Huduma ya Uchambuzi wa Tabia za Aptamer

Alpha Lifetech imekuwa ikitoa huduma zinazohusiana na aptamer kwa miaka mingi, na kwa sasa inaweza kutoa mipango kamili ya uundaji wa aptamer kama vile usanisi wa aptamer, uchunguzi wa SELEX, mpangilio wa matokeo ya juu, na uboreshaji na uainishaji wa aptamer. Kulingana na faida za njia ya SELEX ya uchunguzi wa aptamers, Alpha Lifetech imepanua mbinu zaidi za uchunguzi wa aptamers.

Utangulizi wa Uchambuzi wa Tabia za Aptamer

Uthibitishaji wa uhusiano

Uwiano ulioboreshwa wa aptamer ulithibitishwa kwa mbinu husika za jaribio la kufunga aptamer. Mifano ni pamoja na Isothermal Titration Calorimetry (ITC), Flow Cytometry (FCM), na Surface Plasmon Resonance (SPR), Microfluidics, n.k. Uwiano wa aptamer kwa kawaida huonyeshwa na kigezo cha kutenganisha (KD), kiasi halisi kinachotumika kupima kiwango cha kutenganisha molekuli katika mmenyuko unaoweza kurekebishwa. Kadiri thamani ya KD inavyokuwa ndogo, ndivyo tata inavyokuwa imara zaidi, yaani, uwiano unavyokuwa na nguvu zaidi; Kinyume chake, kadiri thamani ya KD inavyokuwa kubwa, ndivyo tata inavyokuwa isiyo imara zaidi na ndivyo uwiano unavyokuwa dhaifu. Hatua hii ndiyo ufunguo wa kutambua utendaji wa aptamer, kuhakikisha kukomaa kwa uwiano wa aptamer na inaweza kushikamana na molekuli lengwa kwa uwiano wa juu na uteuzi katika matumizi ya vitendo.

Mchoro 1 Mchakato wa kukomaa kwa aptamer affinity. Chanzo cha marejeleo:Kinghorn AB, Fraser LA, 2017.

Uthibitishaji wa utendaji kazi

Mbali na uthibitisho wa ukaribu, utendaji kazi wa aptamer unahitaji kuthibitishwa. Hii inajumuisha kuthibitisha uthabiti, umahususi, na mwingiliano wa aptamer na molekuli zingine katika mazingira fulani. Matokeo ya uthibitisho wa utendaji kazi yataathiri moja kwa moja thamani ya aptamer katika utafiti wa kisayansi na matumizi ya viwanda.

Uthibitishaji Maalum

Jaribio la ushindani: Uwezo wa aptamer kuungana na shabaha maalum hupimwa mbele ya shabaha zingine zinazofanana. Ikiwa aptamer inaweza kuungana mahususi na molekuli inayolengwa bila kuingiliwa na molekuli zingine, inaonyesha kuwa ina umaalumu wa hali ya juu.

Jaribio la mmenyuko mtambuka: Aptamer imeunganishwa na mfululizo wa malengo yanayohusiana au yasiyohusiana ili kuona kama inaunganishwa na shabaha maalum pekee, ili kuthibitisha umaalum wake.

Uthibitishaji wa uthabiti

Jaribio la uharibifu wa nyuklia: Aptamers ziliwekwa wazi kwa viwango tofauti vya nucleases na uharibifu wao ulionekana. Kwa kulinganisha kiwango cha uharibifu katika nyakati tofauti, uwezo wa aptamer wa kupambana na uharibifu wa nuclease unaweza kutathminiwa.

Jaribio la uthabiti wa halijoto na wakati: Aptamer iliwekwa chini ya hali tofauti za halijoto na wakati ili kuchunguza uthabiti wake wa kimuundo na utendaji kazi. Hii husaidia kubaini hali bora za uhifadhi na matumizi kwa aptamer.

Utambuzi wa shughuli za kibiolojia

Njia inayofaa kwa kawaida huchaguliwa kulingana na lengo mahususi la matumizi ya aptamer ya asidi ya kiini.

(1) Upimaji wa kiwango cha molekuli: Kutumia mbinu za biolojia ya molekuli, kama vile electrophoresis ya jeli, Western blot, n.k., kugundua michanganyiko inayoundwa baada ya aptamer kuungana na molekuli lengwa, au kugundua mabadiliko katika kiwango cha usemi wa molekuli lengwa inayosababishwa na aptamer.

(2) Upimaji wa kiwango cha seli: Kwa kutumia teknolojia ya uundaji wa seli, aptameri huwekwa ndani ya seli lengwa ili kuchunguza mabadiliko ya kibiolojia kama vile mofolojia ya seli, kuongezeka na apoptosis, na kutathmini shughuli za kibiolojia za aptameri.

(3) Upimaji wa modeli za wanyama: Katika modeli zinazofaa za wanyama, aptameri za asidi ya kiini hutolewa kwa sindano au utawala wa dawa, na viashiria vya kisaikolojia na mabadiliko ya kiolojia ya wanyama huzingatiwa ili kutathmini shughuli za kibiolojia na usalama wa aptameri hizo mwilini.