Платформа за изградњу библиотеке пептида за приказ фага

Алфа Лајфтек има низ технологија за изградњу пептидних библиотека. Углавном пружамо услуге изградње Т7 пептидних библиотека и М13 пептидних библиотека према типовима фага; пружамо услуге изградње линеарне петље 7 пептидних библиотека и 12 пептидних библиотека према величини секвенце пептидних молекула, итд. Такође пружамо услуге изградње прилагођених пептидних библиотека. Такође пружамо услуге синтезе и изградње прилагођених пептидних библиотека.

Технологија фагног приказа као техника за преношење функционалних егзогених пептида у фагу на површину капсида, одржавајући структурну и функционалну активност егзогеног протеина или пептида, не утиче на способност рекомбинантног фага да инфицира ћелију домаћина. Свака вирусна честица фага може приказати само један егзогени насумични пептид на својој површини, а колекција свих фага који приказују различите пептиде чини библиотеку пептида фагног приказа. Библиотеке пептида фагног приказа су моћни алати за експресију вишеструких прилагођених синтетизованих пептида и скрининг специфичних пептида и широко се користе у областима анализе антигених епитопа, скрининга лекова и развоја вакцина.

Увод у изградњу библиотеке пептида

Конструкција пептидних библиотека служи за амплификацију пептидних библиотека лигацијом пептидних ДНК секвенци у различитим форматима са одговарајућим протеинским секвенцама фагног омотача и коришћењем поновног склапања фага да би се циљни пептид пренео на површину фага. Конструкција пептидних библиотека заснована на технологији приказивања фага спада у категорију биосинтезе синтезе пептида, а на тржишту постоје методе синтезе пептида у течној фази и синтезе пептида у чврстој фази. Тренутно, Алфа Лајфтек има разне технологије за изградњу пептидних библиотека, које могу да обезбеде унапред направљене пептидне библиотеке и рандомизоване пептидне библиотеке у складу са величином секвенце молекула пептида, укључујући изградњу библиотеке са 7 пептида, изградњу библиотеке са 12 пептида, изградњу библиотеке са 15 пептида, изградњу цикличне библиотеке са 7 пептида и изградњу цикличне библиотеке са 12 пептида, а такође се могу прилагодити за синтезу пептидних библиотека за различите типове и примене.

Примена изградње и скрининга пептидне библиотеке

Рандомизоване пептидне библиотеке помоћу технологије фагног приказа омогућавају функционални приступ пептидима и пружају физичку везу између фенотипа (приказаног пептида) и генотипа (кодиране ДНК); ове библиотеке су погодне за процесе скрининга који одвајају везане клонове од невезаних клонова афинитетним пречишћавањем. Фагом приказане пептидне библиотеке могу се користити за (i) карактеризацију имуних ћелијских епитопа (ii) скрининг биоактивних пептида везаних за рецепторе или протеине, пептида везаних за непротеинске циљеве, ћелијски или органски специфичних пептида итд. и (iii) развој система за испоруку лекова посредованих пептидима.

Процес библиотеке пептида за приказ фага

Сл. 1 Платформа за конструисање библиотеке пептида за приказ фага

Радни ток изградње библиотеке пептида за приказ фага

Процес	Садржај услуге	Временска линија
1. Синтеза нуклеотидних секвенци	Случајна синтеза нуклеотидних секвенци дужине одређене купцем	2-3 недеље
2. Полимеризација и варење	Полимеризација и варење синтетизоване ДНК секвенце	1 дан
3. Изградња електроконверзионих библиотека	Конструисане су бактерије домаћини ER2738, а затим је E. coli трансформисана добро конструисаним рекомбинантним плазмидом	1 недеља
4. Детекција величине и разноликости пептидне библиотеке	Детекција величине пептидне библиотеке бројањем колонија и разноликости пептидне библиотеке секвенцирањем	2-3 дана
5. Изградња библиотеке пептида за приказ фага	Инфекцијом библиотеке пептида за паковање фага	1 недеља