Antibodi VHH nyaéta antibodi ranté hampang (VL) alami anu leungit anu aya dina sérum sato onta. Struktur antibodi VHH basajan sareng ngan ukur diwangun ku dua ranté beurat (VH). Nanobodi ngawengku daérah variabel ranté beurat (VHH) kalayan beurat molekul sakitar 15 kDa. Antibodi VHH ngagaduhan kamampuan normal pikeun mikawanoh antigén sareng nunjukkeun afinitas anu saé, spésifisitas anu saé, stabilitas anu saé, sareng penetrasi anu saé. Antibodi kana struktur parantos kapendak dina sato sanés, sapertos alpaka sareng hiu. Nanobodi, anu ngan ukur ngandung hiji daérah variabel ranté beurat sareng dua daérah CH2 sareng CH3 konvensional, sanaos teu gaduh domain VL, mangrupikeun antibodi domain tunggal anu stabil pisan sareng unit pangiket pangleutikna anu dipikanyaho kalayan aktivitas antibodi. Alpha Lifetech tiasa nyayogikeun palanggan kalebet persiapan nanobodi, konstruksi sareng panyaringan perpustakaan nanobodi, éksprési nanobodi VHH, sareng sarangkaian jasa, ngalangkungan platform pamekaran sintésis nanobodi sareng tampilan fag, éta tiasa sacara efisien ngawangun sareng nyaring kalebet rupa-rupa jinis perpustakaan antibodi fag anu béda, nyayogikeun palanggan kami solusi antibodi spésifisitas anu luhur sareng spésifisitas anu spésifik. Kami ogé tiasa ngembangkeun strategi humanisasi antibodi profésional pikeun klien kami, anu tiasa dihumanisasi pikeun nanobodi, sareng perusahaan kami ampir sami sareng antibodi manusa.

Mimitina, alpaka anu teu aya panyakitna, ngamungkinkeun imunogen pikeun ngarangsang sistem imunna pikeun ngahasilkeun réspon imun, sareng sato-sato ieu tiasa ngahasilkeun antibodi domain tunggal. Teras, urang ngasingkeun sél B tunggal tina alpaka PBMC, sareng RNA tina sél B diekstrak sareng ditranskripsi kana cDNA. Tungtungna tungtungna dianggo salaku citakan sareng disaring runtuyan VHH target urang ku éléktroforésis. Salajengna, urang ngalaksanakeun analisis sekuensing tina runtuyan antibodi VHH anu disaring, anu tiasa ningkatkeun stabilitas sareng afinitas antibodi VHH anu disiapkeun. Dina waktos anu sami, urang ogé tiasa ngalaksanakeun mutagenesis anu diarahkeun ku situs sareng panyaringan stabilitas antibodi VHH. Urang tiasa kéngingkeun stabilitas mutan antibodi VHH anu langkung luhur ku ngenalkeun metode khusus sapertos mutasi khusus pikeun panyaringan. Insinyur teras nyelapkeun runtuyan VHH anu dihasilkeun kana véktor éksprési anu pas (sapertos plasmid, virus, jsb.) pikeun éksprési antibodi VHH. Tungtungna, ngalangkungan téknologi tampilan fag atanapi téknologi tampilan ragi, antibodi VHH diekspresikan dina permukaan host, teras nanoantibodi anu sacara khusus tiasa ngabeungkeut antigen target dipilih ku ngagunakeun antigen anu dilapis sareng ELISA. Alpha Lifetech ogé ngurutkeun sareng verifikasi nanobodi anu dipilih pikeun mastikeun katepatan sareng aktivitas fungsional tina sekuen nanobodi anu dikirimkeun ka para nasabah.

Téhnologi VHH ngamangpaatkeun rupa-rupa kamajuan dina rékayasa genetik, supados gén target disambung deui sareng disusun ulang dina kaayaan normal, anu tiasa nyayogikeun alat anu ngabeungkeut pisan pikeun téknologi sanés, anu tiasa ngandung rupa-rupa tag, sareng antibodi anu dihasilkeun ku téknologi VHH merenah pikeun dimurnikeun. Ngagunakeun téknik panyaringan throughput anu luhur, Alpha Lifetech tiasa nyaring antibodi VHH kalayan fungsi khusus anu diperyogikeun ku klien tina sajumlah ageung antibodi dina waktos anu singget. Samentawis éta, antibodi VHH tiasa dihasilkeun sacara teu terbatas sareng ékonomis, nalika antibodi VHH kakeunaan suhu anu luhur sareng pangleyur sanésna. Antibodi VHH tiasa dimanipulasi sacara genetik pikeun ngahasilkeun kagunaan sanés, sapertos janten perancah, panyiri, sareng ngarobih asam amino khusus. Antibodi VHH cocog pikeun platform umum naon waé anu nganggo antibodi konvensional, sapertos pelat mikrotiter, biosensor éléktrokimia, sareng alat aliran lateral. Kusabab ukuran anu langkung alit, antibodi VHH tiasa gaduh kapadetan anu langkung luhur dina domain ngabeungkeut, sapertos antibodi VHH gaduh kaunggulan anu luar biasa dina sinyal anu ningkat sareng ku kituna sensitivitas anu langkung luhur. Dina waktos anu sami, antibodi VHH gaduh aplikasi anu lega pisan dina diagnosis sareng pangobatan tumor, diagnosis peradangan, pangobatan panyakit sistem saraf pusat, sareng widang sanésna. Antibodi VHH khususna kapaké pikeun ngawas mikotoksin dina katuangan sareng pakan sabab gampang direkayasa sacara genetik sareng gaduh stabilitas anu saé pisan.

