Услуге изградње стабилних ћелијских линија

Алпха Лифетецх има ћелијску платформу заражену лентивирусом, која може прилагодити експериментални процес за различите типове сојева стабилне ћелијске трансмутације.

КОНТАКТИРАЈТЕ НАС

Услуге изградње стабилних ћелијских линија

Алпха Лифетецх је већ дуги низ година дубоко ангажован у области развоја процеса изградње стабилне ћелијске линије. Изградио је савршену платформу за процес изградње стабилне ћелијске линије, са више од 300 врста туморских ћелија и примарних ћелија, које могу да испоруче стабилне ћелијске линије уз уштеду времена за научна истраживања или пројектно истраживање и олакшавају накнадну производњу. Алпха Лифетецх такође може да пружи клијентима услуге као што су развој процеса соја, скрининг сојева, конструкција соја, рекомбинантни протеин и производња антитела, пружајући основу за истраживање нових лекова.

Алпха Лифетецх има ћелијску платформу заражену лентивирусом, која може прилагодити експериментални процес за различите типове сојева стабилне ћелијске трансмутације. Користили смо технологију нокаутирања гена да конструишемо ЦРИСПР/Цас9 нокаут ћелијске линије. Прекомерна експресија гена и технике утишавања гена су коришћене за стабилизацију сојева трансмутације. Интеграција специфична за генске локације завршава услуге изградње ћелијске линије интеграције вертекса.

Увод у конструкцију стабилне ћелијске линије

Стабилна ћелијска линија се односи на ћелијску линију која интегрише стране гене у геном ћелије домаћина тако да страни гени могу бити стабилно експримирани у ћелији домаћину дуго времена. Принцип је редуковање страног гена на вектор са одређеном резистенцијом, трансфекција ћелија домаћина, интегрисање страног гена у хромозом домаћина и скрининг гена резистенције садржаних у вектору да би се добиле стабилне ћелијске линије са високом експресијом циљног протеина или стабилно утишавање циљног гена које испуњавају захтеве експеримента.

Алпха Лифетецх има независну радионицу за складиштење, савршен систем за замрзавање и складиштење ћелија, као и више од 300 врста туморских ћелија и примарних ћелија које можете изабрати, посвећене вашим научним истраживањима.

Процес изградње стабилне ћелијске линије

Метода изградње стабилне ћелијске линије

Методе изградње стабилне ћелијске линије укључују посредовање лентивируса, посредовање транспозоном, посредовање ЦРИСПР/Цас9 и скрининг плазмида.

лентивирус посредован је један од најчешће коришћених метода за конструисање стабилних ћелијских линија. Овај приступ има предност што инфицира скоро све типове ћелија и интегрише генетски материјал у геном ћелије домаћина за стабилну експресију током дужег периода. Међутим, овај систем има одређена ограничења, а лентивирус има ограничен капацитет паковања, тако да није погодан за транскрипцију гена са дугим регионима транскрипције.

У поређењу са лентивирусом посредованим, транспозон-посредованим нема ограничења на величину гена, а уз континуирану оптимизацију технологије, ефикасност уметања транспозона је побољшана неколико пута. Недостатак је што се одређена ограничења на примарне ћелије и ћелије тешко трансфектују.

ЦРИСПР/Цас9 посредовано садржи нокаут цриспр гена и нокаут цриспр гена. Нокаут Цриспр гена се односи на увођење дволанчаног раздвајања ДНК, што доводи до губитка функције циљног гена. Цриспр ген кноцкин се односи на стране фрагменте ДНК у специфичне гене, који се могу користити за поправку дефектних гена или увођење нових функционалних гена.

Скрининг плазмида је најпримитивнија шема изградње ћелијске линије, која само треба да успешно трансфекује циљни плазмид у ћелију и користи одговарајућу отпорност у дуготрајном скринингу. Затим одређена вероватноћа добијања стабилних ћелијских линија.

Методе конструисања различитих стабилних ћелијских линија

Метода посредовања	Лентивирус систем	Транспосон Систем	ЦРИСП/Цас9 посредован	Скрининг плазмида
Царриер Цапацити	5 кб	10 кб	5 кб	10 кб
Посредована ефикасност	Високо	Нормално	Нормално	Ниско
Временска линија	1-2 недеље	3-4 недеље	3-4 недеље	4-6 недеља
Предност	Брзо и ефикасно	Сигурност и стабилност	Интеграција фиксне тачке	Нижи трошак
Недостатак	Ризик биолошке безбедности	Израз обиље нормалан	ЦАС9 трансдукција је тешка и скупа	Ниска ефикасност и нестабилност

Техничке потешкоће у изградњи стабилних ћелијских линија

Пре повећања процеса, мали биореактор се користи за одређивање параметара као што су гас, систем течности за културу, минимални хидродинамички стрес примењен на ћелије, итд., како би се обезбедила култура унакрсних размера. Међутим, чак и ако се одреде одговарајући параметри процеса, окружење великих биореактора у произвођачу ће бити неуједначено, и лако се може покварити. Алпха Лифетецх има дугогодишње искуство у култури повећања процеса, која може у одређеној мери избећи грешке, смањити ризике и значајно побољшати стопу успеха. У исто време, Алпха Лифетецх обезбеђује конзистентност коришћених серија сировина и медија, смањујући стопу неуспеха у процесу ћелијске културе.

Алпха Лифетецх има свеобухватну платформу за развој процеса стабилних ћелијских линија како би се осигурала стабилност ћелијских линија током производње. Такође вам можемо пружити прилагођене услуге које ће задовољити ваше потребе.

Садржај услуге изградње стабилних ћелија

Садржај	Временска линија
Ћелијска линија културе ХЕК293 коју је обезбедио купац.	3-5 месеци
Конструкција сгРНА-Цас9 плазмида (са скрининг геном Г418).
СгРНА-Цас9 и ДНК шаблон за поправку су заједно пренети на ћелијску линију ХЕК293.
Скрининг моноклонске ћелијске линије (ГФП ген кноцкин позитиван клон).
Испорука: вектор, ГФП ген кноцк-ин сој, резултати секвенцирања, сви необрађени подаци, лабораторијски извештај

Ћелије се могу пратити

Ћелије се купују од професионалних организација као што је АТЦЦ и могу пружити доказ да испуњавају ваше потребе за регистрацијом.

Предност производње

Алпха Лифетецх има дугогодишње искуство у испуњавању различитих развојних потреба; Имамо разне ћелије, независну радионицу за складиштење, савршено замрзавање ћелија и систем за управљање складиштем.

Контрола квалитета пројекта

Сваки пројекат пролази кроз строге процесе контроле квалитета како би се осигурала испорука ћелијских линија које задовољавају високе стандарде купцима.

Техничка предност

Поред инжењера са великим искуством у ћелији, имамо напредне еволуционе алгоритме технологије за побољшање услова реактора и модификовање параметара процеса.

Ако имате било каквих питања, слободно нас контактирајте у било које време.

Leave Your Message

Феатуред Сервице

0102