Систем за приказ фага
Алфа Лајфтек је годинама дубоко ангажован у технологији фагног приказа. Алфа Лајфтек је изградио савршену, стабилну платформу за технологију фагног приказа која штеди време за научна истраживања или истраживање пројеката и олакшава накнадну производњу. Нудимо више система за фагни приказ које купци могу да изаберу, укључујући системе за М13 фаг, Т7 фаг, Т4 фаг и λ фагни приказ. У зависности од ваших експерименталних потреба, можете одабрати одговарајући систем за фагни приказ. Алфа Лајфтек такође може да пружи купцима услуге као што су производња vhh антитела, производња scfv антитела и производња Fab антитела.
Увод у фагни дисплеј
Технологија фагног приказа је техника која користи фаге (вирус који инфицира бактерије) за тражење функционалних везујућих молекула специфичних протеина или пептида. Технике изградње библиотеке фагних антитела укључују изградњу библиотеке антитела Fab, изградњу библиотеке антитела scFv, изградњу библиотеке антитела vhh итд. Према типовима бактериофага, могу се поделити на бактериофаг m13, бактериофаг T7, бактериофаг T4, λ бактериофаг и друге бактериофаге. Према типу библиотеке, може се поделити на библиотеку насумичних пептида, библиотеку цДНК, библиотеку антитела и библиотеку протеина. Технологија фагног приказа је једноставна за руковање и јефтина за употребу, а садржи Fab фагни приказ, scfv фагни приказ, vhh фагни приказ. Међутим, ова техника ограничава разноликост молекуларне генетике у библиотеци која не може да експресује предуге секвенце.
Технологија фагног приказа је способна да формира физичку везу између приказаног молекула и ДНК секвенце која кодира приказани молекул, а аминокиселинска секвенца специфичног коњугата може се тренутно одредити секвенцирањем ДНК жељеног фрагмента у фагном геному.
Тренутно се технологија фагног приказа широко користи. Међу њима су значајна достигнућа у истраживању и развоју нових вакцина (јефтине и ефикасне синтетичке вакцине), развоју лекова на бази антитела (скрининг инхибитора ензима), трансдукцији ћелијског сигнала (скрининг симулираних епитопа) и истраживању антигенских епитопа (припрема моноклонских антитела).
Принцип фагног дисплеја
Фагни дисплеј је молекуларна технологија заснована на генетској модификацији фагне ДНК, која везује циљни фрагмент за протеин фагног омотача и тако га експресује на површини фага. Страна ДНК секвенца се уноси на специфичну локацију у нуклеотидној секвенци фагног генома која кодира протеин фагног омотача (Сл. 1).
Када дође до фагне инфекције, ген фага почиње да се експресује унутар бактеријског домаћина, а уметнути циљни фрагмент се приказује на површини фага као комбинација сродног гена који кодира протеин омотача и клониране секвенце.

Сл.1 Архитектура вириона бактериофага М13 и принцип технологије фагног дисплеја.(Извор референце: Фагни дисплеј и друге технологије пептидног дисплеја | FEMS Microbiology Reviews | Oxford Academic (oup.com))
Системи за приказивање фага
Филаментни фаги су најчешће коришћени систем за приказивање фага, а системи за приказивање фага могу се конструисати коришћењем других фага. Такви системи могу ефикасније приказивати релативно велике пептиде или скринирати библиотеке цДНК него системи засновани на филаментозним фагима.

Сл. 2 Врсте бактериофага који се користе у фагном приказу.(Извор референце: Фагни дисплеј и друге технологије пептидног дисплеја | FEMS Microbiology Reviews | Oxford Academic (oup.com))
Предност система за приказ фага
Системи за приказивање фага обично користе филаментозне фаге, укључујући M13, fd и f1. У поређењу са M13 фагима, T7 бактериофаги су састављени од дволанчане ДНК, која показује већу стабилност и мање је склона мутацијама током репликације. T7 фаг, као носач, брзо расте и може да формира плакове у року од 3 сата, што штеди много времена за клонирање и скрининг.
Конструкција Т7 фагних библиотека коришћена је за експресију површинских и неповршинских гена и за конструисање библиотека за приказивање пептида, цДНК, геномске ДНК и антитела. Ово омогућава да се Т7 фаг користи не само као антимикробно средство, већ и за скрининг циљева лекова у скринингу циљева органа (као што су мозак, јетра и плућа), скрининг циљева препознавања антитела, истраживање физиолошких механизама итд. Такође се може користити за дијагнозу и лечење разних болести.
Други облици бактериофага
Селективно инфективни фаг
За разлику од традиционалног фагног дисплеја, селективни инфективни фаг (SIP) повезује интеракције протеина и лиганда продукције директно са инфекцијом и експанзијом фага без потребе за корацима елуције.

Сл. 3 Селективно инфективни фаг (SIP).(Извор референце: Фагни дисплеј и друге технологије пептидног дисплеја | FEMS Microbiology Reviews | Oxford Academic (oup.com))
Пејзажни фаги
Пејзажне фаге узрокују хиљаде копија страних пептида распоређених око цевастих капсида у супер-уским понављајућим обрасцима, а поливалентни приказ на пејзажним фагима подстиче селекцију високог афинитета, тако да је немогуће разликовати висок и низак афинитет пептидних лиганда.

Сл. 4 Идеја пејзажних фага. (Извор референце: Фагни дисплеј и друге технологије пептидног дисплеја | FEMS Microbiology Reviews | Oxford Academic (oup.com))


Вишеструки системи за приказ фага
Систем приказа фага М13, фага Т7, фага Т4, фага λ, који купци могу да изаберу.


Могућност скрининга високог протока
Можемо користити системе за приказивање фага да бисмо брзо конструисали велике фагне библиотеке и постигли високопропусне експерименте скрининга.


Прилагођена услуга приказивања фага
Купци могу прилагодити свеобухватне услуге према захтевима пројекта, као што је скрининг антитела високог афинитета итд.


Широк опсег примене
Примењује се у областима као што су инжењеринг антитела, инжењеринг пептида и протеина, откривање и развој лекова, истраживање интеракције протеина итд.
Ако имате било каквих питања, слободно нас контактирајте у било ком тренутку.
Leave Your Message
0102







16.07.2018. 

