Layanan Panalungtikan Aptamer

Bubuka kana Aptamer

Aptamer nyaéta molekul asam nukléat untaian tunggal (sapertos DNA atanapi RNA) anu disaring in vitro tina perpustakaan oligonukleotida sintétis kalayan runtuyan anu ditugaskeun sacara acak ku prosés anu disebut panyaringan SELEX, anu ngalibatkeun sababaraha puteran seleksi iteratif. Komponén utama jasa pamekaran aptamer anu dipiboga ku Alpha Lifetech kalebet konstruksi perpustakaan aptamer, panyaringan aptamer SELEX, sekuensing aptamer SELEX, analisis runtuyan aptamer sareng analisis aptamer anu sanésna.

Sekuensing SELEX ngagabungkeun panyaringan aptamer SELEX sareng sekuensing throughput tinggi. Ngaliwatan sekuensing aptamer SELEX, runtuyan spésifik aptamer anu kaiket kana target tiasa ditangtukeun sacara efisien, nyayogikeun data dasar pikeun analisis sareng aplikasi runtuyan aptamer salajengna.

Aptamer parantos seueur dianggo dina panalungtikan ilmiah, pangobatan panyakit, konstruksi biosensor, panemuan ubar sareng pemantauan lingkungan. Nanging, aptamer oligonukleotida anu disaring in vitro gampang didegradasi in vivo sareng bahkan nunjukkeun toksisitas. Ku alatan éta, saatos ngaoptimalkeun aptamer anu disaring, analisis in vitro diperyogikeun pikeun meunteun kasuksésan pamekaran aptamer. Numutkeun kana kabutuhan analisis anu béda-béda ti para nasabah, Alpha Lifetech gaduh rupa-rupa strategi analisis aptamer pikeun dipilih ku para nasabah.

Gambar 1 Diagram analisis aptamer. Sumber rujukan:Thevendran R, Citartan M. 2022. Uji pikeun Ngira-ngira Afinitas Pangiket Aptamer.

Bubuka kana Layanan Panalungtikan Aptamer

Analisis Stabilitas Aptamer

Ékspérimén degradasi nuklease

Ku cara ngainkubasi aptamer ku rupa-rupa jinis nuklease (sapertos DNase, RNase, jsb.) dina kaayaan anu khusus, degradasi aptamer bakal dititénan, supados tiasa meunteun kamampuan anti-degradasi na. Ieu mangpaat pikeun nangtukeun stabilitas sareng daya tahan aptamer dina aplikasi praktis.

Métode panyiri fluoresensi

Stabilitas aptamer dievaluasi sacara teu langsung ku cara méré labél ka fluorofor dina aptamer sareng niténan parobahan sinyal fluoresensi sateuacan sareng saatos ngabeungkeut sareng target. Salaku conto, nalika aptamer ngabeungkeut kana target, konformasi na tiasa robih, anu ngahasilkeun sinyal fluoresensi anu ningkat atanapi ngirangan.

Analisis stabilitas termal

Stabilitas termal aptamer ditaksir ku cara ngukur parobahan suhu leburna (nilai Tm) dina suhu anu béda-béda. Beuki luhur suhu lebur aptamer, beuki saé stabilitas termalna.

Analisis stabilitas dinamis

Resonansi plasmon permukaan (SPR) sareng téknologi sanésna dianggo pikeun ngawas prosés pangiketan sareng decoupling antara aptamer sareng target sacara real time, kéngingkeun parameter dinamis (sapertos konstanta laju pangiket, konstanta laju disosiasi, jsb.), langkung ngartos mékanisme interaksi antara aptamer sareng target, sareng meunteun stabilitas dinamisna.

Analisis stabilitas struktural

Kristalografi sinar-X, résonansi magnét nuklir (NMR) sareng téknik biologi struktural anu sanésna dianggo pikeun nganalisis struktur tilu diménsi aptamer sareng stabilitas strukturalna.

