Mnamo 1960, dhana ya kingamwili za bispecific ilipendekezwa. Kingamwili za bispecific, pia zinazojulikana kama kingamwili za bispecific monokloni, ni kingamwili zilizotengenezwa bandia kwa kutumia teknolojia ya uhandisi wa kijenetiki. Kama kingamwili bandia iliyobuniwa, kingamwili za bispecific kwa kawaida huwa katika kundi dogo la IgG na huwa na kipande cha kufunga antijeni kinacholenga kitengo kidogo cha CD3. Kingamwili za bispecific zina maeneo mawili maalum ya kufunga antijeni ambayo yanaweza kufunga na kutambua antijeni mbili tofauti kwa wakati mmoja, au epitopu mbili tofauti za antijeni. Ikilinganishwa na kingamwili za monokloni, kingamwili za bispecific zina eneo maalum la ziada la kufunga antijeni, hivyo kuwa na umaalum na uwezo mkubwa wa kulenga, ambao unaweza kulenga seli za uvimbe kwa usahihi zaidi na kupunguza sumu nje ya lengo. Kingamwili za bispecific zinaweza kufanya kazi nyingi za kibiolojia kwa wakati mmoja, kama vile kuajiri seli za kinga, kuzuia njia za kuashiria, na kuua seli za uvimbe moja kwa moja. Kingamwili za awali za bispecific zilitayarishwa hasa kupitia muunganiko wa kemikali au muunganiko wa seli, lakini njia hii inaweza kuwa iliendelea polepole kutokana na mchanganyiko nasibu na ugumu wa kutenganisha mchanganyiko lengwa. Kwa maendeleo endelevu ya teknolojia ya uhandisi wa kijenetiki, majukwaa mengi mapya ya teknolojia yametengenezwa, kama vile mafundo kwenye mashimo (KIH), CrossMab, DVD Ig, n.k. Majukwaa haya hutatua matatizo kama vile kutolingana kwa minyororo mizito na minyororo nyepesi, na kuboresha usawa na mavuno ya kingamwili za pande mbili.

Njia kuu za uzalishaji wa kingamwili za bispecific ni pamoja na kiunganishi cha kemikali, mseto wa mseto wa nne, na utayarishaji wa kingamwili za uhandisi wa kijenetiki. Miongoni mwao, mbinu ya kiunganishi cha kemikali huunganisha vipande viwili vya kingamwili vya IgG au viwili vya F (ab ') 2 vilivyosalia na kuwa kingamwili za bispecific kwa kutumia mawakala wa kiunganishi wa kemikali kama vile phthalimide na dithioacylbenzoic acid. Njia hii ni rahisi na rahisi kufanya kazi, lakini inaweza kuharibu eneo la kufungamana kwa antijeni, kupunguza shughuli za kingamwili, na wakala wa kiunganishi yenyewe pia ina kiwango fulani cha kansa. Mbinu ya mseto wa nne chanzo inategemea muunganiko wa seli za somatic kutoka kwa mistari miwili tofauti ya seli za mseto ili kuelezea IgG inayolingana ya panya. Kupitia teknolojia ya uhandisi wa kijenetiki, kingamwili zinaweza kubadilishwa vinasaba ili kuunda kingamwili za bispecific. Kingamwili mbili tofauti za monokloni zilijengwa, na vipande vya Fab au maeneo yenye mnyororo mzito na mnyororo mwepesi wa kingamwili hizo mbili ziligawanywa kando. Kupitia mmenyuko wa kuunganisha mseto au teknolojia ya uunganishaji wa mnyororo, vipande hivyo viwili viliunganishwa ili kuunda kingamwili ya bispecific. Ingawa ugumu wa teknolojia ya uhandisi wa kijenetiki ni mkubwa kiasi, kwa sasa ndiyo njia inayotumika sana kwa ajili ya uzalishaji wa kingamwili mbili maalum ili kurekebisha muundo na utendakazi wa kingamwili. Wakati wa kufanya muundo wa kingamwili mbili maalum, kanuni ya mmenyuko mtambuka wa kingamwili inaweza kutumika, lakini mmenyuko mtambuka wa kingamwili unaweza kusababisha athari zisizo maalum, kwa hivyo itazingatiwa kwa uangalifu katika matumizi ya vitendo ya muundo wa kingamwili mbili maalum, kama vile tiba ya kingamwili mbili maalum.

Utakaso wa kingamwili za bispecific ni mchakato wa kutenganisha na kusafisha kingamwili lengwa zenye usafi wa hali ya juu. Njia mbili, centrifugation na uchujaji wa kina, hutumika kuondoa uchafu unaoyeyuka. Kingamwili lengwa ya bispecific hunaswa mwanzoni na chromatografia ya affinity. Kwa kingamwili za bispecific kama IgG, chromatografia ya affinity ya protini A hutumiwa, huku kwa kingamwili zisizo za bispecific kama IgG, chromatografia ya affinity inayotegemea mnyororo mwepesi inaweza kutumika. Baadaye, kingamwili huwekwa chini ya hali ya pH ya chini kwa muda fulani, na kusababisha muundo wa protini kwenye uso wa bahasha ya virusi kuvurugika, na hivyo kupoteza uwezo wa kuambukiza seli. Uchujaji wa kina wa kati hufanywa ili kuondoa uchafu zaidi kama vile protini za seli mwenyeji (HCP). Usafi wa kingamwili huboreshwa kupitia mbinu kama vile chromatografia ya kubadilishana ioni, na virusi vyovyote vilivyobaki huondolewa kupitia mbinu za nanofiltration au ultrafiltration. Hatimaye, sampuli hujilimbikizia na kubadilishwa na bafa inayofaa ya uundaji.