Utangulizi wa Huduma ya Onyesho la Phaji

Onyesho la faji, kama mbinu ya molekuli inayotegemea urekebishaji wa kijenetiki wa DNA ya faji, imekuwa kifaa chenye nguvu ya molekuli cha kutoa probes za molekuli dhidi ya malengo maalum kwa kuwasilisha vipande hivi kwenye uso wa faji na hivyo kuchagua vipande vya peptidi/kingamwili vyenye sifa maalum za kumfunga kutoka kwa idadi kubwa ya lahaja (maktaba).

Alpha Lifetech ina uzoefu wa miaka kumi katika ukuzaji wa kingamwili za maonyesho ya phaji na inaweza kutoa huduma ya kitaalamu ya ujenzi wa maktaba ya kingamwili na uchunguzi kwa wateja wetu. Kulingana na mahitaji ya wateja, tunaweza kutoa aina tofauti za maktaba za kingamwili, kama vile maktaba za kingamwili, maktaba asilia, maktaba za sintetiki na maktaba za nusu-synthetic. Teknolojia ya maktaba ya maonyesho ya phaji, ambayo huunganisha jeni za kingamwili na jeni za protini za koti la phaji kama vile M13, ndiyo teknolojia ya kawaida ya utayarishaji wa kingamwili iliyounganishwa na hutumika sana katika ukuzaji wa kingamwili maalum sana.

Alpha Lifetech itachanja alpaca, llama, alpaca, na papa, n.k., ili ufanisi wao ufikie 10^5. Tutatuma ripoti ya kipimo cha ufanisi kwa mteja ili kuhakikisha uhalali na uhalisia wa data. Maktaba za asili zina faida za sumu kidogo na kinga kidogo. Alpha Lifetech ina idadi kubwa ya maktaba za asili za kingamwili zilizotengenezwa awali, ambazo zinaweza kutumika moja kwa moja kwa ajili ya uchunguzi wa kingamwili bila chanjo ya wanyama, hivyo kufupisha muda wa mradi, kuendeleza maendeleo ya jaribio la mteja, na kuhakikisha uadilifu wa utendaji kazi wa kingamwili.

Mchoro 1: Kanuni ya kuonyesha kwa awamu

Mfumo Wetu wa Onyesho la Phaji

Taarifa kuu ya mfumo wa kuonyesha phaji wa M13/T4/T7 imeonyeshwa katika Jedwali 1.

Jedwali 1 Magari tofauti ya kuonyesha faji na sifa zao
	M13	T4	T7
Ukubwa wa Jenomu	6407 bp	168895 bp	39937 bp
Onyesha Protini	pVI, pIII na pVIII	SOC na HOC	gp10B
Ukubwa wa Onyesho	>110 kDa ni pIII
Ukubwa wa Onyesho
Uzito wa Onyesho
Uzito wa Onyesho
Mzunguko wa Maisha	Lisojeni	Lytiki	Lytiki

Alpha Lfetech Inaweza Kutoa

Onyesho la Faji huunganisha jenotipu na fenotipu kuwa moja, ikichanganya uteuzi na ukuzaji na uwezo mkubwa wa uchunguzi. Alpha Lifetech inaweza kutoa huduma mbalimbali kwa ajili ya ukuzaji wa kingamwili ya onyesho la faji.
Huduma kuu ni pamoja na: Jukwaa la maktaba ya kingamwili za VHH, jukwaa la maktaba ya kingamwili za scFv, jukwaa la maktaba ya kingamwili za Fab, jukwaa la ujenzi wa maktaba ya phage, jukwaa la uchunguzi wa maktaba ya phage na huduma ya ubinadamu wa kingamwili na huduma zingine.