Analisis Spésifik Aptamer

Uji beungkeutan Aptamer

Afinitas dipeunteun ku cara ngalaksanakeun uji pangiket aptamer pikeun ngukur konstanta pangiket antara aptamer sareng molekul target, sapertos konstanta disosiasi Kd. Nilai Kd anu langkung handap nunjukkeun afinitas anu langkung luhur. Uji pangiket aptamer tiasa nyaring calon ubar anu gaduh kamampuan pangiket anu luhur, teras ngalaksanakeun studi farmakodinamik sareng farmakokinetik salajengna.

Ékspérimén panyaringan tibalik

Uji panyaringan tibalik nyaéta metode panyaringan pikeun gancang ngaluarkeun molekul non-target tina sajumlah ageung molekul calon. Panyaringan tibalik dirancang pikeun ngaluarkeun molekul anu henteu ngagaduhan sipat atanapi fungsi ieu. Konci pikeun panyaringan tibalik nyaéta milih spidol atanapi kaayaan panyaringan tibalik anu pas anu ngamungkinkeun molekul non-target diidentipikasi sareng dipiceun salami prosés panyaringan. Dina ékspérimén ieu, pamilihan molekul non-target penting pisan. Kedah dipastikeun yén molekul non-target anu dipilih ngawakilan zat anu tiasa ngaganggu panyaringan aptamer sareng yén faktor anu ngaganggu anu mungkin ditangtayungan sapinuhna.

Ékspérimén inhibisi kompetitif

Ku cara nambahkeun pesaing anu kaleuleuwihi (sapertos molekul anu strukturna sami sareng molekul target) kana sistem pangiket aptamer sareng molekul target, parobahan kamampuan pangiket aptamer sareng molekul target bakal katingali. Upami kamampuan aptamer pikeun ngaiket molekul target turun sacara signifikan, éta nunjukkeun yén aptamer gaduh spésifisitas anu luhur.

Dina sababaraha kasus, ékspérimén inhibisi kompetitif tiasa dianggo salaku bagian tina atanapi salaku tambahan pikeun ékspérimén panyaringan terbalik. Salaku conto, dina prosés panyaringan ubar, kamampuan molekul ubar pikeun ngabeungkeut protéin target tiasa dievaluasi ku ékspérimén inhibisi kompetitif, teras ékspérimén panyaringan terbalik tiasa dianggo pikeun miceun sanyawa anu kabeungkeut teuing pageuh kana sél atanapi jaringan normal.

Analisis Sitotoksisitas Aptamer

Aya rupa-rupa metode ékspériméntal pikeun analisis sitotoksisitas aptamer, anu dirancang pikeun meunteun pangaruh aptamer kana salametna sél, proliferasi, atanapi fungsi.

