Jukwaa la Chanjo ya Wanyama

Vyanzo vya wanyama vya Alpha Lifetech viko wazi, vikiwa na vibali vya ukaguzi na karantini, asili wazi za kijenetiki, masafa wazi ya chanjo, na rekodi za kina za vipindi vya chanjo, na kutoa huduma rahisi kwa ajili ya uzalishaji wa kingamwili. Huchanja wanyama wa Camelidae (Alpaca Liama, na Ngamia), na kuweka msingi wa uzalishaji wa nanobody. Zaidi ya hayo, inaweza pia kuchanja wanyama wa kawaida (kama vile sungura weupe wa New Zealand, panya, na wanyama wengine) kulingana na masafa yanayohitajika ya chanjo na mahitaji ya kingamwili ya wateja, kuwatoa na kuwatenga katika PBMC, na kuwatumia kwa majaribio yanayofuata (kama vile kingamwili ya monokloni, ukuzaji wa kingamwili ya polykloni, n.k.). Wateja wanaweza kutoa kingamwili zao wenyewe, na tutafanya udhibiti mkali wa ubora juu yao. Ikiwa wateja watatoa kingamwili za virusi, zinahitaji kuamilishwa na tutafanya upimaji wa kuamilishwa ili kuhakikisha usalama. Wakati huo huo, tunaweza pia kubinafsisha kingamwili zinazolingana kulingana na mahitaji ya wateja.

Utangulizi wa Chanjo ya Wanyama

Wakati wa kutengeneza kingamwili zinazotokana na wanyama kama vile kingamwili za monokloni, kingamwili za polykloni, na nanobodies, hatua ya kwanza ni kuwachanja wanyama na kupata seli B, kingamwili, au PBMC zinazolingana ili kujiandaa kwa ajili ya uzalishaji zaidi wa kingamwili, kukuza utafiti wa msingi wa kisayansi, kutengeneza zana za uchunguzi wa kimatibabu, na kuwezesha ugunduzi na maendeleo ya dawa mpya. Ngamia, alpaca, Liama, na ngamia wengine katika Camelidae wanaweza kutoa maktaba za nanobody (kingamwili cha kikoa kimoja) kupitia ukusanyaji wa damu ya kinga na uchimbaji wa PBMC. Sungura na wanyama wengine wanaweza kuchanjwa na kingamwili zinaweza kutolewa kutoka miilini mwao. Baada ya utakaso, zinaweza kutumika kutengeneza kingamwili za polykloni. Panya, panya, n.k. zinaweza kutumika kutengeneza kingamwili za monokloni kwa kuchanganya seli B zilizotolewa kingamwili na seli za myeloma. Kabla ya chanjo, umakini unapaswa kulipwa kwa kanuni za 3R (ubadilishaji, upunguzaji, uboreshaji), ambazo zinaweza kupunguza kwa kiasi kikubwa idadi ya wanyama wanaotumika kwa kiwango cha chini kinachohitajika, kuboresha taratibu za majaribio, na kupunguza mateso ya wanyama. Ubunifu sahihi wa majaribio, uteuzi wa kingamwili zinazofaa, na taratibu kali za uthibitishaji lazima pia zifuatwe.

Uainishaji wa kinga mwilini - uzalishaji wa nanobody

Aina za Kinga Mwilini	Mfano	Maandalizi ya Kinga Mwilini	Vidokezo
Kinga za Protini	Vimeng'enya, protini, sumu ya bakteria, na vitu vingine	Chagua mifumo tofauti ya usemi wa protini: E. coli, chachu, seli za wadudu, seli za mamalia, na mfumo usio na seli	Zingatia mambo kama vile halijoto, wakati, pH, na miili ya ujumuishaji inayoathiri usemi wa protini
Kinga za Asidi ya Nyuklia	DNA, RNA	Kinga ya DNA: Hutengeneza DNA ya plasmidi, hutengeneza vekta zinazofaa za usemi kwa jeni lengwa, seli za utamaduni ili kukuza DNA ya plasmidi, na kutoa DNA ya plasmidi yenye usafi wa hali ya juu. RNA Immunogen: Haja ya Kuongeza Muundo wa Kofia na Mkia wa PolyA ili Kuzuia Uharibifu	Wakati wa kuandaa immunojeni za DNA, umakini unapaswa kulipwa kwa seli mwenyeji zinazofaa, na wakati wa kuandaa immunojeni za RNA, umakini unapaswa kulipwa ili kuzuia uharibifu wa RNA.
Kinga za Virusi	Chanjo ya virusi vyote isiyofanya kazi, chanjo ya kitengo kidogo, chanjo ya virusi (adenovirus, lentivirus, n.k.), chanjo ya mRAN.	Wakati wa kuandaa chanjo nzima ya virusi isiyoamilishwa, virusi huamilishwa kwanza ili kuongeza usalama. Upimaji wa sumu hutumika kubaini kama kuamilishwa kumekamilika. Chanjo za kitengo kidogo zinahitaji protini za uso wa virusi kama antijeni na zinahitaji kuzingatia ufanisi wa kinga.	Viambatanishi vinahitaji kuongezwa ili kutoa athari za kinga, umakini unapaswa kulipwa kwa virusi vinavyohitaji kuamilishwa, viwango sahihi vya virusi vinahitajika ili kuhakikisha athari za kinga, na usalama wa mchakato wa maandalizi unapaswa kudhibitiwa vikali.