Mchoro 2: Mchakato wa huduma ya ukuzaji wa onyesho la awamu

Mchakato wa Ukuzaji wa Kingamwili ya Onyesho la Phaji

Tunaweza kuwachanja wanyama kwa protini zinazoonyeshwa katika maabara yetu au zinazotolewa na wateja wetu, ikiwa ni pamoja na protini mbalimbali za makromolekuli, peptidi na protini za utando. Kupitia upimaji wa ufanisi wa ELISA, watafiti wetu walifanya utengano wa PBMC na uchimbaji wa RNA kutoka kwa damu ya alpacas na matokeo bora ya chanjo. Kwa unukuzi wa kinyume na ukuzaji wa jeni, tuliunda jeni kwenye vekta za pMESC, pComb3XSS au pCANTAB 5E phage. Kwa ubadilishanaji wa elektroni wa seli zenye uwezo wa TG1 E. coli, maktaba za kingamwili za phage zenye uwezo wa maktaba zaidi ya 10^9 zinaweza kupatikana. Maktaba za kingamwili zenye uwezo mkubwa wa maktaba zina utofauti mzuri na husaidia kupata kingamwili zenye mshikamano. Ili kuhakikisha ubora wa maktaba ya kingamwili, tutaainisha uwezo wa maktaba na kiwango cha kuingiza maktaba. Hatimaye tunapanga maktaba ili kuwapa wateja wetu mfuatano unaohitajika wa 30-50. Kisha, tunafanya uchunguzi wa maktaba ya maonyesho ya phaji, Kwanza, antijeni huzuiwa kuhama kwenye vijisehemu vidogo vya polipropilini, na kupitia raundi 3-5 za uchunguzi, kingamwili za phaji zenye uwezo mdogo wa kufunga huondolewa, na nakala maalum zinazofungamana na antijeni huhifadhiwa. Kwa onyesho la phaji, mbinu ya ELISA hutumika kuishia na nakala chanya, huku kwa onyesho la chachu, mbinu ya FACS hutumika kufanya seli kuonyesha vipande vya kingamwili vinavyoungana tena kwa kutumia antijeni zilizo na lebo. Kupitia uchunguzi, tunaandaa kingamwili zenye unyeti wa hali ya juu, umaalum na mshikamano wa hali ya juu.

Mchoro 3 Mchakato wa usanisi wa kingamwili ya onyesho la feki

FAIDA ZA Huduma
Faida za HUDUMA

Alpha Lifetech imejitolea sana katika teknolojia ya kuonyesha faji, na inaweza kuwapa wateja huduma pana na bora zaidi za faji.

Kipindi cha muda na ufanisi wa hali ya juu

Kampuni yetu inaweza kutafuta kingamwili zinazoridhisha kwa muda mfupi; tunaweza kufanya majaribio mbalimbali ya uchunguzi wa kingamwili kulingana na mahitaji ya wateja.

Ubora wa juu wa bidhaa

Kampuni yetu huwasaidia wateja kuandaa kingamwili zenye umaalum na uthabiti wa hali ya juu, na kuongeza matokeo ya utafiti wa kisayansi.

Toa chaguo mbalimbali

Kampuni yetu inaweza kujenga maktaba za kingamwili za spishi nyingi (binadamu, panya, sungura, alpaca, n.k.) na inaweza kujenga aina mbalimbali za maktaba za kingamwili (scfv, Fab, VHH, n.k.).

Uwezo Mkubwa

Maktaba yetu ya kingamwili ina uwezo mkubwa wa zaidi ya kingamwili 10^9

Maswali Yanayoulizwa Mara kwa Mara - Matatizo ya Jumla ya Onyesho la Faji

Maswali ya kuonyesha faji ◢

Swali.
Teknolojia ya kuonyesha faji ni nini?

A.
Teknolojia ya kuonyesha faji ni kuingiza jeni lengwa la kigeni katika nafasi maalum ya protini ya faji kapidi, na kuonyesha jeni la kigeni kwenye uso wa faji bila kuathiri utendaji kazi wa kawaida wa faji. Baada ya raundi kadhaa za uchunguzi, protini lengwa yenye umaalum mkubwa na shughuli nyingi za kibiolojia hatimaye ilipatikana.
Swali.
Je, ni faida gani za teknolojia ya kuonyesha faji?