Métode	Bubuka Lengkep	Kauntungan	Kakurangan
Métode Deteksi MTT	Uji MTT nyaéta métode anu dumasar kana aktivitas énzim dina mitokondria sél hirup. Dehidrogenase suksinat dina mitokondria sél hirup tiasa ngirangan MTT éksogén kana kristal biru-ungu anu teu leyur dina cai Formazan sareng neundeunna dina sél, sedengkeun sél paéh teu gaduh fungsi sapertos kitu. Ngaleyurkeun kristal ieu ku dimetil sulfoksida (DMSO) sareng ngadeteksi absorbansi dina panjang gelombang spésifik (sapertos 490 nm atanapi 570 nm) dina énzimoleter sacara teu langsung tiasa ngagambarkeun jumlah sél hirup sareng ku kituna meunteun sitotoksisitas aptamer.	Sensitivitas anu luhur, ékonomi sareng genah	Beban kerja anu beurat, pangleyur organik tiasa nyababkeun karusakan sél; Ngan hasil ékspérimén ahir anu tiasa didapet, sareng prosés sitotoksisitas anu lengkep teu tiasa ditingali
Métode Deteksi CCK-8	Cell Counting Kit-8 (CCK-8) nyaéta métode deteksi kolorimetri anu sénsitipitasna luhur, non-radioaktif. CCK-8 ngandung WST-8, anu diréduksi ku dehidrogénase dina mitokondria sél hirup pikeun ngahasilkeun bahan bakar metil zan jeruk anu leyur pisan dina cai. Jumlah pewarna mezan anu dihasilkeun sacara linier aya hubunganana sareng jumlah sél hirup, sareng jumlah sél hirup tiasa dicerminkan sacara teu langsung ku cara ngukur nilai panyerepan cahaya pewarna Mezan dina panjang gelombang 450 nm, supados tiasa meunteun sitotoksisitas aptamer.	Operasi basajan, teu kedah ngumbah sél, deteksi gancang, rentang deteksi linier lega, sensitivitas tinggi, kabisaulangan alus, sitotoksisitas saeutik	Harga réagen anu mahal; Kadang-kadang hésé pikeun nangtukeun naha panurunan absorbance disababkeun ku panurunan jumlah sél hirup atanapi panurunan aktivitas dehidrogenase sél éta sorangan.
Métode Deteksi LDH	LDH (laktat dehidrogenase) nyaéta énzim anu stabil dina sitoplasma sél, sareng nalika mémbran sél ruksak, LDH dileupaskeun ka luar sél. LDH tiasa ngatalisis asam laktat pikeun ngabentuk piruvat, sareng ngaréaksikeun sareng INT (uyah tetrazolium) pikeun ngabentuk zat kristalin wungu. Ku cara ngukur panyerepanana dina panjang gelombang anu khusus (sapertos 490 nm), tingkat karusakan sél tiasa dicerminkan, teras sitotoksisitas aptamer tiasa dievaluasi.	Éta langsung ngagambarkeun tingkat maotna sél, sareng kirang ngaruksak sél, sareng teu aya kontaminasi isotop radioaktif.	Kabutuhan pikeun sering ngaluarkeun sél tina inkubator, operasina langkung rumit; Ngan hasil ékspérimén ahir anu tiasa didapet, sareng prosés sitotoksisitas lengkep henteu tiasa ditingali.
Analisis Pencitraan Sél Hirup Real-time	Ngagunakeun alat penganalisis pencitraan sél hirup sacara real-time, instrumen ditempatkeun dina inkubator pikeun niténan sareng ngarékam sakabéh prosés siklus kamekaran sél sacara real-time. Sitotoksisitas aptamer tiasa dievaluasi ku cara nganalisis parobahan morfologis sareng kurva kamekaran sél. Métode ieu tiasa nyayogikeun pidéo sareng hasil kuantitatif tina prosés sitotoksik bari ngajaga lingkungan kamekaran sél tetep stabil.	Éta tiasa ngawas prosés sitotoksik sacara real time, pencitraan non-destruktif, ngirangan gangguan sareng karusakan sél; Duanana hasil pidéo sareng kuantifikasi sayogi pikeun analisis anu jero.	Biaya alat-alatna mahal sareng meryogikeun kamampuan operasi profésional sareng kamampuan analisis data

KACHI

Kauntungan Layanan Panalungtikan Aptamer

Kontrol Kualitas Total

Aptamers anu dioptimalkeun kalayan stabilitas anu langkung luhur

Ékonomis sareng efisien. Harga anu langkung kompetitif, layanan anu langkung saé

Tempat panalungtikan anu komprehensif sareng sababaraha metode panalungtikan

Konsultasi pra-penjualan profésional sareng jasa dukungan saatos penjualan

Pangalaman anu beunghar dina analisis aptamer

Tim R&D tingkat luhur

Layanan anu aya hubunganana sareng aptamer khusus

Balik deui ka Kaca Platform Pangwangunan Aptamer

Upami anjeun gaduh patarosan, mangga ngahubungi kami iraha waé.

Leave Your Message

Layanan Unggulan

0102