Dina taun 1960, konsép antibodi bispésifik diajukeun. Antibodi bispésifik, ogé katelah antibodi monoklonal bispésifik, nyaéta antibodi anu disintésis sacara jieunan nganggo téknologi rékayasa genetik. Salaku antibodi jieunan anu direkayasa, antibodi bispésifik biasana kagolong kana subkelas IgG sareng ngandung fragmen pangiket antigén anu narékahan subunit CD3. Antibodi bispésifik gaduh dua situs pangiket antigén spésifik anu tiasa ngabeungkeut sareng mikawanoh dua antigén anu béda, atanapi dua epitop anu béda tina hiji antigén. Dibandingkeun sareng antibodi monoklonal, antibodi bispésifik gaduh situs pangiket antigén spésifik tambahan, sahingga gaduh spésifisitas sareng kamampuan panargetan anu langkung kuat, anu tiasa langkung akurat narékahan sél tumor sareng ngirangan toksisitas anu teu dihoyongkeun. Antibodi bispésifik tiasa sacara babarengan ngalaksanakeun sababaraha fungsi biologis, sapertos ngarékrut sél imun, meungpeuk jalur sinyal, sareng langsung maéhan sél tumor. Antibodi bispésifik awal utamina disiapkeun ngalangkungan konjugasi kimia atanapi fusi sél, tapi metode ieu panginten maju laun kusabab kombinasi acak sareng kasusah dina ngasingkeun kombinasi target. Kalayan kamekaran téknologi rékayasa genetik anu terus-terusan, seueur platform téknologi énggal anu parantos dikembangkeun, sapertos knots in holes (KIH), CrossMab, DVD Ig, jsb. Platform ieu sacara efektif ngarengsekeun masalah sapertos ketidakcocokan ranté beurat sareng ranté hampang, sareng ningkatkeun keseragaman sareng hasil antibodi bispésifik.

Métode utama pikeun produksi antibodi bispésifik kalebet gandéngan kimiawi, hibridoma opat sumber, sareng persiapan antibodi rékayasa genetik. Di antarana, metode gandéngan kimiawi ngagabungkeun dua IgG anu utuh atanapi dua fragmen antibodi F (ab ') 2 kana antibodi bispésifik nganggo agén gandéngan kimiawi sapertos phthalimide sareng asam dithioacylbenzoic. Métode ieu saderhana sareng gampang dioperasikeun, tapi tiasa ngaruksak situs pangiket antigén, ngirangan aktivitas antibodi, sareng agén gandéngan éta sorangan ogé gaduh tingkat karsinogenikitas anu tangtu. Métode hibridoma opat sumber dumasar kana fusi sél somatik tina dua garis sél hibridoma anu béda pikeun ngébréhkeun IgG beurit anu saluyu. Ngaliwatan téknologi rékayasa genetik, antibodi tiasa dirobih sacara genetik pikeun ngabentuk antibodi bispésifik. Dua antibodi monoklonal anu béda didamel, sareng fragmen Fab atanapi daérah variabel ranté beurat sareng ranté hampang tina dua antibodi dipotong sacara misah. Ngaliwatan réaksi cross-linking atanapi téknologi rekombinasi ranté, dua fragmen digabungkeun pikeun ngabentuk antibodi bispésifik. Sanaos kompleksitas téknologi rékayasa genetik relatif luhur, ayeuna mangrupikeun metode anu paling umum dianggo pikeun produksi antibodi bispésifik pikeun nyaluyukeun struktur sareng fungsi antibodi. Nalika ngalaksanakeun desain antibodi bispésifik, prinsip réaktivitas silang antibodi tiasa dianggo, tapi réaktivitas silang antibodi tiasa nyababkeun réaksi non-spésifik, janten éta bakal dipertimbangkeun sacara saksama dina aplikasi praktis desain antibodi bispésifik, sapertos terapi antibodi bispésifik.

Purifikasi antibodi bispésifik nyaéta prosés ngasingkeun sareng ngamurnikeun antibodi target anu mibanda kamurnian luhur. Dua metode, nyaéta sentrifugasi sareng filtrasi jero, dianggo pikeun miceun sababaraha pangotor anu leyur. Antibodi bispésifik target mimitina ditéwak ku kromatografi afinitas. Pikeun antibodi bispésifik sapertos IgG, kromatografi afinitas protéin A dianggo, sedengkeun pikeun antibodi bispésifik non-IgG sapertos, kromatografi afinitas dumasar ranté hampang tiasa dianggo. Saatos éta, antibodi diinkubasi dina kaayaan pH anu handap salami periode waktu anu tangtu, nyababkeun struktur protéin dina permukaan amplop virus kaganggu, sahingga kaleungitan kamampuan pikeun ngainféksi sél. Filtrasi jero sedeng dilakukeun pikeun miceun pangotor sapertos protéin sél inang (HCP). Kamurnian antibodi ningkat ngalangkungan metode sapertos kromatografi pertukaran ion, sareng virus sésa-sésa dipiceun ngalangkungan téknik nanofiltrasi atanapi ultrafiltrasi. Pamungkas, sampel dikonsentrasikeun sareng diganti ku buffer formulasi anu cocog.