Layanan Analisis Interaksi Protéin-Protéin
Alpha Lifetech ogé tiasa nyayogikeun ka konsumén uji protéin, analisis interaksi protéin, uji interaksi protéin-protéin (CO-IP, Western Blot, uji imunoprésipitasi Chromatin), sareng uji fungsi protéin pikeun minuhan kabutuhan ékspériméntal konsumén anu béda-béda.
TAROS KAMI01
Layanan Analisis Interaksi Protéin-Protéin
Alpha Lifetech parantos kalibet pisan dina uji protéin salami mangtaun-taun ngawangun platform anu saé pikeun uji fungsi protéin, sareng nguasaan rupa-rupa cara téknis pikeun mastikeun interaksi protéin, anu tiasa ngahémat waktos panalungtikan ilmiah atanapi panalungtikan proyék bari ngahasilkeun hasil anu stabil.
Alpha Lifetech ogé tiasa nyayogikeun ka konsumén uji protéin, analisis interaksi protéin, uji interaksi protéin-protéin (CO-IP, Western Blot, uji imunoprésipitasi Chromatin), sareng uji fungsi protéin pikeun minuhan kabutuhan ékspériméntal konsumén anu béda-béda.
Bubuka kana Uji Interaksi Protéin-Protéin
Protéin nyaéta molekul éksekutif anu paling penting dina sagala bentuk kahirupan anu ngaréspon kana pitunjuk anu disimpen dina bahan genetik. Langkung sering, protéin ngalakukeun padamelanna ku cara bertindak salaku pamaén peran anu berinteraksi sareng protéin sanés, anu langkung jelas nalika fungsi protéin ditalungtik dina kontéks sél anu saleresna. Ngaidentipikasi interaksi antara protéin penting pisan pikeun panilitian biokimia protéin individu. Analisis interaksi protéin tina jinis umum sapertos kieu:
Uji Ko-imunopresipitasi
Prinsip metode ko-imunoprésipitasi nyaéta nyampur protéin target, antibodi spésifik, sareng manik-manik magnét protéin A/G pikeun inkubasi, supernatan protéin anu teu kaiket dipiceun ngaliwatan adsorpsi manik-manik magnét dina rak magnét, teras manik-manik magnét dikumbah pikeun miceun protéin sareng pangotor sanésna kecuali upami kaiket sacara khusus.
Gambar 1 Diagram skematis tina uji Co-IP.(Sumber rujukan: Uji koimunoprésipitasi - PubMed (nih.gov))
Uji Tarik-handap
Uji tarik-handap nyaéta pikeun ngalereskeun protéin anu dipikanyaho dina manik magnét teras nambihan zat anu badé dideteksi. Eluén dideteksi pikeun adsorpsi protéin anu berinteraksi.
Dina taun 1988, Smith et al. ngamurnikeun protéin fusi GST, anu diterapkeun dina uji pull-down sareng disebut Gst pull down nyaéta pikeun nambihan tag GST kana protéin target, nangkep protéin anu berinteraksi ngalangkungan GSH, ngabédakeun pangiketna, sareng mastikeunana ngalangkungan uji WB.
Gambar 2 Diagram skematis tina uji pull-down GST.(Sumber rujukan: Uji Pull-Down GST pikeun Nalungtik Pangiket PIF4 In Vitro - PubMed (nih.gov) )
Cara pull-down-na nyaéta ku ngagunakeun ion logam sapertos nikel atanapi kobalt salaku média, ngamurnikeun protéin ngalangkungan kromatografi afinitas, sareng ngabédakeun pangiket ngalangkungan ékspérimén WB pikeun verifikasi.
Salian ti éta, aya DNA Pull-down (assay pengikatan protein dna), RNA Pull-down (assay interaksi protein rna), sareng small molecule pull-down assays.
DNA Pull-down (Protein dna binding assay) nyaéta métode in vitro pikeun nangtukeun beungkeutan DNA protéin. Naha protéin spésifik ngabeungkeut kana DNA target dideteksi ku uji WB; Fragmen DNA anu teu dipikanyaho ngabeungkeut kana protéin, fragmen DNA mana anu dipikanyaho ku deteksi MS.
RNA Pull-down (assay interaksi protéin rna) nyaéta metode in vitro pikeun nangtukeun RNA ngabeungkeut protéin. Naha protéin spésifik ngabeungkeut RNA target dideteksi ku uji WB; Fragmen RNA anu teu dipikanyaho ngabeungkeut protéin, fragmen RNA mana anu dipikanyaho ku deteksi MS.