A.
Maktaba za kingamwili zenye uwezo mkubwa zinaweza kuzalishwa kwa kutumia teknolojia hii. Mzunguko wa uchunguzi ni mfupi, mchakato wa uendeshaji ni rahisi, na aina mbalimbali za matumizi ni pana, na kuruhusu utambuzi wa mfuatano bora wa peptidi au protini zinazolengwa. Katika matumizi yanayohusiana na virusi, watafiti wanaweza kugundua kingamwili zinazofungamana na epitopu muhimu za virusi kwa kuchunguza maktaba kubwa za kingamwili. Mchakato huu unaweza kuzuia kuingia, kuzaliana, au mifumo ya kuepuka kinga ya virusi, na hivyo kuanzisha msingi wa matibabu ya magonjwa.
Swali.
Kuna tofauti gani kati ya teknolojia ya mseto na teknolojia ya phage?

A.
Teknolojia ya kuonyesha faji inatumika sana kuliko teknolojia ya mseto, ambayo ina kikomo cha kutoa kiasi kidogo cha kingamwili dhidi ya kingamwili maalum. Kwa upande mwingine, teknolojia ya kuonyesha faji inaweza kutoa maktaba nzima ya kingamwili inayotokana na spishi mbalimbali za kingamwili.
Swali.
Matumizi ya teknolojia ya kuonyesha phage ni yapi?

A.
Teknolojia ya kuonyesha faji ina matumizi mbalimbali, ikiwa ni pamoja na kuchunguza vipokezi vya vijidudu vinavyosababisha magonjwa, kusoma mwingiliano wa protini, kufuatilia upitishaji wa ishara kati ya seli, kugundua magonjwa ya wanyama, na kutengeneza chanjo, miongoni mwa nyanja zingine.
Swali.
Matarajio ya teknolojia ya kuonyesha faji?

A.
Teknolojia ya kuonyesha faji inatoa faida nyingi na inaweza kutumika katika nyanja mbalimbali. Hata hivyo, changamoto kuu katika kutengeneza kingamwili zinazounganishwa tena kwa kutumia mbinu ya kuonyesha faji ni ugumu na gharama inayohusiana na mchakato huo. Mbinu hii inahitaji ujumuishaji wa mbinu za biolojia ya molekuli, ikiwa ni pamoja na mabadiliko, uundaji wa kloni, na usemi, pamoja na uchambuzi wa kingamwili, kibiokemikali, na kibiofizikia ili kutambua na kuainisha kingamwili zinazohitajika.

Maswali Yanayohusiana na Antijeni ◢

Swali.
Ni njia gani za uwasilishaji wa antijeni?

A.
Uwasilishaji wa antijeni ni kiungo muhimu sana. Mbinu za uwasilishaji wa antijeni hujumuisha hasa uwasilishaji wa antijeni iliyofunikwa moja kwa moja, uwasilishaji wa antijeni iliyofunikwa moja kwa moja, uwasilishaji wa antijeni kupitia uchunguzi wa seli nzima, uwasilishaji wa antijeni kupitia liposome, diski za nano-phospholipid na VLP.
Swali.
Kuna tofauti gani kati ya aina mbalimbali za uwasilishaji wa antijeni?

A.
Mbinu ya mipako ya moja kwa moja ni rahisi kiasi, lakini umbo la antijeni ni rahisi kubadilisha, na operesheni ya mipako isiyo ya moja kwa moja ni ngumu, lakini inaweza kudumisha umbo la antijeni na kuboresha ufanisi wa uwasilishaji. Uchunguzi wa seli unaweza kuiga tukio halisi mwilini, lakini kuna tatizo la kufungamana bila mahususi. Diski ya Nano-phospholipid ina ukubwa mdogo, ufanisi mkubwa wa utoaji na uthabiti mzuri; VLPs huunganishwa na antijeni au kufungwa na antijeni, ambayo ina kinga ya juu na usalama mzuri, na inaweza kusababisha mwitikio mkubwa wa kinga.
Swali.
Je, athari ya mkusanyiko wa antijeni kwenye matokeo ya uchunguzi wa teknolojia ya kuonyesha faji ni ipi?