Dina prosés imunisasi, urang nganggo rupa-rupa imunogen. Numutkeun sipat imunogen, urang tiasa ngabagi kana antigen alami, antigen rekombinan, antigen sintétis, sareng antigen molekul leutik. Antigen alami kalebet imunogen virus. Prosés purifikasi imunogen alami rumit, anu ogé langkung sesah tibatan imunogen anu sanés, sareng biaya purifikasi ogé langkung luhur. Imunogen virus dibagi kana vaksin anu diinaktivasi virus sadayana, vaksin subunit, vaksin vektor virus, sareng vaksin mRNA. Vaksin anu diinaktivasi virus sadayana tiasa ngarangsang awak pikeun ngahasilkeun réspon imun, tapi virus kedah diinaktivasi sapinuhna, sareng prosés persiapan langkung rumit. Pikeun vaksin subunit, urang ngan ukur nganggo protéin permukaan virus salaku antigen, janten kaamanan imunogen ieu luhur, tapi adjuvan kedah ditambahkeun pikeun ningkatkeun pangaruh imun. Saatos modifikasi genetik, adenovirus sareng lentivirus dianggo salaku vektor pikeun ngainduksi kajadian réspon imun ngalangkungan réplikasi sareng éksprési virus. Pangaruh imun efisien sareng tahan lami, tapi prosés persiapan rumit, janten urang kedah ngontrol sacara ketat biosafety. Sanaos mRNA tiasa langsung diimpor kana sél, supados sél tiasa ngébréhkeun antigén sareng ngarangsang lumangsungna réspon imun, prosés ieu langkung sesah, anu meryogikeun urang pikeun mastikeun stabilitas sareng efisiensi pangiriman mRNA. Sanaos antigén rekombinan béda dina konformasi ti antigén alami, éta tiasa ngalaman produksi industri anu éksténsif. Protéin molekul leutik atanapi antigén polipéptida, tiasa disiapkeun ku metode sintésis in vitro. Strukturna tiasa dikontrol, tapi tiasa rumit dina desainna. Antigén molekul leutik biasana mangrupikeun sanyawa molekul leutik sapertos péptida sareng nukléotida, sabab henteu imunogenik ku nyalira, janten éta ngan ukur tiasa dianggo salaku imunogén saatos dihubungkeun sareng pamawa makromolekul.

Beurat molekul nanoantibodi téh leutik pisan, biasana sakitar 12-15 kDa, ngan sapersapuluh tina antibodi IgG tradisional. Struktur kristalna nyaéta bal rugbi anu diaméterna sakitar 2,5 nm sareng panjangna sakitar 4,2 nm. Struktur molekul anu unik ngamungkinkeun penetrasi jaringan anu saé, satengah hirup anu langkung pondok, sareng clearance ginjal anu langkung luhur, ngalangkungan panghalang getih-otak. Nanoantibodi diwangun ku daérah panangtu sareng tulang tonggong anu saling ngalengkepan. Daérah kaputusan anu saling ngalengkepan kalebet CDR 1, CDR 2, sareng CDR 3. Rentang panjang 3 dugi ka 28 asam amino dina daérah CDR 3 mastikeun kapasitas panyimpenan perpustakaan nanoantibodi. Dibandingkeun sareng daérah antibodi CDR 3 tradisional anu ngan ukur 8 dugi ka 15 asam amino, sababaraha daérah CDR 3 kalayan CDR 3 anu langkung panjang ngabantosan urang pikeun ngaidentipikasi epitop anu disumputkeun dina permukaan antigen. Daérah tulang tonggong nanobodi ngawengku FR 1, FR 2, FR 3, sareng FR 4, kalayan opat mutasi asam amino hidrofilik dina FR 2, sareng mutasi ieu ningkatkeun kalarutan cai antibodi. Beungkeut disulfida khusus antara CDR 1 sareng CDR 3 ningkatkeun stabilitas antibodi dina tekanan tinggi, suhu tinggi, denaturant, sareng kaayaan sanésna, anu kondusif pikeun produksi sareng pelestarian nanobodi, sareng ogé nyiptakeun kamungkinan metode administrasi énggal.