Mchakato au Muda wa Chanjo ya Wanyama

Uchaguzi wa Wanyama na Maandalizi ya Antijeni

Uchaguzi wa wanyama: Chagua alpaca wenye umri unaofaa na mwili wenye afya njema kutoka kwa makundi yenye afya njema, na fanya uchunguzi wa damu na uchunguzi wa magonjwa ili kuhakikisha kuwa hakuna magonjwa ya kuambukiza au matatizo mengine ya kiafya.

Maandalizi ya kinga mwilini: Kinga mwilini ni muhimu katika kuchochea mwitikio wa kinga mwilini na zinahitaji uteuzi wa protini, peptidi, au vitu vingine vinavyofaa kulingana na mahitaji ya kingamwili lengwa.

Alpaca inaweza kuchanjwa kwa antijeni 1-3 kwa wakati mmoja, ikiwa na jumla ya antijeni ya 1-2mg kwa kila chanjo na kiasi cha chini ya 2mL. Kabla ya chanjo, antijeni na kiambatisho huchanganywa kwa uwiano wa 1:1 ili kuunda mchanganyiko sare, ambao huhifadhiwa kwa 4 ℃.

Alpaca ya kinga

Andika nambari tupu ya sikio la alpaca na uanze jaribio la chanjo. Choma sindano kwenye nodi za limfu karibu na shingo ya alpaca pande zote mbili, ukiwa na ncha 2 kila upande na takriban 0.4mL ya antijeni iliyochanganywa iliyochomwa katika kila sehemu. Baada ya chanjo, angalia kwa nusu saa ili kuthibitisha kwamba alpaca haina dalili za usumbufu. Chanjo inapaswa kutolewa kila baada ya wiki 2, na angalau chanjo 4.

Ukusanyaji wa damu

Baada ya chanjo 4 kwa siku 5-7, kusanya mililita 50 za damu kutoka kwenye mshipa wa shingo wa alpaca.

Mgawanyiko wa seramu

Sampuli za damu hukusanywa kwa ajili ya tathmini ya kinga kabla ya kila chanjo ya antijeni, huku 5mL ya damu ikichukuliwa kila wakati; Siku hiyo hiyo, damu iliwekwa kwenye centrifuge kwa 400 xg kwa dakika 30 kwa kutumia centrifuge ya 25 ℃ iliyopozwa kabla. Safu ya juu ya seramu ilitenganishwa na kuhifadhiwa kwa ajili ya upimaji wa titer ya kingamwili unaofuata.

Limfositi tofauti

Kwanza ongeza 15mL ya mchanganyiko wa seli, kisha ongeza polepole 15mL ya damu kwenye mrija wa sentrifuge wa 50mL. Kuwa mwangalifu na polepole unapoongeza damu ili kuzuia mchanganyiko wa damu na mchanganyiko wa utengano. Sentrifuge iliyopozwa kabla ya 25 ℃, sentrifuge kwa 400 xg kwa dakika 30, na uhifadhi seramu ya juu kwenye mrija mpya wa sentrifuge kwa -80 ℃; Tumia bomba la kufyonza seli za kinga zenye umbo la pamba la kati kwenye mrija mpya wa sentrifuge wa 50ml. Ongeza bafa ya PBS ya 10mL kwenye joto la kawaida kwenye kila mrija, sentrifuge kwa 25 ℃ na 400 xg kwa dakika 20. Ondoa supernatant, ongeza 5mL ya bafa ya PBS kwenye joto la kawaida kwenye kila mrija, changanya vizuri kwa upole, hesabu idadi ya seli kwa kutumia hemocytometer, na kisha sentrifuge kwa 25 ℃ na 400 xg kwa dakika 20. Ondoa supernatant na ufute limfositi zilizopatikana na RNAiso Plus kulingana na idadi ya seli ili kupata lysate ya seli ya 10 ^ 7/mL, ambayo huhifadhiwa kwa -80 ℃.

