Служба за откривање scFv антитела

Алфа Лајфтек Инк.са поносом нуди свеобухватне услуге изградње библиотека SCFV како би задовољио различите потребе научника широм света. Наш циљ је да разумемо и задовољимо захтеве различитих клијената и да помогнемо у вези са свим предстојећим и новонасталим проблемима у истраживачком раду.

Шта је scFv - антитело са варијабилним фрагментом једног ланца?

Једноланчано антитело се састоји од варијабилног лаког (VL) и тешког (VH) фрагмента антитела спојених флексибилним пептидним линкером, који се може лако експресовати у функционалном облику на површини фага и стога је опште познат као једноланчани варијабилни фрагмент (scFv). scFv фрагмент је најмања јединица молекула имуноглобулина (осим нанотела) са функцијом у активностима везивања антигена и омогућава протеинском инжењерингу да побољша својства scFv (варијабилног фрагмента једног ланца) као што су повећање афинитета и промена специфичности. У компанији Alpha Lifetech Inc., scFv антитела су конструисана углавном од хибридома, ћелија слезине имунизованих мишева и Б лимфоцита људи. Укупна РНК или иРНК се прво изолује из хибридома, слезине, лимфних ћелија и ћелија коштане сржи, а затим се реверзно транскрибује у цДНК да би служила као шаблон за амплификацију гена антитела (PCR).

Технологија фагног приказа за развој антитела scFv

Разноликост библиотеке одређена је бројем независних клонова. Да би се произвела велика библиотека scFv антитела, наши научници ће користити нашу сопствену двостепену стратегију за генерисање библиотека. У првом кораку описаног поступка, примарни репертоари се припремају из PCR производа који кодирају VH, Vκ и Vλ домене, што даје типичне библиотеке средње величине (1 - 100 милиона клонова). У другом кораку, VH (или VL) фрагменти се изолују дигестијом плазмидне ДНК пречишћене из примарних репертоара и клонирају у акцепторски фагемид вектор који садржи VL (или VH) репертоаре. Ова иновација драматично повећава величину библиотека (1010-1012 клонова).

Скрининг великих размера и високог протока scFv антитела

За припрему scFv у великим размерама, очигледно је да ће избор домаћина експресије имати значајан утицај на дизајн процеса, стратегије даље обраде и трошкове процеса. Избор начина производње зависиће од релевантности посттранслационе модификације и временског оквира за клинички развој и економију, који су такође у суштини зависни од „система домаћина“. Не постоји универзални систем експресије који обезбеђује високе нивое експресије производа за широк спектар различитих антитела или чак протеина.