Huduma ya Kuchunguza Maktaba ya Onyesho la Phage

Alpha Lifetech imekuwa ikijihusisha sana na teknolojia ya maonyesho ya Phage kwa miaka mingi. Imejenga jukwaa thabiti la teknolojia ya maonyesho ya Phage ambalo huokoa muda kwa utafiti wa kisayansi au utafiti wa mradi na kuwezesha uzalishaji unaofuata. Alpha Lifetech inaweza pia kuwapa wateja huduma kama vile uzalishaji wa kingamwili za vhh, uzalishaji wa kingamwili za scFv, uzalishaji wa Kingamwili za Fab.

Alpha Lifetech ina jukwaa kamili la kuonyesha M13/T7 phage ili kuhakikisha ujenzi na uzalishaji wa maktaba za kingamwili. Tunaweza pia kutoa huduma maalum, kama vile uzalishaji wa kingamwili scFv na uchunguzi wa kingamwili wa kiwango cha juu, ili kukidhi mahitaji yako.

Mchakato wa Ujenzi wa Maktaba ya Onyesho la Phaji

Mchakato wa ujenzi wa maktaba ya phaji ni kama ifuatavyo: vitangulizi maalum vimeundwa kwa ajili ya ukuzaji wa PCR ambao hupata bidhaa, ambazo zimeunganishwa na kimeng'enya kwa kutumia vekta ya phaji ya T7/M13, na plasmidi ya phaji iliyounganishwa tena imetengenezwa kwa mafanikio. Plasidi ya phaji iliyounganishwa tena ilibadilishwa kuwa seli za vipokezi vya TG1, kisha ikafunikwa kwenye chombo chenye viuavijasumu vinavyofaa, na utamaduni uliopanuliwa ulifanyika baada ya kuchunguza transfoma. Baada ya raundi nyingi za utamaduni, phaji huiga nyakati za urejelezaji katika bakteria na kuonyesha protini inayolengwa au polipeptidi kwa mafanikio. Kisha maktaba ya phaji husafishwa ili kuondoa uchafu na phaji zisizofungwa.

Mbinu za Kuchunguza Maktaba ya Onyesho la Phaji

Mafanikio ya uzalishaji wa kingamwili za kuonyesha faji hutegemea sana maktaba za kuonyesha faji za kingamwili, na njia za kawaida za kuchuja faji ni uchunguzi wa awamu imara na awamu ya kioevu. Uchunguzi wa antijeni wa awamu imara huimarisha kingamwili maalum kupitia raundi 3-4 za utatuzi ili kupata maktaba za kuonyesha faji za kingamwili; Uchunguzi wa antijeni wa awamu ya kioevu hufanywa kwa kuweka maktaba za lengwa na za kuonyesha faji zenye lebo ya biotini na kukamata faji zilizofungwa kwa kutumia shanga za sumaku. Uchunguzi wa awamu imara hutumia antijeni zaidi na baadhi ya epitopu za antijeni huharibiwa. Uchunguzi wa awamu ya kioevu una sifa ya ufanisi wa juu na utajiri, lakini kingamwili zilizopatikana si maalum sana. Njia ya kuchuja faji inategemea mahitaji ya majaribio, ambayo yote yatakuwa na athari fulani kwenye athari ya uzalishaji wa kingamwili za kuonyesha faji.

Uchunguzi wa Kinga Mwili wa Kiwango cha Juu

Ukuaji wa kingamwili umeongezeka kwa kasi katika dawa za kisasa. Kuna mbinu tofauti za ukuzaji wa kingamwili, lakini uchunguzi wa kingamwili wa kiwango cha juu unatumika zaidi katika sayansi ya matibabu. Mchakato huu unaweza kupata idadi kubwa ya utofauti wa repertoire ya kingamwili. Kuchanganya na mbinu za jadi za uchunguzi wa maktaba ya kingamwili kunaweza kuboresha ubora wa uchunguzi wa maktaba za maonyesho ya faji. Baada ya uchunguzi wa kibiolojia, kingamwili zinaweza kutambuliwa na ELISA ya kiwango cha chini au uchunguzi wa kingamwili wa kiwango cha juu.

Mchoro 1 Chati ya mtiririko inayoelezea mfuatano wa matukio kuanzia ujenzi wa maktaba za kingamwili za faji hadi uzalishaji wa kingamwili za monokloni zenye mshikamano mkubwa kwa antijeni na kingamwili ya chini.(Chanzo cha marejeleo: Teknolojia ya Onyesho la Phaji kama Jukwaa Lenye Nguvu la Ugunduzi wa Dawa za Kinga Mwilini - PMC (nih.gov))

Tahadhari za Uchunguzi wa Onyesho la Kinga MwiliTahadhari

Mambo ya kuzingatia kuhusu bafa

Uchaguzi wa vizuizi unapaswa kuzingatia uthabiti wa shabaha, mazingira madogo ya kufungamana, na ufungamano mdogo usio maalum katika hali halisi ya matumizi. Protini zisizohusiana, sabuni zisizo za ioni, na viwango vya chumvi vya kisaikolojia vinafaa kupunguza usuli. Pia kuna hali zingine, kama vile baadhi ya shabaha zinaweza kuhitaji kuongezwa kwa kasheni za valenti mbili au vizuizi vingine kwenye kizuizi, vizuizi vya protini vinaweza kuunganishwa pamoja na shabaha, vinaweza kuongezwa kwenye kizuizi cha kupanga, na hata vinaweza kutumika kama njia ya kunasa shabaha.