Mchoro 1: Uwakilishi wa Kimfumo wa Mikakati Tofauti ya Ugunduzi wa Kinga Mwili na Hatua za Majaribio Zinazohusika. (Chanzo cha Mchoro: Laustsen, Andreas H. na wenzake.)

Wateja hutoa udhibiti mkali wa ubora wa kinga mwilini

Aina za Kinga Mwilini	Mahitaji	Mbinu ya Kudhibiti Ubora
Sampuli za Peptidi/Molekuli Ndogo	Hali za kuyeyuka (hasa kulingana na kama zitazima faji), muundo wa molekuli/mfuatano wa peptidi, ripoti ya usanisi (HPLC/MS/HNMR)	Ugunduzi wa HPLC/MS
Sampuli za Protini	SDS-PAGE/WB, hali ya uundaji upya, bafa, taarifa za lebo, jumla ya kiasi (20-50g), mkusanyiko, usafi, n.k.	SDS-PAGE/WB
Sampuli za Seli	Aina ya seli (seli kuu/seli zilizohaririwa na jeni), umbo la seli (zilizoyeyushwa/zilizogandishwa), aina ya ukuaji (zilizoshikamana/zilizosimamishwa), mahitaji ya njia ya ukuzaji, idadi ya seli zilizotolewa, idadi ya seli zilizotolewa, seli zilizohaririwa na jeni ili kuhakikisha usemi thabiti wa malengo ya uchunguzi (kingamwili msingi inayolingana na mteja), seli zilizoyeyushwa zilizogandishwa ili kubaini kiwango cha kupona.	Kulenga hasa seli zilizohaririwa na jeni, kwa kutumia kingamwili za msingi zinazotolewa na mteja kwa ajili ya utambuzi wa ELISA wa usemi lengwa (kampuni yetu hutoa kingamwili za sekondari za HRP), ugunduzi wa saitometri ya mtiririko (kampuni yetu inaweza kutoa kingamwili za sekondari za fluorescent).

Matumizi ya kinga ya wanyama ni yapi?

+

Kingamwili za polyclonal zinaweza kuzalishwa kwa chanjo ya wanyama, kingamwili za monoclonal zinaweza kuzalishwa kwa kuchanganya seli B na seli za myeloma, na PBMC zinaweza kutolewa kutoka kwa vyanzo vya ngamia (alpaca, ngamia, alpaca, nk) ili kutoa aina mbalimbali za vipande vya kingamwili kama vile nanobodies, vipande vya Fab, vipande vya kingamwili vya scFv, nk.
Ni tahadhari gani za kinga ya wanyama?

+

Ili kutoa kingamwili ndogo kwa wanyama wanaotokana na ngamia, chanjo 5-6 zinahitajika. Sampuli za damu zinapaswa kukusanywa kama kipimo kabla ya chanjo, kwa muda wa wiki 2 kati ya kila chanjo. Baada ya chanjo ya nne, damu chanya na damu hasi isiyochanjwa inapaswa kukusanywa kwa ajili ya ELISA ili kubaini kiwango. Ikiwa kiwango cha chini ni 10 ^ 6, idadi ya chanjo inapaswa kuongezwa hadi kiwango cha chini kifikie kiwango kinachofaa. Kwa chanjo zingine za wanyama kama vile chanjo ya sungura (kiwango bora au cha kawaida cha antijeni ya protini kwa ajili ya chanjo ya sungura ni 50-1000g), chanjo ya panya (kiwango bora au cha kawaida cha antijeni ya protini kwa ajili ya chanjo ya panya ni 5-50g, ambayo inahitaji seli 10 ^ 6 ikiwa ni seli, na 10-50g kwa asidi ya kiini au wanga), chanjo ya mbuzi (kiwango bora au cha kawaida cha antijeni ya protini kwa ajili ya chanjo ya mbuzi ni 250-5000g), n.k., tahadhari inapaswa kulipwa kwa kipimo, usalama, na ufanisi wa kinga mwilini.
Jinsi ya kuchagua wanyama wenye kinga?

