Platform Imunisasi Sato

Sumber sato Alpha Lifetech jelas, kalayan idin pamariksaan sareng karantina, latar genetik anu jelas, frékuénsi imunisasi anu jelas, sareng catetan interval imunisasi anu lengkep, nyayogikeun jasa anu merenah pikeun produksi antibodi. Éta utamina ngimunisasi sato Camelidae (Alpaca Liama, sareng Camel), neundeun pondasi pikeun produksi nanobody. Salian ti éta, éta ogé tiasa ngimunisasi sato biasa (sapertos kelenci bodas Selandia Baru, beurit, sareng sato sanésna) numutkeun frékuénsi imunisasi sareng sarat imunogenisitas anu diperyogikeun ku konsumén, ngekstrak sareng ngasingkeun kana PBMC, sareng nganggo éta pikeun ékspérimén salajengna (sapertos antibodi monoklonal, pamekaran antibodi poliklonal, jsb.). Konsumén tiasa nyayogikeun imunogen nyalira, sareng kami bakal ngalaksanakeun kontrol kualitas anu ketat pikeun aranjeunna. Upami konsumén nyayogikeun imunogen virus, éta kedah diinaktivasi sareng kami bakal ngalaksanakeun uji inaktivasi pikeun mastikeun kaamanan. Dina waktos anu sami, kami ogé tiasa ngaropea imunogen anu saluyu numutkeun kabutuhan konsumén.

Bubuka kana Imunisasi Sato

Nalika ngahasilkeun antibodi anu asalna tina sasatoan sapertos antibodi monoklonal, antibodi poliklonal, sareng nanobodi, léngkah munggaran nyaéta ngimunisasi sasatoan sareng kéngingkeun sél B, antibodi, atanapi PBMC anu saluyu pikeun nyiapkeun produksi antibodi salajengna, ngamajukeun panalungtikan ilmiah dasar, ngembangkeun alat diagnostik klinis, sareng ngagampangkeun panemuan sareng pamekaran ubar énggal. Onta, alpaka, Liama, sareng onta sanés dina Camelidae tiasa ngahasilkeun perpustakaan nanobody (antibodi domain tunggal) ngalangkungan pangumpulan getih imun sareng ékstraksi PBMC. Kelenci sareng sasatoan sanés tiasa diimunisasi sareng antibodi tiasa diekstrak tina awakna. Saatos dimurnikeun, éta tiasa dianggo pikeun ngahasilkeun antibodi poliklonal. Beurit, mencit, jsb. tiasa dianggo pikeun ngahasilkeun antibodi monoklonal ku cara ngahijikeun sél B anu diekstrak imun sareng sél myeloma. Sateuacan imunisasi, perhatian kedah dibayar kana prinsip 3R (panggantian, réduksi, panyampurnaan), anu tiasa sacara signifikan ngirangan jumlah sasatoan anu dianggo dugi ka minimum anu diperyogikeun, ningkatkeun prosedur ékspérimén, sareng ngaminimalkeun sangsara sasatoan. Desain ékspérimén anu leres, pamilihan antibodi anu pas, sareng prosedur validasi anu ketat ogé kedah dituturkeun.