A.
Ikiwa mkusanyiko ni mdogo sana, uwezekano wa kufungamana na phaji utapungua, na kusababisha ufanisi mdogo wa uchunguzi. Kinyume chake, mkusanyiko mkubwa kupita kiasi unaweza kuongeza uwezekano wa kufungamana bila mahususi, kuinua ishara ya usuli, na kuzuia utambuzi wa nakala chanya.
Swali.
Tunawezaje kuhakikisha kwamba antijeni inadumisha umbo lake la asili wakati wa mchakato wa uchunguzi?

A.
Njia nyepesi ya kurekebisha inaweza kutumika ili kuepuka halijoto ya juu, asidi kali na alkali. Mbinu ya mipako isiyo ya moja kwa moja na mfumo wa biotin-streptavidin zilitumika kupunguza uharibifu wa muundo wa antijeni. Ikiwa antijeni ni protini ya utando, inaweza kuonyeshwa kwenye uso wa seli zisizo na uharibifu au kutumika kuiga mazingira ya utando, kama vile nano-diski, ili kudumisha umbo lake la asili la protini ya utando.
Swali.
Jinsi ya kuthibitisha upekee wa kumfunga kingamwili zilizochunguzwa na teknolojia ya kuonyesha phage kwa antijeni?

A.
Mbali na majaribio ya kawaida kama vile ELISA, Western Blotting (WB), na Immunofluorescence (IF), mbinu za kugundua Surface Plasmon Resonance (SPR) na Bio-Layer Interferometry (BLI) zinaweza kutumika kufuatilia michakato ya kufunga na kutenganisha kingamwili na antijeni kwa wakati halisi, kuruhusu uamuzi wa vigezo vya mshikamano na kinetiki.

Maswali Yanayohusiana na Kinga ◢

Swali.
Je, ni majibu gani ya jumla ya kinga ya wanyama katika teknolojia ya kuonyesha faji?

A.
Onyesho la feji linaweza kutumika kutengeneza kingamwili za monokloni zenye mshikamano mkubwa kwa aina mbalimbali za spishi zinazozalisha kingamwili, ikiwa ni pamoja na lakini sio tu wanadamu, panya, panya, sungura, kuku, ngamia, alpaca, ng'ombe, mbwa, kondoo, nyani, na papa.
Swali.
Ni sifa na hali gani zinazotumika za maktaba za kingamwili zinazotokana na spishi mbalimbali za wanyama katika teknolojia ya kuonyesha faji?

A.
Teknolojia ya ujenzi wa maktaba za kingamwili za panya imethibitishwa vizuri, ina gharama nafuu, na ina muda mfupi wa majaribio, na kuifanya ifae kwa uchunguzi wa awali wa kingamwili na utafiti wa kimsingi. Kingamwili za sungura zinaonyesha mshikamano na umaalum mkubwa, zikiwa na kiwango kikubwa cha utambuzi wa epitopu ikilinganishwa na kingamwili za panya. Kingamwili za binadamu zinaweza kupatikana moja kwa moja kutoka kwa maktaba za kingamwili za binadamu, na hivyo kuepuka athari za kinga zinazoweza kutokea wakati kingamwili za heterologous zinapotolewa kwa mwili wa binadamu. Mbinu hii ina thamani kubwa katika utafiti na maendeleo ya dawa, hasa katika uundaji wa kingamwili za matibabu.
Swali.
Je, kinga ya jumla ya wanyama inayotumika katika teknolojia ya kuonyesha faji ni ipi?

