Платформа за развој антитела са фагним приказом
Технологија фагног приказа

Ток рада за производњу антитела на фагном дисплеју
| Кораци | Садржај услуге | Временска линија |
|---|---|---|
| Корак 1: Имунизација животиња | (1) Имунизација животиња 4 пута, додатна имунизација 1 доза, укупно 5 доза имунизовано. (2) Прикупљен је негативан серум пре имунизације, а ELISA је урађена на четвртој дози ради детекције титра серума. (3) Ако титар серумских антитела четврте дозе испуњава захтеве, једна додатна доза имунизације ће бити примењена 7 дана пре узимања крви. Ако не испуњава захтеве, рутинска имунизација ће бити настављена. (4) Квалификована јачина, сакупљање крви и одвајање моноцита | 10 недеља |
| Корак 2: Припрема цДНК | (1) Екстракција укупне РНК ПБМЦ (комплет за екстракцију РНК) (2) Припрема цДНК методом високе прецизности помоћу RT-PCR методе (комплет за реверзну транскрипцију) | 1 дан |
| Корак 3: Изградња библиотеке антитела | (1) Користећи цДНК као шаблон, гени су амплификовани помоћу два круга PCR-а. (2) Конструкција и трансформација фага: сплајсовање гена фагемидног вектора, трансформација електропорацијом TG1 бактерије домаћина, конструисање библиотеке антитела. (3) Идентификација: Насумично одабрати 24 клона, стопа позитивних PCR идентификација + стопа инсерције. (4) Припрема фага уз помоћ: амплификација + пречишћавање фага М13. (5) Спасавање библиотеке фагног дисплеја | 3-4 недеље |
| Корак 4: Скрининг библиотеке антитела (3 круга) | (1) Стандардни скрининг у 3 круга (скрининг у чврстој фази): скрининг под притиском ради уклањања неспецифичних антитела у највећој могућој мери. (2) Амплификација једног клона одабраним бактериофагом + експресија индукована IPTG-ом + ELISA детекција позитивних клонова. (3) Сви позитивни клонови су одабрани за секвенцирање гена. | 4-5 недеља |
Услуге подршке
Можемо да пружимо различите услуге изградње имунолошких библиотека на бази животиња и услуге скрининга библиотека природних антитела према потребама купаца.
Вишеструки циљ
Доступне су услуге откривања вишеструких циљних антитела: протеини, пептиди, мали молекули, вируси, мембрански протеини, мРНК итд.
Вишеструки вектори
Персонализована услуга изградње библиотеке, можемо да обезбедимо различите векторе бактериофага, укључујући PMECS, pComb3X и pCANTAB 5E, и да их модификујемо према потребама купаца.
Платформа за зреле
Капацитет складиштења може достићи 10^8-10^9, стопе уметања су све изнад 90%, а афинитет антитела добијених скринингом је генерално на нивоу nM pM.
Служба за развој моноклонских антитела
Можемо да пружимо услуге развоја висококвалитетних, високочистих и високо специфичних моноклонских антитела, укључујући производњу мишјих моноклонских антитела и зечјих моноклонских антитела.
Хибридомска технолошка платформа
Укључујући програм имунизације, услуге припреме антитела, пречишћавање антитела, секвенцирање антитела високог протока, валидацију антитела итд.
Платформа за сортирање појединачних Б ћелија
Алфа Лајфтек има предности у времену скрининга и добијању висококвалитетних антитела. Може да обезбеди дизајн, синтезу и модификацију антигена, имунитет животиња, скрининг обогаћивања појединачних Б ћелија, секвенцирање појединачних ћелија.
Платформа за развој антитела са фагним приказом
Алфа Лајфтек може да пружи техничке услуге развоја антитела за фагни дисплеј, од припреме антитела, пречишћавања антитела, секвенцирања антитела итд.






16.07.2018. 

