Увод у библиотеке синтетизованих антитела

Синтетизована библиотека антитела, такође позната као De novo библиотека, је синтетичка метода која користи технике као што су синтеза ДНК или фагни дисплеј за дизајнирање и синтезу комплетних варијабилних региона антитела, укључујући оквирне регионе и CDR-ове, без ослањања на наивне библиотеке антитела.

Полусинтетичка библиотека антитела се креира комбиновањем природних библиотека антитела са синтетичком разноликошћу. Обично укључује синтезу ДНК олигонуклеотида да би се произвео скуп различитих комплементарно одређујућих региона (CDR), који се затим комбинују са константним оквиром антитела изведеним из природних извора као што су људске или животињске Б ћелије. Синтетизовани CDR уноси разноликост у библиотеку, што резултира антителима која циљају широк спектар епитопа. Полусинтетичка библиотека антитела пружа компромис између природне разноликости имуног система и контролисане разноликости постигнуте синтетичким методама.

Разлика између наивних и синтетичких библиотека антитела зависи од извора имуноглобулинских гена. У међувремену, разлика између полусинтетизоване и синтетисане библиотеке антитела лежи у томе што се прва састоји од дела сегмената наивних антитела, као што су лаки или тешки ланац, и само један од њих је синтетисан in vitro; док је синтетизована потпуно изведена из вештачке синтезе помоћу PCR in vitro.

Алфа Лајфтек може да обезбеди

Алфа Лајфтек Инк.Можемо да понудимо библиотеку полусинтетизованих/синтетизованих антитела од животиња и људи засновану на нашој професионалној платформи за откривање антитела. Са вишегодишњим искуством у генетској модификацији и изградњи библиотека, могу се конструисати синтетизоване библиотеке које су у стању да производе синтетичка антитела са афинитетом и специфичношћу који превазилазе капацитет природних антитела.Алфа ЛајфтекСтручњаци са поносом објављују да можемо гарантовати високу стопу успеха у изградњи библиотеке антитела која садржи 10^8 – 10^10 независних клонова.

Алфа Лајфтек Инк.је поносан што нуди свеобухватне услуге изградње библиотека антитела како би задовољио различите потребе глобалних истраживача, укључујући scFv, Fab, VHH антитела и прилагођене библиотеке. Наш циљ је да разумемо и задовољимо захтеве различитих купаца и да помогнемо у вези са свим предстојећим и новонасталим проблемима у истраживачком раду.

Процес изградње библиотека синтетизованих антитела

Дизајн
Фаза дизајнирања укључује одабир оквира антитела и региона који одређују комплементарност (CDR) на основу постојећих секвенци антитела или структурних података. Синтетичка CDR антитела такође могу бити дизајнирана да уведу специфичне функционалности или побољшају својства везивања.

Синтеза
Синтетичка ДНК која кодира дизајниране секвенце антитела, укључујући и оквирне регионе и CDR-ове, синтетише се коришћењем хемијских или ензимских метода.

Скупштина
Синтетизовани фрагменти ДНК се склапају у векторе за експресију антитела коришћењем техника као што су PCR, лигација или Гибсоново склапање. Ови вектори се затим могу увести у системе за експресију као што су бактеријске, квасне или сисарске ћелије за производњу антитела.

Скрининг и селекција
Конструисане библиотеке антитела се скринира и селектује на антитела са жељеним својствима коришћењем метода скрининга високог протока. Ово може да укључује технике као што су фагни приказ, приказ квасца или приказ рибозома, у зависности од формата библиотеке и примене.

Услуга изградње библиотека синтетизованих антитела

Алфа Лајфтек Инк.пружа купцима услугу дизајнирања и синтетизације библиотека антитела на једном месту лигацијом репертоара V-гена тешког и лаког ланца у фагни вектор користећи Cre-lox систем рекомбинације специфичне за место како би се створио репертоар Fab-ова приказаних на фагу који обухвата 6,5 × 10^10 клонова. Библиотека је дала антитела против бројних антигена, неки са наномоларним афинитетом. Генерисање библиотеке људских антитела заснива се на M13 технологији фагног дисплеја (приказано на слици испод).