Платформа за библиотеку пептида за приказ фага

На основу технологије фагног приказа, Алфа Лајфтек може да пружи купцима висококвалитетне услуге изградње и скрининга библиотеке пептида фагног приказа.

КОНТАКТИРАЈТЕ НАС

Платформа за библиотеку пептида за приказ фага

На основу технологије фагног приказа, Алфа Лајфтек може да пружи купцима висококвалитетне услуге изградње и скрининга библиотека пептида за фагни приказ, укључујући линеарне библиотеке 7 пептида, линеарне библиотеке 9 пептида, линеарне библиотеке 10 пептида, линеарне библиотеке 15 пептида, линеарне библиотеке 12 пептида, цикличне библиотеке 7 пептида и друге библиотеке пептида, разноликост библиотека, стопа уметања, позитивна стопа могу достићи више од 90%, како би се задовољиле различите потребе различитих купаца за библиотекама пептида за фагни приказ.

Библиотеке фагног приказа се широко користе у биомедицинским истраживањима и применама. На пример, у инжењерингу антитела и развоју антитела, библиотеке фагног приказа могу се користити за скрининг и побољшање варијанти антитела; у скринингу лекова и откривању циљева лекова, библиотеке фагног приказа могу се користити за тражење протеина или пептида са потенцијалом лекова. У истраживању вакцина, библиотека фагног приказа може се користити за селекцију антигена вакцине и развој вакцине. Поред тога, библиотеке фагног приказа могу се користити и у многим областима као што су истраживање интеракције протеина, дијагноза и лечење рака.

Технологија фагног приказа

Технологија фагног приказа је технологија која спаја ген циљног протеина са геном протеина површине фага, и чини циљни протеин присутним на површини фага у облику фузионог протеина путем експресије гена. Ови протеини приказани на површини фага могу одржавати релативну просторну структуру и биолошку активност и могу се скринирати, детектовати и препознати интеракцијом са специфичним антителима или другим молекулима. Објекти приказа технологије фагног приказа укључују антитело, фрагмент антитела, пептидни сегмент, цДНК итд.

Систем технологије фагног дисплеја углавном обухвата М13 систем фагног дисплеја (као што су ПⅢ систем дисплеја, ПⅧ систем дисплеја, итд.), λ систем фагног дисплеја, Т4 систем фагног дисплеја, Т7 систем фагног дисплеја, итд. Сваки од ових система има своје карактеристике и погодан је за различите истраживачке потребе. М13 фаг, због својих лизогених својстава, не лизира ћелију домаћина након инфекције, што му омогућава континуирану репликацију и експресију страних фрагмената унутар ћелије домаћина, погодну за дугорочни скрининг и стабилну експресију. Због свог кратког животног циклуса и високе ефикасности репликације, Т7 фаг може брзо да произведе велики број потомствених фага, што је погодно за високопропусни скрининг и брзу експресију.

	М13 фаг	Т7 фаг
1. Морфолошка структура	Филаментни фаг	Полиедарски фаг
2. Генетски материјал	Кружни једноланчани молекул ДНК	Линеарна, дволанчана, терминално сувишна ДНК
3. Репликација и инфекција	Лизогени фаги, састављени у периплазми, могу се излучити из бактеријских мембрана без лизирања ћелија домаћина.	Вирулентни фаги, потомци фага састављених у бактеријској цитоплазми, ослобађају се лизом ћелијске мембране.
4. Систем приказа	Систем за приказивање је конструисан коришћењем капсидних протеина pIII и PVIII, погодних за приказивање страних пептида/протеина различитих величина.	Систем за приказивање је конструисан са 10Б капсидним протеином, који не захтева процес секреције и погодан је за приказивање пептида/протеина који имају инхибиторни ефекат на процес секреције.
5. Предност апликације	Погодан је за приказивање и дугорочни скрининг пептида малих молекула.	Има предности у брзој експресији и високом пропусном скринингу макромолекуларних протеина.

