Boenjiniere ba Antibody ke Eng?

Ka thuso ea boenjiniere ba li-antibody, ho bile bonolo ho fetola boholo ba limolek'hule, pharmacokinetics, immunogenicity, ho kopana ha li-antibody, ho ikhetha le ts'ebetso ea phello ea li-antibody. Kamora ho etsa li-antibody, ho kopana ho itseng ha li-antibody ho etsa hore li be bohlokoa haholo tlhahlobong ea bongaka le kalafong. Ka boenjiniere ba li-antibody, li ka fihlela litlhoko tsa nts'etsopele ea pele ea lithethefatsi le tlhahlobo.

Morero oa boenjiniere ba li-antibody ke ho rala le ho hlahisa mesebetsi e tobileng haholo, e tsitsitseng eo li-antibody tsa tlhaho li ke keng tsa e fihlela, e leng ho rala motheo oa tlhahiso ea li-antibody tsa kalafo.

Alpha Lifetech, ka boiphihlelo ba eona bo boholo ba projeke boenjiniere ba li-antibody, e ka fana ka lits'ebeletso tsa li-antibody tsa monoclonal le polyclonal tse ikhethileng bakeng sa mefuta e mengata, hammoho le lits'ebeletso tsa kaho le tlhahlobo ea laeborari ea li-antibody tsa phage ponts'o le laeborari. Alpha Lifetech e ka fa bareki li-antibody tsa boleng bo tšoanang le lihlahisoa tsa protheine e kopantsoeng, hammoho le lits'ebeletso tse tsamaellanang, ho hlahisa li-antibody tse sebetsang hantle, tse ikhethileng haholo le tse tsitsitseng. Ka ho sebelisa li-antibody tse felletseng, li-platform tsa protheine le litsamaiso tsa ponts'o ea phage, re fana ka lits'ebeletso tse akaretsang tlhahiso ea li-antibody e holimo le e tlase, ho kenyeletsoa lits'ebeletso tsa tekheniki tse kang ho etsa hore li-antibody li be le botho, tlhoekiso ea li-antibody, tatellano ea li-antibody le netefatso ea li-antibody.

Mokhahlelo oa bo-pula-maliboho oa boenjiniere ba li-antibody o amana le mahlale a mabeli:

--Theknoloji ea DNA e kopantsoeng hape

--Theknoloji ea Hybridoma

Nts'etsopele e potlakileng ea boenjiniere ba li-antibody e amana le mahlale a mararo a bohlokoa:

--Theknoloji ea ho etsa hore liphatsa tsa lefutso li bōpehe hantle le karabelo ea ketane ea polymerase

--Ponahalo ea protheine: Liprotheine tse kopantsoeng li hlahisoa ke litsamaiso tsa tlhahiso tse kang tomoso, livaerase tse bōpehileng joaloka molamu, le limela

--Moralo oa meaho o thusoang ke khomphutha

Moloko oa pele oa li-antibodies o ile oa etsoa motho bakeng sa tlhahiso ea li-antibodies tsa chimeric, moo sebaka se feto-fetohang sa li-antibodies tsa monoclonal tsa toeba se neng se hokahantsoe le sebaka se sa fetoheng sa limolek'hule tsa IgG tsa batho. Sebaka se tlamang antigen (CDR) sa antibody ea monoclonal ea toeba ea moloko oa bobeli se ile sa kenngoa ho IgG ea batho. Ntle le sebaka sa CDR, li-antibodies tse ling kaofela ke li-antibodies tsa batho, 'me ho entsoe boiteko ba ho qoba ho susumetsa likarabo tsa antibody ea mouse ea batho (HAMA) ha ho sebelisoa li-antibodies tsa mouse clone bakeng sa kalafo ea batho.