A.
Kingamwili za wanyama kwa ujumla zimegawanywa katika protini antijeni, antijeni ya polipeptidi, antijeni ya asidi ya kiini na antijeni inayohusiana na vimelea, ambayo kati ya hayo antijeni inayohusiana na vimelea inajumuisha antijeni ya virusi (chembe kamili ya virusi, protini ya virusi, protini isiyo ya kimuundo ya virusi, nk), antijeni ya bakteria (dondoo kamili ya bakteria, sehemu ya ukuta wa seli, protini iliyotolewa, sumu, nk) na antijeni ya vimelea.
Swali.
Tunawezaje kushughulikia suala la uvumilivu wa kinga kwa wanyama wakati wa mwitikio wa kinga?

A.
Rekebisha kinga mwilini kwa kubadilisha antijeni za kinga na protini zinazounganisha na kubadilisha chembe za virusi vinavyozimia moto na protini za kimuundo za virusi. Rekebisha muundo wa majaribio na urekebishe kipimo cha kinga mwilini.
Swali.
Je, uwezo wa kinga mwilini wa immunojeni unawezaje kuboreshwa katika teknolojia ya kuonyesha faji?

A.
Uzalishaji wa kinga mwilini unaweza kuimarishwa kwa kuunganisha antijeni na protini zinazobeba, kama vile albamini ya seramu ya ng'ombe. Zaidi ya hayo, viambato vya kinga mwilini, ikiwa ni pamoja na kiambato cha Freund na kiambato cha alumini, vinaweza kutumika kuongeza muda wa kukaa mwilini na kuchochea uanzishaji na kuenea kwa seli za kinga mwilini, na hivyo kuboresha uzalishaji wa kinga mwilini.

Maswali ya Ujenzi wa Maktaba ◢

Swali.
Maktaba ya kingamwili ya phage ni nini?

A.
Maktaba ya kingamwili ya phaji ni mkusanyiko wa kingamwili mbalimbali za phaji zinazoundwa kwa kukusanya seti kamili ya jeni za eneo linalobadilika kutoka kwa kingamwili hadi kwenye vekta za phaji na kuzionyesha kwenye nyuso za phaji. Mchakato huu husababisha uundaji wa maktaba ya kingamwili ya phaji.
Swali.
Mchakato wa kujenga maktaba ya kingamwili ya phage

A.
Mchakato wa jumla wa uonyeshaji wa faji unahusisha hatua kadhaa muhimu: kutoa seli za mononuklea za damu za pembeni (PBMC) kutoka kwa wanyama waliochanjwa, kutenganisha RNA nzima na kuibadilisha kuwa DNA inayosaidiana (cDNA), kukuza jeni lengwa kwa kutumia teknolojia ya mmenyuko wa mnyororo wa polimerasi (PCR), kuiunganisha jeni lengwa kuwa vekta ya faji, na kubadilisha vekta kuwa seli mwenyeji kwa ajili ya kujieleza. Mchakato huu unasababisha ujenzi wa maktaba ya uonyeshaji wa faji, ambayo inaweza kutambua haraka kingamwili zenye uhusiano mkubwa. Baadaye, maktaba hii inaweza kutumika kama rasilimali muhimu kwa ajili ya maendeleo ya chanjo, dawa za matibabu, na vitendanishi vya uchunguzi.
Swali.
Ni mambo gani muhimu ya kujenga maktaba ya ubora wa juu?

A.

Hakikisha kwamba jumla ya PBMC inatosha. Hakikisha ubora wa RNA bila uharibifu.

Ili kuhakikisha jumla ya vibadilishaji, uwezo wa maktaba kwa ujumla unahitajika kuwa mara 10 hadi 100 ya utofauti wa kinadharia.
Swali.
Je, ni uainishaji gani wa maktaba ya kingamwili ya phage?

A.
Kulingana na chanzo cha maktaba ya kingamwili, maktaba za kingamwili za faji zinaweza kugawanywa katika maktaba za kingamwili za faji za kingamwili na maktaba za kingamwili za faji za asili. Tofauti kuu kati ya aina hizi mbili iko katika kama wanyama wamechanjwa. Zaidi ya hayo, maktaba za kingamwili za asili zinaweza kuzalishwa kupitia usanisi wa nusu au usanisi.
Swali.
Mtu anawezaje kutathmini ubora wa maktaba ya kingamwili ya phage?