Klasifikasi imunogen - produksi nanobody

Jenis-jenis Imunogen	Conto	Persiapan Imunogen	Catetan
Imunogén Protéin	Énzim, protéin, racun baktéri, sareng zat-zat sanésna	Pilih sistem éksprési protéin anu béda: E. coli, ragi, sél serangga, sél mamalia, sareng sistem bébas sél	Perhatikeun faktor-faktor sapertos suhu, waktos, pH, sareng badan inklusi anu mangaruhan éksprési protéin
Imunogén Asam Nukléat	DNA, RNA	Imunogén DNA: Ngawangun DNA plasmid, ngaklon véktor éksprési anu cocog pikeun gén target, sél kultur pikeun ngamplifikasi DNA plasmid, sareng ngékstrak DNA plasmid anu mibanda kamurnian luhur. RNA Imunogen: Perlu Nambahkeun Struktur Topi sareng Buntut PoliA pikeun Nyegah Degradasi	Nalika nyiapkeun imunogen DNA, perhatian kedah dibayarkeun kana sél inang anu pas, sareng nalika nyiapkeun imunogen RNA, perhatian kedah dibayarkeun pikeun nyegah degradasi RNA.
Imunogén Viral	Vaksin anu diinaktivasi ku virus lengkep, vaksin subunit, vaksin véktor virus (adenovirus, lentivirus, jsb.), vaksin mRAN.	Nalika nyiapkeun vaksin anu diinaktivasi tina virus sacara gembleng, virus éta diinaktivasi heula pikeun ningkatkeun kaamanan. Uji toksisitas dianggo pikeun nangtukeun naha inaktivasi parantos réngsé. Vaksin subunit ngan ukur meryogikeun protéin permukaan virus salaku antigen sareng kedah mertimbangkeun khasiat imun.	Adjuvan perlu ditambahkeun pikeun méré éfék imun, perhatian kudu dibikeun ka virus anu perlu diinaktivasi, titer virus anu pas diperlukeun pikeun mastikeun éfék imun, sarta kaamanan prosés persiapan kudu dikontrol sacara ketat.

Prosés atanapi Garis Waktu Imunisasi Sato

Pilihan Sato sareng Persiapan Antigen

Pilihan sasatoan: Pilih alpaka anu umurna pas sareng awakna séhat tina kelompok anu séhat, teras laksanakeun pamariksaan getih sareng panyaringan panyakit pikeun mastikeun yén teu aya panyakit tepa atanapi masalah kaséhatan anu sanés.

Persiapan imunogen: Imunogen mangrupikeun konci pikeun nimbulkeun réspon imun sareng meryogikeun pilihan protéin, péptida, atanapi zat sanés anu cocog dumasar kana sarat antibodi target.

Sapi alpaka bisa diimunisasi ku 1-3 antigén sakaligus, kalayan jumlah total antigén 1-2mg per imunisasi sareng volume kirang ti 2mL. Sateuacan imunisasi, antigén sareng adjuvan diémulsi dina babandingan 1:1 pikeun ngabentuk campuran anu seragam, anu disimpen dina suhu 4 ℃.

Alpaka imunologis

Catet nomer ceuli alpaka anu kosong teras mimitian ékspérimén imunisasi. Suntikkeun kana kelenjar getah bening caket beuheung alpaka di dua sisi, kalayan 2 titik di unggal sisi sareng sakitar 0,4 mL antigen anu diémulsi anu disuntikkeun di unggal titik. Saatos imunisasi, amati salami satengah jam pikeun mastikeun yén alpaka teu aya gejala anu teu ngarareunah. Imunisasi kedah dikaluarkeun unggal 2 minggu, sahenteuna 4 imunisasi.

Pangumpulan getih

Saatos 4 imunisasi salami 5-7 dinten, kumpulkeun 50 ml getih tina urat beuheung alpaka.

Pamisahan sérum

Sampel getih dikumpulkeun pikeun évaluasi imun sateuacan unggal imunisasi antigen, kalayan 5mL getih dicandak unggal waktos; Dina dinten anu sami, getih disentrifugasi dina 400 xg salami 30 menit nganggo centrifuge 25 ℃ anu parantos didinginkan. Lapisan luhur sérum dipisahkeun sareng disimpen pikeun uji titer antibodi salajengna.

