експримиране на ћелијама рака, ADC ослобађа цитотоксичне лекове у ћелије рака. Алфа Лајфтек такође може да пружи купцима свеобухватне услуге сазревања афинитета антитела. Са напредном оптимизацијом мутација и технологијом скрининга фага високог протока, антитела са одређеним афинитетом се прво скринира, а затим се уводе мутације аминокиселина да би се генерисале различите варијанте. Након тога, антитела високог афинитета су процењена и скринирана коришћењем техника скрининга. Након више рунди оптимизације и структурне анализе, на крају су добијена антитела са већим афинитетом и јачом специфичношћу.

Алфа Лајфтек може да конструише различите типове библиотека фагног приказа антитела, укључујући имунолошке библиотеке, нативне библиотеке, полусинтетичке библиотеке и синтетичке библиотеке. На основу високог капацитета библиотека антитела, могу се добити високо специфична антитела. Могу се обезбедити вишеструки фагемидни вектори као што су pMECS, pComb3X и pCANTAB 5E, као и сојеви као што су TG1 E. coli, XL1 Blue и ER2738. Поред капацитета библиотеке до 10^9, стопа уметања циљних фрагмената библиотеке је такође висока, стварајући довољне услове за скрининг антитела који задовољавају купце. Дијаграм тока услуге припреме антитела Алфа Лајфтека засноване на технологији фагног приказа приказан је на слици 1.

фагни дисплеј - Алфа Лајфтех
Сл.1 Дијаграм процеса за припрему моноклонских антитела заснованих на технологији фагног приказа.

Ток рада за производњу антитела на фагном дисплеју

Кораци Садржај услуге Временска линија
Корак 1: Имунизација животиња
(1) Имунизација животиња 4 пута, додатна имунизација 1 доза, укупно 5 доза имунизовано.
(2) Прикупљен је негативан серум пре имунизације, а ELISA је урађена на четвртој дози ради детекције титра серума.
(3) Ако титар серумских антитела четврте дозе испуњава захтеве, једна додатна доза имунизације ће бити примењена 7 дана пре узимања крви. Ако не испуњава захтеве, рутинска имунизација ће бити настављена.
(4) Квалификована јачина, сакупљање крви и одвајање моноцита
10 недеља
Корак 2: Припрема цДНК
(1) Екстракција укупне РНК ПБМЦ (комплет за екстракцију РНК)
(2) Припрема цДНК методом високе прецизности помоћу RT-PCR методе (комплет за реверзну транскрипцију)
1 дан
Корак 3: Изградња библиотеке антитела
(1) Користећи цДНК као шаблон, гени су амплификовани помоћу два круга PCR-а.
(2) Конструкција и трансформација фага: сплајсовање гена фагемидног вектора, трансформација електропорацијом TG1 бактерије домаћина, конструисање библиотеке антитела.
(3) Идентификација: Насумично одабрати 24 клона, стопа позитивних PCR идентификација + стопа инсерције.
(4) Припрема фага уз помоћ: амплификација + пречишћавање фага М13.
(5) Спасавање библиотеке фагног дисплеја
3-4 недеље
Корак 4: Скрининг библиотеке антитела (3 круга)
(1) Стандардни скрининг у 3 круга (скрининг у чврстој фази): скрининг под притиском ради уклањања неспецифичних антитела у највећој могућој мери.
(2) Амплификација једног клона одабраним бактериофагом + експресија индукована IPTG-ом + ELISA детекција позитивних клонова.
(3) Сви позитивни клонови су одабрани за секвенцирање гена.
4-5 недеља

Предност технологије фагног приказа

Алфа Лајфтек има богато искуство у области развоја антитела. Током година, Алфа Лајфтек је успоставио свеобухватну платформу за развој антитела.

adv01

Услуге подршке

Можемо да пружимо различите услуге изградње имунолошких библиотека на бази животиња и услуге скрининга библиотека природних антитела према потребама купаца.

adv02

Вишеструки циљ

Доступне су услуге откривања вишеструких циљних антитела: протеини, пептиди, мали молекули, вируси, мембрански протеини, мРНК итд.

adv03

Вишеструки вектори

Персонализована услуга изградње библиотеке, можемо да обезбедимо различите векторе бактериофага, укључујући PMECS, pComb3X и pCANTAB 5E, и да их модификујемо према потребама купаца.

adv04-1

Платформа за зреле

Капацитет складиштења може достићи 10^8-10^9, стопе уметања су све изнад 90%, а афинитет антитела добијених скринингом је генерално на нивоу nM pM.

Повезана УСЛУГА

Вишеструке стратегије развоја антитела

развој моноклонских антитела - Алфа Лајфтех

Служба за развој моноклонских антитела

Можемо да пружимо услуге развоја висококвалитетних, високочистих и високо специфичних моноклонских антитела, укључујући производњу мишјих моноклонских антитела и зечјих моноклонских антитела.

хибридомске ћелије - Алфа Лајфтех

Хибридомска технолошка платформа

Укључујући програм имунизације, услуге припреме антитела, пречишћавање антитела, секвенцирање антитела високог протока, валидацију антитела итд.

скрининг Б ћелија - Алфа Лајфтех

Платформа за сортирање појединачних Б ћелија

Алфа Лајфтек има предности у времену скрининга и добијању висококвалитетних антитела. Може да обезбеди дизајн, синтезу и модификацију антигена, имунитет животиња, скрининг обогаћивања појединачних Б ћелија, секвенцирање појединачних ћелија.

фагни дисплеј - Алфа Лајфтех

Платформа за развој антитела са фагним приказом

Алфа Лајфтек може да пружи техничке услуге развоја антитела за фагни дисплеј, од припреме антитела, пречишћавања антитела, секвенцирања антитела итд.

Ако имате било каквих питања, слободно нас контактирајте у било ком тренутку.

Leave Your Message

Истакнута услуга

0102