Увод у библиотеке синтетизованих антитела

Библиотека синтетизованих антитела, такође позната као Де ново библиотека, је синтетички метод који користи технике као што су синтеза ДНК или приказ фага за дизајнирање и синтезу комплетних варијабилних региона антитела, укључујући оквирне регионе и ЦДР, без ослањања на наивне библиотеке антитела.

Библиотека полусинтетичких антитела је створена комбиновањем природних библиотека антитела са синтетичким диверзитетом. Обично укључује синтезу ДНК олигонуклеотида да би се произвео скуп различитих комплементарних одређујућих региона (ЦДР), који се затим комбинују са константним оквиром антитела добијеним из природних извора као што су људске или животињске Б ћелије. Синтетизовани ЦДР уноси разноликост у библиотеку, што доводи до тога да антитела циљају широк спектар епитопа. Библиотека полусинтетичких антитела обезбеђује компромис између природне разноликости имуног система и контролисане разноврсности постигнуте синтетичким методама.

Разлика између наивних и синтетичких библиотека антитела зависи од извора имуноглобулинских гена. У међувремену, разлика између полусинтетизоване и синтетизоване библиотеке антитела лежи у томе што се прва састоји од дела наивних сегмената антитела, као што су лаки или тешки ланци, а само један од њих се синтетише ин витро; док је синтетизовани у потпуности изведен из вештачке синтезе помоћу ПЦР ин витро.

Алпха Лифетецх може да обезбеди

Алпха Лифетецх Инц.може понудити библиотеку полусинтетизованих/синтетизованих антитела од животиња и људи на основу наше професионалне платформе за откривање антитела. Уз дугогодишње искуство у генетској модификацији и изградњи библиотека, могу се конструисати синтетизоване библиотеке које су у стању да производе синтетичка антитела са афинитетом и специфичношћу изнад капацитета природних антитела.Алпха Лифетецх'сстручњаци са поносом објављују да можемо гарантовати високу стопу успеха у изградњи библиотеке антитела која садржи 10^8 – 10^10 независних клонова.

Алпха Лифетецх Инц.је поносан што нуди свеобухватне услуге изградње библиотеке антитела како би задовољио различите потребе глобалних истраживача, укључујући сцФв, Фаб, ВХХ антитела и прилагођене библиотеке. Наш циљ је да разумемо и одговоримо на захтеве различитих купаца и да помогнемо у решавању било каквих надолазећих и новонасталих проблема у истраживачком раду.

Процес изградње библиотека синтетизованих антитела

Дизајн
Фаза пројектовања укључује одабир оквира антитела и региона који одређују комплементарност (ЦДР) на основу постојећих секвенци антитела или структурних података. Синтетичка ЦДР антитела такође могу бити дизајнирана да уведу специфичне функционалности или побољшају својства везивања.

Синтеза
Синтетичка ДНК која кодира дизајниране секвенце антитела, укључујући и оквирне регионе и ЦДР, синтетише се хемијским или ензимским методама.

Скупштина
Синтетизовани ДНК фрагменти се склапају у векторе експресије антитела коришћењем техника као што су ПЦР, лигација или Гибсонов склоп. Ови вектори се затим могу увести у експресионе системе као што су ћелије бактерија, квасца или сисара за производњу антитела.

Скрининг и селекција
Конструисане библиотеке антитела су прегледане и одабране за антитела са жељеним својствима коришћењем метода скрининга високе пропусности. Ово може укључивати технике као што су приказ фага, приказ квасца или приказ рибозома, у зависности од формата библиотеке и апликације.

Служба за изградњу библиотека синтетизованих антитела

Алпха Лифетецх Инц.пружа клијентима дизајн на једном месту и синтетизовану услугу библиотека антитела везивањем репертоара В-гена тешког и лаког ланца у вектор фага користећи Цре-лок систем рекомбинације специфичног за локацију да би се направио репертоар Фабс приказаних на фагу који садржи 6,5 × 10^10 клонова. Библиотека је дала Абс против бројних антигена, неки са наномоларним афинитетима. Генерисање библиотеке људских антитела је засновано на технологији приказа фага М13 (приказано на слици испод).