Mambo ya Kuzingatia Shinikizo

Mambo ya kawaida ya kuzingatia kuhusu shinikizo la uteuzi ni pamoja na mkusanyiko wa molekuli lengwa, muda wa kufungamana, kiwango cha kuosha, n.k. Mbinu zingine za kuongeza shinikizo la uteuzi ni pamoja na matumizi ya denaturants (kama vile asidi, urea, na guanidine), miyeyusho ya kikaboni, ongezeko la joto, au kuongeza mkusanyiko wa ligandi au shabaha zinazoshindana katika bafa ya kuosha.
Miongoni mwao, raundi ya kwanza ya uchunguzi ni muhimu. Raundi ya kwanza ya uchunguzi ni kunasa nakala nyingi chanya iwezekanavyo kutoka kwa maktaba iliyojengwa huku ikiondoa nakala zisizo maalum. Malengo yenye vinyweleo au idadi kubwa ya shabaha mumunyifu zinapaswa kutumika kuhakikisha kwamba idadi kubwa ya faji zilizofungwa zinanaswa ili kudumisha utofauti wa maktaba. Katika raundi zinazofuata za uchunguzi, shinikizo la uteuzi linapaswa kuongezeka kwa ongezeko la uboreshaji, kuosha mara nyingi, na kuongeza muda wa kuosha, nakala zenye mshikamano mkubwa zinaweza kuchunguzwa.

Mkakati wa Uchunguzi Hasi

Lebo za antijeni na nyenzo za kubeba ambazo mchakato wa uchunguzi ni kuchunguza vitu vyote kwenye viunganishi vya antijeni, kama vile lebo, protini za muunganiko, na substrates zinazounga mkono. Uchunguzi hasi wa vitu visivyolengwa unaweza kupunguza uboreshaji wa kingamwili zingine isipokuwa antijeni lengwa.
Seli nzima, liposome, diski za nano-phospholipid, na VLP zinaweza kuchunguzwa vibaya kwa kutumia seli zilizoigwa zilizobadilishwa au seli ambazo hazijabadilishwa wakati wa kuchunguza mistari ya seli zilizobadilishwa.
Kuondolewa kwa michanganyiko tata ya antijeni Uchunguzi mkali hasi unaweza kufanywa kwa molekuli lengwa zisizojulikana au tata, kama vile seli nzima au protini zisizo safi.
Mkakati wa kingamwili dhidi ya maeneo maalum ya antijeni, moja ni kufafanua kingamwili inayoweza kushindana na ligandi kwa kuongeza mkusanyiko mkubwa wa ligandi, na nyingine ni kuzuia kingamwili.

Matumizi ya Onyesho la Phage

*Ugunduzi wa kingamwili umekuwa muhimu zaidi katika dawa za kisasa. Mbinu tofauti za ugunduzi wa kingamwili zipo, lakini teknolojia ya kuonyesha kingamwili inatumika zaidi katika sayansi ya matibabu. Tangu 1990, miundo tofauti ya kingamwili imetumika kujenga maktaba za kingamwili, ikiwa ni pamoja na VH, VHH, scFvs, diabodies, na kingamwili za Fab.
*Maktaba za peptidi ya faji huruhusu uamuzi wa haraka wa mfuatano wa epitopu za protini na zimekuwa zana yenye nguvu ya kuchunguza mwingiliano kati ya epitopu na vipokezi vya antijeni.
*Vipande vya kingamwili huunganishwa na G3P ya faji ya M13, na kwa kuunganisha idadi kubwa ya jeni zinazosimba kipande cha kingamwili, maktaba kubwa za kingamwili za kuonyesha faji zinaweza kuzalishwa ambapo kingamwili nyingi tofauti zinaweza kuchaguliwa.
*Mfumo wa kuonyesha T7 phage una faida nyingi, ikiwa ni pamoja na urahisi, usalama wa hali ya juu, uthabiti, uhifadhi rahisi, na usafirishaji, kwa hivyo mfumo huo hutumika katika chanjo za kinga na matibabu.
*Mfumo wa kuonyesha faji za T7 unaweza kugundua antijeni mbalimbali, kama vile antijeni za uso wa vijidudu vinavyosababisha magonjwa na antijeni za saratani.

Faji

KWA NINI UTUCHAGUE

Alpha Lifetech pia inaweza kuwapa wateja huduma kama vile uzalishaji wa kingamwili za vhh, uzalishaji wa kingamwili za scFv, uzalishaji wa Kingamwili za Fab.