Layanan Pematangan Afinitas Antibodi

Alpha Lifetech Inc.tiasa nawiskeun jasa pematangan afinitas antibodi ku ngagunakeun téknologi mutasi sareng seleksi. Kami biasana nganggo scFv salaku format antibodi dina prosés jasa pematangan afinitas sareng sistem phagemid tampilan monovalen anu parantos dianggo pikeun ngirangan épék aviditas salami skrining ngabeungkeut antigen. Tim profésional kami ogé tiasa nyayogikeun jasa pematangan afinitas pikeun antibodi domain tunggal.

Alpha Lifetech Inc.reueus nawiskeun jasa anu komprehensif pikeun minuhan rupa-rupa kabutuhan klien global. Tujuan kami nyaéta pikeun ngartos sareng minuhan paménta konsumén anu béda-béda sareng ngabantosan masalah anu bakal datang sareng anu muncul dina padamelan panalungtikan.

Naon Ari Pematangan Afinitas?

Pematangan afinitas nyaéta prosés dimana antibodi ngalaman mutasi sareng seleksi anu diulang-ulang pikeun ningkatkeun afinitasna pikeun antigen spésifik. Utamana lumangsung di puseur germinal organ limfoid sekundér, sél B ngalaman hipermutasi somatik sareng seleksi dina pangaruh sél T sareng sél déndritik folikel.
Salila prosés pematangan afinitas, sél B kalayan reséptor imunoglobulin permukaan afinitas handap diaktipkeun ku patepungan antigén sareng ngalaman proliferasi sareng diferensiasi. Ngaliwatan pematangan afinitas hipermutasi somatik, substitusi nukléotida acak lumangsung di daérah variabel gén imunoglobulin, anu ngarah kana produksi rupa-rupa varian antibodi. Saatos hipermutasi somatik, seleksi anu didorong ku antigén dilaksanakeun dina sél B kalayan reséptor imunoglobulin anu bermutasi. Sél B anu ngahasilkeun antibodi kalayan afinitas antigén anu ningkat langkung dipikaresep ditahan sareng diidinan pikeun proliferasi, sedengkeun sél B kalayan afinitas anu turun atanapi henteu robih ngalaman apoptosis. Prosés iteratif mutasi sareng seleksi ieu ngarah kana produksi klon sél B, ngahasilkeun antibodi kalayan afinitas anu laun-laun langkung luhur pikeun antigén.

Layanan Pematangan Afinitas Antibodi

Kaunggulan utama tina metode berbasis PCR nyaéta mutasi ditujukeun sacara tepat kana fragmen anu diamplifikasi; tingkat kasalahan gampang dikontrol sareng metode ieu gancang sareng gampang diatur sareng henteu nganggo bahan kimia anu bahaya. Éta dipikanyaho umum yén Taq DNA polymerase ngaduplikasi DNA kalayan kasatiaan anu handap, sacara substansial kusabab henteuna aktivitas proofreading 3' dugi ka 5'.Alpha Lifetech'sPlatform rékayasa antibodi nerapkeun pendekatan PCR anu rawan kasalahan pikeun mutasi utamina daérah CDR salami konstruksi sub-perpustakaan. Sareng sering urang nyiptakeun mutasi dina posisi acak lengkep di sakumna fragmen VH sareng VL, pikeun ningkatkeun karagaman genetik sub-perpustakaan. Saatos konstruksi perpustakaan gén antibodi anu dimutasi ku PCR anu rawan kasalahan, pamilihan varian afinitas tinggi (afinitas antibodi scFv tiasa ngahontal 10^8 - 10^10 M) boh dilakukeun ku cara panning dina larutan atanapi dina antigen anu teu gerak kalayan kaayaan cuci anu dioptimalkeun pikeun pamilihan anu gumantung kana laju anu béda.
  
Élmuwan diAlpha Lifetech Inc.nganggo galur mutator Escherichia coli mutAD5TM salaku salah sahiji tina sababaraha strategi mutasi pikeun ngenalkeun mutasi acak, sareng ku kituna ngarobih afinitas sareng éksprési fragmen antibodi rekombinan. Kaayaan seleksi tiasa dirobih pikeun fragmen antibodi kalayan tingkat produksi anu ningkat. Kaayaan kamekaran dina sél mutator Escherichia coli tiasa disaluyukeun pikeun ngenalkeun mutasi titik acak tunggal per kilobasa DNA, ampir sami sareng hiji parobahan kodon per fragmen scFv. Saatos sababaraha siklus mutasi, tampilan, sareng seleksi, urang tiasa ningkatkeun konstanta afinitas ti 10^5 - 10^6 M ka 10^8 - 10^10 M.

Ningkatkeun Strategi Pematangan Afinitas

Posisi antibodi anu tangtu tiasa diacak dina karagaman anu ditetepkeun (sapertos acak lengkep sareng sadaya 20 asam amino atanapi acak bias sareng asam amino anu dipilih dina persentase anu tetep) pikeun ningkatkeun afinitas. Kami gaduh dua strategi pikeun ningkatkeun afinitas antibodi: kahiji, mutasi diwanohkeun dina posisi anu diwatesan dina daérah anu nangtukeun komplementaritas (CDR) ku mutagenesis anu diarahkeun ku situs; kadua, mutasi diwanohkeun kana sakumna daérah kode-V ku mutagenesis acak. Ku ngagunakeun dua metode ieu, runtuyan asam amino anu dilestarikan atanapi sakumna daérah kerangka antibodi bakal diganti ku asam amino sanés, anu digabungkeun sareng téknologi scanning perpustakaan péptida kami, tiasa ningkatkeun afinitas antibodi anu dipikaresep kana tingkat anu luhur pisan.

Tampilan Fag-Afinitas Antibodi

Sakali perpustakaan mutan scFv parantos diwangun, aya dua strategi panyaringan anu sayogi: biopanning sareng panyortiran antigen padet. Dina anu sateuacanna, konsentrasi subtraktif substrat dianggo pikeun ngasingkeun antibodi afinitas luhur, sabab mutan afinitas handap bakal dibilas, nyésakeun partikel fag aviditas luhur. Strategi kadua nganggo antigen anu dilabélan dina larutan, seleksi dumasar kana konstanta kasaimbangan (Kd), sareng seleksi dumasar kana kinétika pangiket, pendekatan seleksi ieu ngasingkeun varian antibodi kalayan Kd anu ningkat.

Upami anjeun gaduh patarosan, mangga ngahubungi kami iraha waé.