A.
Kuna viashiria viwili vya msingi vya kutathmini ubora wa maktaba ya kingamwili: uwezo wa kuhifadhi na utofauti. Uwezo mkubwa wa kuhifadhi, pamoja na utofauti mkubwa, huhakikisha uchunguzi mzuri wa kingamwili zenye mshikamano na umaalum wa hali ya juu.

Maswali ya Uchambuzi wa Maktaba ◢

Swali.
Mchakato wa kuchunguza maktaba ya kingamwili ya phage ni upi?

A.
Katika mchakato wa uundaji wa kibiolojia, maktaba ya onyesho huwekwa kwenye shabaha zisizobadilika na kisha huoshwa kwa kina ili kuondoa faji zisizo tendaji. Viunganishi kwa kawaida huondolewa kwa kutumia mchanganyiko wa asidi au chumvi nyingi na baadaye huongezwa katika seli zinazofaa kwa ajili ya uboreshaji. Baada ya raundi 3 hadi 5 za uchunguzi, kingamwili zenye mshikamano mkubwa hupatikana.
Swali.
Ni njia gani zinazotumika kwa ajili ya kuchunguza maktaba za kingamwili za phage?

A.
Mbinu za uchunguzi wa faji kimsingi zinajumuisha upanuaji wa awamu imara, uchunguzi wa awamu ya kioevu, na uchunguzi unaotegemea seli. Uteuzi wa njia sahihi ya uchunguzi unapaswa kuzingatia sifa za molekuli lengwa, malengo ya mchakato wa uchunguzi, na mazingira ya maabara.
Swali.
Je, ni vipimo gani chanya na hasi vya phaji?

A.
Uchunguzi chanya ni njia ya msingi zaidi ya kuchunguza kingamwili za faji zinazofungamana na protini lengwa. Uchunguzi hasi hutumika kuondoa kingamwili zisizo maalum. Wakati wa mchakato wa uchunguzi wa kingamwili za faji, kingamwili zisizo maalum zinaweza kutambuliwa kutokana na kuingiliwa kutoka kwa lebo ya antijeni lengwa, vifaa, au antijeni zingine zenye kufanana kwa kimuundo na antijeni lengwa. Katika hali kama hizo, uchunguzi hasi unaweza kuongeza ufanisi wa mchakato wa uchunguzi.
Swali.
Jinsi ya kuepuka uchunguzi wa kingamwili zisizo maalum?

A.

Antijeni zilizo na alama tofauti zinaweza kupewa kipaumbele kwa ajili ya uchunguzi wa awali, au uchunguzi hasi unaweza kutumika kupunguza idadi ya kingamwili zisizo maalum.

Unaweza kuchagua kubadilisha umajimaji unaofaa wa kuziba au kutumia majimaji tofauti ya kuziba kwa njia mbadala ili kuzuia hali hii. Ikiwa kingamwili inayotambua mstari wa seli ya usuli (CHO au HEK293) imechunguzwa, unaweza kubadilisha mistari tofauti ya seli ya usuli kwa madhumuni ya uchunguzi au uchunguzi hasi.
Swali.
Mtu anawezaje kuthibitisha na kuchambua kingamwili zilizopatikana?

A.
Mbinu za uthibitishaji wa kingamwili kwa kawaida hujumuisha ELISA, Western Blotting (WB), flow cytometry, immunoprecipitation (IP), immunofluorescence (IF), immunohistochemistry, na mbinu zingine mbalimbali za majaribio. Alpha Lifetech ina uzoefu mkubwa katika kugundua kingamwili na ina timu ya kitaalamu ya majaribio, kuhakikisha ufanisi wa kingamwili katika majaribio yanayofuata.

Ikiwa una maswali yoyote, tafadhali jisikie huru kuwasiliana nasi wakati wowote.

Leave Your Message

Huduma Iliyoangaziwa

Jukwaa la Ugunduzi wa Kinga Mwili