+

Kulingana na aina ya kingamwili inayohitajika na mteja, ikiwa unahitaji kutoa nanobodi au vipande vingine vya kingamwili, unaweza kuchagua wanyama wanaotokana na ngamia (ngamia, alpacas, alpacas) kwa ajili ya chanjo. Ikiwa unahitaji kutoa kingamwili za monokloni au polykloni, unahitaji kuchagua spishi inayolingana kulingana na kiasi cha seramu, antijeni, na chanzo cha antijeni. Kiasi cha juu zaidi cha seramu kwa sungura ni 500ml, ambayo inahitaji kiasi kidogo cha antijeni na ndio chaguo kuu la kutengeneza kingamwili za polykloni. Kiasi cha juu zaidi cha seramu kwa panya ni 2ml, na kiwango cha juu zaidi cha seramu kwa panya ni 20ml, ambayo kwa kawaida huwa chaguo bora zaidi kwa kingamwili za monokloni. Kingamwili zinazozalishwa na mbuzi zina mshikamano mkubwa, na Alpha Lifetech inaweza kubinafsisha mpango wa kipekee wa chanjo kwako kulingana na mahitaji yako.
Je, antijeni zinahitaji kutumika pamoja na viambatisho? Jinsi ya kuchagua?

+

Kuna aina mbili za viambatisho: vyenye mafuta na vyenye maji. Matumizi yanayofaa ya viambatisho ni muhimu kwa kusababisha mwitikio mkubwa wa kingamwili kwa antijeni mumunyifu. Kutolewa kwa viambatisho endelevu kunamaanisha kuwa dozi chache za antijeni zinaweza kutumika, na mwitikio wa kingamwili hudumu kwa muda mrefu zaidi. Sindano ya kwanza inapaswa kutumika pamoja na kiambatisho. Kwa ujumla inashauriwa kutumia kiambatisho cha Freund wakati kiasi cha kingamwili ni kidogo.
Tahadhari za chanjo ya alpaca?

+

(1) Uchaguzi wa alpaca na antijeni ya kinga ndio ufunguo wa chanjo iliyofanikiwa. Kuchagua ngamia aliye na uwiano mzuri haipendekezwi. Usafi na umbo sahihi la antijeni za kinga ni muhimu kwa ajili ya kuchunguza kingamwili zinazofaa kwa matumizi ya baadaye baada ya chanjo ya alpaca. Usafi wa antijeni za protini kwa ujumla si chini ya 90%.

(2) Mgawanyiko wa limfositi: Mgawanyiko wa seli kwa wakati unaofaa unaweza kuzuia kutokwa na damu baada ya ukusanyaji wa damu ili kufikia athari bora ya utengano.

(3) Mzunguko wa kinga unaweza kuathiri mwitikio wa kinga: muda wa kinga wa wiki 1-2 huruhusu alpacas kuwa na mwitikio mzuri wa kinga kwa antijeni nyingi.

msaidizi aliyetengenezwa kwa kujitegemea

Kiambatisho chetu cha kipekee cha fomula kimeboreshwa kwa ajili ya mfumo wa kinga wa alpaca, na kutoa nguvu na umaalum wa hali ya juu kuliko viambatisho vya kitamaduni.

Utoaji wa chanjo
kiwango

Tunaahidi kukamilisha chanjo ndani ya muda uliowekwa, kutoa seramu yenye kiwango cha juu cha titer, na kurekodi kila hatua kupitia ripoti za kina.

Udhibiti wa ubora wa mradi

Kila mradi hupitia michakato madhubuti ya udhibiti wa ubora ili kuhakikisha uwasilishaji wa kingamwili zinazokidhi viwango vya juu kwa wateja.

waziwaziAlpacaMandharinyuma

Tuna idadi ya alpaca yenye afya njema ambayo hutoa usaidizi kwa programu mbalimbali za chanjo.

Ikiwa una maswali yoyote, tafadhali jisikie huru kuwasiliana nasi wakati wowote.

Leave Your Message

Huduma Iliyoangaziwa

0102