SM pull-down (small molecule pull-down assays) tiasa mendakan protéin target anu ngabeungkeut sacara khusus kana molekul alit, sareng nalika digabungkeun sareng MS, protéin target molekul alit tiasa disaring sacara akurat, anu tiasa dibagi kana metode pelabelan in vitro sareng metode ortogonal biologis.
Ékspérimén WB
Ékspérimén WB (katelah ogé ékspérimén Western Blot atanapi Western blot), intina nyaéta réaksi spésifik antigén sareng antibodi, prinsip dasarna nyaéta misahkeun protéin anu didenaturasi ngalangkungan éléktroforésis gél poliakrilamida SDS sareng mindahkeunana ka pamawa fase padet (sapertos mémbran PVDF, mémbran NC) ngalangkungan transfer mémbran (rotasi baseuh atanapi semi-garing). Saatos diblokir (nganggo BSA, buttermilk, jsb.), antibodi primér diterapkeun pikeun ngabeungkeut sacara khusus kana protéin, sareng antibodi sekundér anu dilabélan fluorescein ditambahkeun saatos ngumbah pilem. Ku cara ngabeungkeut antibodi kadua sareng antibodi primér, protéin target tiasa dititénan ku kamekaran warna substrat sareng kemiluminesensi. Sacara umum dianggo pikeun nangtukeun naha protéin khusus diéksprésikeun dina sampel sareng sacara kasar nganalisis tingkat éksprési na.
Babandingan Métode Interaksi Protéin-Protéin
Uji pull-down protéin téh sarupa jeung uji Co-IP, duanana kaasup kana deteksi ékspérimén interaksi protéin. Bédana antara dua métode ieu nyaéta uji Co-IP meunangkeun protéin anu silih interaksi tina protéin anu dipikanyaho, anu miboga kaaslian anu tangtu tapi teu bisa mastikeun naha protéin anu silih interaksi silih interaksi sacara langsung atawa teu langsung. Uji pull-down nyaéta pikeun manggihan protéin anu teu dipikanyaho anu silih interaksi jeung protéin anu dipikanyaho. Éta bisa langsung mastikeun naha protéin anu dipikanyaho silih interaksi jeung protéin anu dideteksi tapi teu bisa nyaho kaayaan ngabeungkeutna sacara in vivo.
Téhnologi ko-imunoprésipitasi dianggo pikeun nganalisis naha aya interaksi antara dua atanapi langkung protéin, dumasar kana ékspérimén imunoprésipitasi, Dibandingkeun sareng téknik ékspériméntal analisis interaksi protéin anu sanés (GST Pull-down, Western Blot, Chromatin immunoprecipitation assay, jsb.), téknologi Co-IP gaduh spésifisitas, sensitivitas, sareng répétibilitas anu langkung luhur, anu tiasa nyingkahan gangguan pangiket non-spésifik sareng ngagambarkeun interaksi protéin dina kaayaan alami.
| GST Tarik ka handap | Ko-IP | WB | |
|---|---|---|---|
| Kauntungan | *Gampang dioperasikeun *Cocog pikeun purifikasi rupa-rupa protéin | *Pikeun analisis interaksi in vivo *Ieu tiasa diidentipikasi ku protéin hilir | *Spésifisitas anu kuat *Kualitatif sareng kuantitatif in vitro |
| Watesan | *Meureun ngabeungkeut teu spésifik *Validasi salajengna pikeun interaksi diperyogikeun | *Katergantungan anu kuat kana antibodi *Ikatan nonspesifik tiasa waé lumangsung | *Nyéépkeun waktos *Hésé dianggo pikeun analisis protéin skala ageung |
| Conto Aplikasi | *Ngaidentipikasi interaksi *Kompleks protéin anu dimurnikeun | *Ulikan transduksi sinyal *Mekanisme panyakit | Analisis salajengna ngeunaan interaksi protéin-protéin, protéin-DNA, sareng protéin-RNA |
Disaluyukeun
Sesuaikeun jasa pikeun nyumponan kabutuhan anjeun
Pangalaman
Pangalaman produksi protéin salami mangtaun-taun
Téhnologi
Hasil pangiriman anu kualitasna luhur
Prosés Ékspérimén
Prosés manajemen kualitas anu ketat
Upami anjeun gaduh patarosan, mangga ngahubungi kami iraha waé.
Leave Your Message
2018-07-16 
0102