Limfosit anu misah

Mimitina tambahkeun 15mL larutan pamisah sél, teras lalaunan tambahkeun 15mL getih kana tabung centrifuge 50mL. Ati-ati sareng laun nalika nambihan getih pikeun nyegah campuran getih sareng larutan pamisah. Centrifuge anu tos didinginkan dina suhu 25 ℃, centrifuge dina 400 xg salami 30 menit, sareng simpen sérum luhur dina tabung centrifuge énggal dina suhu -80 ℃; Anggo pipet pikeun nyedot sél imun lapisan luhur anu bentukna kapas tengah kana tabung centrifuge 50ml énggal. Tambahkeun 10mL buffer PBS dina suhu kamar kana unggal tabung, centrifuge dina 25 ℃ sareng 400 xg salami 20 menit. Cabut supernatan, tambahkeun 5mL buffer PBS dina suhu kamar kana unggal tabung, aduk rata lalaunan, itung jumlah sél nganggo hemocytometer, teras centrifuge dina 25 ℃ sareng 400 xg salami 20 menit. Kaluarkeun supernatant teras leyurkeun limfosit anu diala ku RNAiso Plus dumasar kana jumlah sél pikeun kéngingkeun 10 ^ 7/mL lisat sél, anu disimpen dina suhu -80 ℃.

Gambar 1: Gambaran Skematis tina Strategi Panemuan Antibodi anu Béda sareng Tahapan Ékspériméntal anu Kalibat. (Sumber Gambar: Laustsen, Andreas H. et al.)

Konsumén nyayogikeun imunogen - kontrol kualitas anu ketat

Jenis-jenis Imunogen	Sarat	Métode Kontrol Kualitas
Sampel Péptida / Molekul Leutik	Kaayaan disolusi (utamina gumantung kana naha éta bakal nganonaktipkeun fag), struktur molekul/runtuyan péptida, laporan sintésis (HPLC/MS/HNMR)	Deteksi HPLC/MS
Sampel Protéin	SDS-PAGE/WB, kaayaan rékonstitusi, buffer, informasi labél, jumlah total (20-50ug), konsentrasi, kamurnian, jsb.	SDS-PAGE/WB
Sampel Sél	Jenis sél (sél primér/sél anu diédit gén), bentuk sél (seger/beku anu dicairkeun), jenis kamekaran (napel/digantungkeun), sarat média kultur, jumlah sél anu disayogikeun, jumlah sél anu disayogikeun, sél anu diédit gén pikeun mastikeun éksprési target panyaringan anu stabil (antibodi primér anu saluyu sareng konsumén), sél anu dibekukeun anu dicairkeun pikeun nangtukeun laju pamulihan.	Utamana narékahan sél anu diédit gén, nganggo antibodi primér anu disayogikeun ku konsumén pikeun idéntifikasi ELISA tina éksprési target (perusahaan kami nyayogikeun antibodi sekundér HRP), deteksi sitometri aliran (perusahaan kami tiasa nyayogikeun antibodi sekundér fluoresensi).

Naon waé aplikasi tina kekebalan sato?

+

Antibodi poliklonal bisa dihasilkeun ku imunisasi sasatoan, antibodi monoklonal bisa dihasilkeun ku cara ngahijikeun sél B jeung sél myeloma, sarta PBMC bisa diekstrak tina sumber onta (alpaka, onta, alpaka, jsb.) pikeun ngahasilkeun rupa-rupa bentuk fragmen antibodi saperti nanobodi, fragmen Fab, fragmen antibodi scFv, jsb.
Naon waé tindakan pencegahan pikeun kekebalan sato?

+

Pikeun ngahasilkeun nanoantibodi pikeun sato anu asalna tina onta, diperyogikeun 5-6 imunisasi. Sampel getih kedah dikumpulkeun salaku kontrol sateuacan imunisasi, kalayan interval 2 minggu antara unggal imunisasi. Saatos imunisasi kaopat, getih positip sareng getih négatip anu teu diimunisasi kedah dikumpulkeun pikeun ELISA pikeun nangtukeun titerna. Upami titerna di handap 10 ^ 6, jumlah imunisasi kedah ditingkatkeun dugi ka titerna ngahontal tingkat anu pas. Pikeun imunisasi sato sanés sapertos imunisasi kelenci (tingkat antigen protéin optimal atanapi umum pikeun imunisasi kelenci nyaéta 50-1000 ug), imunisasi beurit (tingkat antigen protéin optimal atanapi umum pikeun imunisasi beurit nyaéta 5-50 ug, anu meryogikeun 10 ^ 6 sél upami éta sél, sareng 10-50 ug pikeun asam nukléat atanapi karbohidrat), imunisasi embe (tingkat antigen protéin optimal atanapi umum pikeun imunisasi embe nyaéta 250-5000 ug), jsb., perhatian kedah dibayar kana dosis, kaamanan, sareng khasiat imunogen.
Kumaha milih sasatoan anu imun?

