Услуга изградње шталних ћелијских линија

Алфа Лајфтек има платформу ћелија заражених лентивирусом, која може прилагодити експериментални процес за различите типове ћелијски стабилних трансмутационих сојева.

КОНТАКТИРАЈТЕ НАС

Услуга изградње шталних ћелијских линија

Алфа Лајфтек је дуги низ година дубоко ангажован у области развоја процеса изградње стабилних ћелијских линија. Изградио је савршену платформу за процес изградње стабилних ћелијских линија, са више од 300 врста туморских ћелија и примарних ћелија, које могу да испоруче стабилне ћелијске линије, уз уштеду времена за научна истраживања или пројектна истраживања и олакшавање накнадне производње. Алфа Лајфтек такође може да пружи купцима услуге као што су развој процеса изградње сојева, скрининг сојева, изградња сојева, производња рекомбинантних протеина и антитела, пружајући истраживачку основу за нове лекове.

Алфа Лајфтек има платформу ћелија инфицираних лентивирусом, која може да прилагоди експериментални процес за различите типове ћелијски стабилних трансмутационих сојева. Користили смо технологију нокаута гена за конструисање CRISPR/Cas9 нокаут ћелијских линија. Технике прекомерне експресије гена и утишавања гена коришћене су за стабилизацију трансмутационих сојева. Интеграција гена специфична за место употпуњује услуге конструисања ћелијске линије интеграције врхова.

Увод у изградњу стабилних ћелијских линија

Стабилна ћелијска линија односи се на ћелијску линију која интегрише стране гене у геном ћелије домаћина тако да страни гени могу бити стабилно експресовани у ћелији домаћина током дужег времена. Принцип је да се страни ген редукује на вектор са одређеном отпорношћу, трансфектују ћелије домаћина, интегрише страни ген у хромозом домаћина и скрининг гена отпорности садржаних у вектору како би се добиле стабилне ћелијске линије са високом експресијом циљног протеина или стабилним утишавањем циљног гена које испуњавају захтеве експеримента.

Алфа Лајфтек има независну радионицу за складиштење, савршен систем за замрзавање и управљање складиштењем ћелија и више од 300 врста туморских ћелија и примарних ћелија које можете изабрати, посвећене вашем научном истраживању.

Процес изградње стабилне ћелијске линије

Метода изградње стабилне ћелијске линије

Методе конструисања стабилних ћелијских линија укључују лентивирусом посредован, транспозоном посредован, CRISPR/Cas9 посредован и плазмид скрининг.

Лентивирус-посредована је једна од најчешће коришћених метода за конструисање стабилних ћелијских линија. Овај приступ има предност у инфицирању скоро свих типова ћелија и интеграцији генетског материјала у геном ћелије домаћина ради стабилне експресије током дужег периода. Међутим, овај систем има одређена ограничења, а лентивирус има ограничен капацитет паковања, тако да није погодан за транскрипцију гена са дугим транскрипционим регионима.

У поређењу са лентивирусом посредованим, транспозони посредовани немају ограничења у величини гена, а уз континуирану оптимизацију технологије, ефикасност уметања транспозона је неколико пута побољшана. Мана је што постоје одређена ограничења у вези са примарним ћелијама и ћелије које је тешко трансфектовати.

CRISPR/Cas9-посредована технологија садржи нокаут гена crispr и нокаут гена crispr. Нокаут гена crispr се односи на увођење двоструког ланца ДНК, што резултира губитком функције циљног гена. Нокаут гена crispr се односи на убацивање страних фрагмената ДНК у специфичне гене, што се може користити за поправку неисправних гена или увођење нових функционалних гена.

Скрининг плазмида је најпримитивнија шема изградње ћелијских линија, која само треба успешно да трансфектује циљни плазмид у ћелију и користи одговарајућу отпорност у дугорочном скринингу. Затим постоји одређена вероватноћа добијања стабилних ћелијских линија.

Методе конструисања различитих стабилних ћелијских линија

Метод посредовања	Лентивирусни систем	Транспозонски систем	CRISP/Cas9-посредован	Скрининг плазмида
Капацитет носача	5 кб	10 кб	5 кб	10 кб
Посредована ефикасност	Високо	Нормално	Нормално	Ниско
Временска линија	1-2 недеље	3-4 недеље	3-4 недеље	4-6 недеља
Предност	Брзо и ефикасно	Безбедност и стабилност	Интеграција фиксне тачке	Нижи трошкови
Недостатак	Ризик биолошке безбедности	Обиље израза нормално	CAS9 трансдукција је тешка и скупа	Ниска ефикасност и нестабилност

Техничке потешкоће у изградњи стабилних ћелијских линија

Пре него што се процес прошири, мали биореактор се користи за одређивање параметара као што су гас, систем течности за култивацију, минимални хидродинамички стрес који се примењује на ћелије итд., како би се осигурала култура на више размера. Међутим, чак и ако се одговарајући параметри процеса одреде, окружење великих биореактора у произвођачу ће бити неуједначено и лако је доћи до неуспеха. Алфа Лајфтек има дугогодишње искуство у процесу културе на више размера, што може донекле избећи грешке, смањити ризике и значајно побољшати стопу успеха. Истовремено, Алфа Лајфтек обезбеђује конзистентност сировина и серија медија које се користе, смањујући стопу неуспеха процеса културе ћелија на више размера.

Алфа Лајфтек има свеобухватну платформу за развој стабилних ћелијских линија како би се осигурала стабилност ћелијских линија током производње. Такође вам можемо пружити прилагођене услуге како бисмо задовољили ваше потребе.

Садржај услуге изградње стабилних ћелијских линија

Садржај	Временска линија
Култура ћелијске линије HEK293 коју је обезбедио купац.	3-5 месеци
Конструкција плазмида sgRNA-Cas9 (са скрининг геном G418).
sgRNA-Cas9 и шаблон за поправку ДНК су ко-пренесени у ћелијску линију HEK293.
Скрининг моноклонских ћелијских линија (GFP ген) knockin позитивни клон).
Испорука: Вектор, сој GFP гена са нокаутом, резултати секвенцирања, сви сирови подаци, лабораторијски извештај

Ћелије се могу пратити

Ћелије се купују од професионалних организација као што је ATCC и могу пружити доказ да испуњавају ваше захтеве за регистрацију.

Предност у производњи

Алфа Лајфтек има дугогодишње искуство у задовољавању различитих потреба развоја; Имамо разноврсне ћелије, независну радионицу за складиштење, савршено замрзавање ћелија и систем за управљање складиштењем.

Контрола квалитета пројекта

Сваки пројекат пролази кроз строге процесе контроле квалитета како би се осигурала испорука ћелијских линија које задовољавају високе стандарде купцима.

Техничка предност

Поред инжењера са богатим искуством у ћелијској индустрији, имамо напредне технолошке еволутивне алгоритме за побољшање услова у реактору и модификацију параметара процеса.

Ако имате било каквих питања, слободно нас контактирајте у било ком тренутку.

Leave Your Message

Истакнута услуга

0102