Типови библиотеке пептида за приказ фага

Алфа Лајфтек има искуства у конструисању и скринингу пептидних библиотека за фагни дисплеј и има разноврсне типове пептидних библиотека за избор. Према дужини пептида, може се поделити на 7 пептидних библиотека, 9 пептидних библиотека, 10 пептидних библиотека, 12 пептидних библиотека и 15 пептидних библиотека. Према просторној конформацији полипептида, може се поделити на линеарну библиотеку фагних пептида и цикличну библиотеку фагних пептида.

Библиотека линеарних фагних пептида

Ген пептида је уметнут у регион генома фага који кодира протеине омотача, обично pIII или PVIII, и приказује се као линеарни прави ланац. Линеарни пептиди линеарног ланца могу се лако разградити in vivo, а њихова способност везивања и стабилност могу бити погођени.

библиотека цикличних фагних пептида

Модификовани прстенасти пептид ће формирати фиксну конформацију под дејством дисулфидних веза или других везивних веза, што ће не само значајно побољшати метаболичку стабилност и биодоступност, већ ће и боље испунити захтеве везивања конформације рецептор-лиганд (антитело-антиген).

Процес библиотеке пептида за приказ фага

Избор фага

Фаги типа М13 или фаги типа Т7 се обично бирају као носачи.

Конструкција библиотеке пептида за приказ фага

Конструисати фагни вектор способан да садржи кодирајућу секвенцу страног протеина или полипептида, која обично укључује промотор, селективне маркере и одговарајуће регулаторне елементе. Уметање кодирајуће секвенце страног протеина или пептида у фагни носач, обично методама сечења и лигирања рестрикционим ензимима. Конструисани фагни вектор се трансформише у ћелију домаћина, омогућавајући фагу да реплицира и експресује стране протеине или пептиде унутар ћелије. Фагне библиотеке које садрже више различитих страних протеина или пептида припремају се кроз опсежну трансформацију и амплификацију.

Скрининг библиотеке пептида фагног дисплеја

Фиксирајте циљне молекуле (као што су протеини, рецептори или антитела) на чврстофазном носачу. Инкубирајте конструисану библиотеку пептида за фагни дисплеј са фиксираном метом како бисте омогућили пептидима на фагу да се вежу за циљни молекул. Током овог процеса, невезани бактериофаги се уклањају испирањем, док се задржавају бактериофаги који се везују за мету, а бактериофаги везани за висок афинитет се елуирају. Опорављени бактериофаги се амплификују инфекцијом Escherichia coli, а затим се подвргавају следећем кругу скрининга. Обично је потребно 3-5 кругова скрининга да би се добили пептиди са високом ефикасношћу везивања.

Дизајн и синтеза пептида

Синтетизујте пептиде на основу места скрининга.

Сл.1 Конструисање и процес скрининга библиотеке пептида за приказ фага

Повезана платформа

Алфа Лајфтек може да пружи купцима висококвалитетне услуге изградње и скрининга библиотеке пептида фагног дисплеја

библиотека антитела за фагни дисплеј - Alpha Lifetech

Платформа за изградњу библиотеке пептида за приказ фага

Алфа Лајфтек има низ технологија за изградњу пептидних библиотека. Углавном пружамо услуге изградње Т7 пептидних библиотека и М13 пептидних библиотека према типовима фага.

ПРОЧИТАЈ ВИШЕ

скрининг фагног дисплеја - Алфа Лајфтехскрининг фагног дисплеја - Алфа Лајфтех

Платформа за скрининг библиотеке пептида фагног дисплеја

Алфа Лајфтек има богато искуство у скринингу библиотека пептидних фага, пружајући снажну техничку подршку за откривање лекова малих молекула, клиничку дијагнозу, лечење болести и биолошка истраживања.

ПРОЧИТАЈ ВИШЕ