 

Ho haha ​​laeborari ya pontsho ya phage, mohato wa pele ke ho fumana dijini tse kenyang di-antibodies, tse ka arolwang ho disele tsa B tsa diphoofolo tse entetsweng (kaho ya laeborari ya sesole sa mmele), tse ntshwang ka ho toba diphoofolong tse sa entelwang (kaho ya laeborari ya tlhaho), kapa esita le ho bokellwa ka vitro ka dikotwana tsa dijini tsa antibody (kaho ya laeborari ya maiketsetso). Ebe, dijini di atoloswa ke PCR, di kenngwa ka hara di-plasmid, mme di hlahiswa ditsamaisong tse loketseng tsa moamoheli (polelo ya tomoso (hangata Pichia pastoris), polelo ya prokaryotic (hangata E. coli), polelo ya sele ya mammalian, polelo ya sele ya dimela, le polelo ya sele ya dikokonyana e tshwaeditsweng ke divaerase tse bōpehileng jwalo ka molamu). E tlwaelehileng haholo ke sistimi ya polelo ya E. coli, e kopanyang tatellano e ikgethang ya di-antibody ho phage mme e kenya e nngwe ya diprotheine tsa phage shell (pIII kapa pVIII). Ho kopanngwa ha dijini tsa, Mme ho bontshwa hodima bacteriophages. Motheo wa theknoloji ena ke ho aha laeborari ya pontsho ya phage, e nang le monyetla ho feta dilaeborari tsa tlhaho ka hore e ka ba le tlamo e ikgethang. Ka mora moo, li-antibodies tse nang le antigen e khethehileng li hlahlojoa ka mokhoa oa khetho ea baeloji, li-antigen tse reretsoeng lia lokisoa, li-phage tse sa tlangoang li hlatsuoa khafetsa, 'me li-phage tse tlangoang lia hlatsuoa bakeng sa ntlafatso e eketsehileng. Kamora makhetlo a mararo kapa ho feta a ho pheta-pheta, li-antibodies tse nang le antigen e phahameng lia aroloa.

Setšoantšo sa 3: Kaho le Tlhahlobo ea Laeborari ea Antibody

Theknoloji ea DNA e kopantsoeng e ka sebelisoa ho hlahisa likaroloana tsa antibody. Li-antibodies tsa Fab qalong li ka hasoa feela ke gastric protease ho hlahisa likaroloana tse 2 (Fab '), tseo ebe li siloa ke papain ho hlahisa likaroloana tsa Fab ka bonngoe. Karoloana ea Fv e na le VH le VL, tse nang le botsitso bo fokolang ka lebaka la ho hloka litlamo tsa disulfide. Ka hona, VH le VL li hokahantsoe hammoho ka peptide e khutšoanyane ea li-amino acid tse 15-20 ho theha antibody e le 'ngoe ea ketane e feto-fetohang (scFv) e nang le boima ba limolek'hule ba hoo e ka bang 25KDa.

Thuto ea sebopeho sa li-antibody ho Camelidae (Kamele, LIama, le Alpaca) e hlakisitse hore li-antibodies li na le liketane tse boima feela 'me ha li na liketane tse bobebe, ka hona li bitsoa li-antibodies tsa ketane e boima (hcAb). Sebaka se feto-fetohang sa li-antibodies tsa ketane e boima se bitsoa li-antibodies tsa domain e le 'ngoe kapa li-nanobodies kapa VHH, tse nang le boholo ba 12-15 kDa. Jwalo ka li-monomer, ha li na disulfide bonds mme li tsitsitse haholo, li na le kamano e phahameng haholo bakeng sa li-antigen.

Setšoantšo sa 5: Antibody e Boima ea Ketane le VHH/ Nanobody

Ho itlhahisa ka bolokolohi ha sele ho sebedisa tlhahiso ya DNA ya tlhaho kapa ya maiketsetso ho fihlella tlhahiso ya protheine ya in vitro, hangata ho sebediswa sistimi ya tlhahiso ya E. coli. E hlahisa diprotheine kapele mme e qoba moroalo wa metabolism le wa cytotoxic diseleng ha e hlahisa diprotheine tse ngata tse kopanang hape mmeleng. E ka boela ya hlahisa diprotheine tse thata ho di kopanya, tse kang tse thata ho di fetola kamora phetolelo kapa ho kopanya diprotheine tsa lera.