+

Gumantung kana jinis antibodi anu diperyogikeun ku konsumén, upami anjeun kedah ngahasilkeun nanobodi atanapi fragmen antibodi anu sanés, anjeun tiasa milih sato anu asalna tina onta (onta, alpaka, alpaka) pikeun imunisasi. Upami anjeun kedah ngahasilkeun antibodi monoklonal atanapi poliklonal, anjeun kedah milih spésiés anu saluyu dumasar kana jumlah sérum, antigén, sareng sumber antigén. Jumlah sérum maksimum pikeun kelenci nyaéta 500ml, anu meryogikeun jumlah antigén anu sakedik sareng mangrupikeun pilihan utama pikeun ngahasilkeun antibodi poliklonal. Jumlah sérum maksimum pikeun beurit nyaéta 2ml, sareng jumlah sérum maksimum pikeun beurit nyaéta 20ml, anu biasana mangrupikeun pilihan optimal pikeun antibodi monoklonal. Antibodi anu dihasilkeun ku embe gaduh afinitas anu luhur, sareng Alpha Lifetech tiasa ngaropea rencana imunisasi éksklusif pikeun anjeun numutkeun sarat anjeun.
Naha antigén kedah dianggo babarengan sareng adjuvan? Kumaha milihna?

+

Aya dua jinis adjuvan: dumasar kana minyak sareng dumasar kana cai. Panggunaan adjuvan anu wajar penting pisan pikeun nimbulkeun réspon antibodi anu kuat kana antigén anu leyur. Pelepasan adjuvan anu terus-terusan hartosna dosis antigén anu langkung sakedik anu tiasa dianggo, sareng réspon antibodi langkung awét. Suntikan munggaran kedah dianggo digabungkeun sareng adjuvan. Sacara umum disarankeun pikeun nganggo adjuvan Freund nalika jumlah imunogen sakedik.
Pancegahan pikeun imunisasi alpaka?

+

(1) Milih alpaka sareng antigen imunitas mangrupikeun konci pikeun imunisasi anu suksés. Milih onta anu proporsional henteu disarankeun. Kamurnian sareng konformasi antigen imun anu leres penting pisan pikeun nyaring antibodi anu cocog pikeun aplikasi salajengna saatos imunisasi nganggo alpaka. Kamurnian antigen protéin umumna henteu kirang ti 90%.

(2) Pamisahan limfosit: Pamisahan sél anu pas waktuna tiasa sacara efektif nyegah hémolisis saatos pangumpulan getih pikeun ngahontal pangaruh pamisahan anu pangsaéna.

(3) Siklus imun tiasa mangaruhan réspon imun: interval imun 1-2 minggu ngamungkinkeun alpaka gaduh réspon imun anu saé kana kaseueuran antigén.

adjuvan anu dimekarkeun sacara mandiri

Adjuvan formula unik kami parantos dioptimalkeun pikeun sistem imun alpaka, nyayogikeun poténsi sareng spésifisitas anu langkung luhur tibatan adjuvan tradisional.

Pangiriman imunisasi
standar

Kami jangji bakal ngalengkepan imunisasi dina waktos anu ditangtukeun, nyayogikeun sérum titer anu luhur, sareng ngarékam unggal léngkah ngalangkungan laporan anu lengkep.

Kontrol kualitas proyék

Unggal proyék ngalaman prosés kontrol kualitas anu ketat pikeun mastikeun pangiriman antibodi anu nyumponan standar anu luhur ka para nasabah.

kalawan jelasAlpakaLatar

Urang gaduh populasi alpaka anu séhat anu nyayogikeun dukungan pikeun rupa-rupa program imunisasi.

Upami anjeun gaduh patarosan, mangga ngahubungi kami iraha waé.

Leave Your Message

Layanan Unggulan

0102