ஆன்டிபாடி ஈர்ப்பு முதிர்ச்சி சேவை

ஆல்ஃபா லைஃப்டெக் இன்க்.பிறழ்வு மற்றும் தேர்வுத் தொழில்நுட்பங்களைப் பயன்படுத்தி, ஆன்டிபாடி பிணைப்பு முதிர்ச்சிச் சேவையை நாங்கள் வழங்க முடியும். பிணைப்பு முதிர்ச்சிச் சேவை செயல்முறைகளில், நாங்கள் வழக்கமாக scFv-ஐ ஆன்டிபாடி வடிவமாகப் பயன்படுத்துகிறோம். மேலும், ஆன்டிஜென்-பிணைப்புச் சோதனையின் போது ஈர்ப்பு விளைவுகளைக் குறைக்கப் பயன்படுத்தப்படும் ஒரு மோனோவேலன்ட் டிஸ்ப்ளே ஃபேஜ்மிட் அமைப்பையும் பயன்படுத்துகிறோம். எங்கள் தொழில்முறை குழு, ஒற்றை-டொமைன் ஆன்டிபாடிகளுக்கும் பிணைப்பு முதிர்ச்சிச் சேவைகளை வழங்க முடியும்.

ஆல்ஃபா லைஃப்டெக் இன்க்.உலகளாவிய வாடிக்கையாளர்களின் பல்வேறு தேவைகளைப் பூர்த்திசெய்ய விரிவான சேவைகளை வழங்குவதில் நாங்கள் பெருமை கொள்கிறோம். வெவ்வேறு வாடிக்கையாளர்களின் கோரிக்கைகளைப் புரிந்துகொண்டு அவற்றை நிறைவேற்றுவதும், ஆராய்ச்சிப் பணிகளில் எழும் மற்றும் உருவாகும் சிக்கல்களுக்கு உதவுவதுமே எங்கள் நோக்கம்.

ஈர்ப்பு முதிர்ச்சி என்பது என்ன?

பிணைப்பு முதிர்ச்சி என்பது, ஆன்டிபாடிகள் குறிப்பிட்ட ஆன்டிஜென்களுக்கான தங்கள் பிணைப்பை மேம்படுத்துவதற்காக, மீண்டும் மீண்டும் பிறழ்வுகளுக்கும் தேர்வுக்கும் உள்ளாகும் ஒரு செயல்முறையாகும். முக்கியமாக இரண்டாம் நிலை நிணநீர் உறுப்புகளின் கரு மையத்தில் நிகழும் இச்செயல்முறையில், டி செல்கள் மற்றும் நுண்ணறை டென்ட்ரிடிக் செல்களின் செல்வாக்கின் கீழ் பி செல்கள் உடற்கல அதிபிறழ்வுக்கும் தேர்வுக்கும் உள்ளாகின்றன.
பிணைப்பு முதிர்ச்சி செயல்முறையின் போது, ​​குறைந்த பிணைப்புத்திறன் கொண்ட மேற்பரப்பு இம்யூனோகுளோபுலின் ஏற்பிகளைக் கொண்ட B செல்கள், ஆன்டிஜென் சந்திப்புகளால் தூண்டப்பட்டு, பெருக்கம் மற்றும் வேறுபாட்டிற்கு உள்ளாகின்றன. உடற்கல மிகைப்பிறழ்வு பிணைப்பு முதிர்ச்சியின் மூலம், இம்யூனோகுளோபுலின் மரபணுக்களின் மாறுபடும் பகுதியில் சீரற்ற நியூக்ளியோடைடு பதிலீடுகள் ஏற்படுகின்றன, இது பல்வேறு ஆன்டிபாடி வகைகளின் உற்பத்திக்கு வழிவகுக்கிறது. உடற்கல மிகைப்பிறழ்வுக்குப் பிறகு, பிறழ்ந்த இம்யூனோகுளோபுலின் ஏற்பிகளைக் கொண்ட B செல்களில் ஆன்டிஜென்-சார்ந்த தேர்வு செய்யப்படுகிறது. அதிகரித்த ஆன்டிஜென் பிணைப்புத்திறன் கொண்ட ஆன்டிபாடிகளை உற்பத்தி செய்யும் B செல்கள் முன்னுரிமையுடன் தக்கவைக்கப்பட்டு பெருக அனுமதிக்கப்படுகின்றன, அதே சமயம் குறைந்த அல்லது மாறாத பிணைப்புத்திறன் கொண்ட B செல்கள் அப்போப்டோசிஸுக்கு உள்ளாகின்றன. பிறழ்வு மற்றும் தேர்வின் இந்த தொடர் செயல்முறை, ஆன்டிஜெனுக்கான படிப்படியாக அதிக பிணைப்புத்திறன் கொண்ட ஆன்டிபாடிகளை உற்பத்தி செய்யும் B செல் குளோன்களின் உருவாக்கத்திற்கு வழிவகுக்கிறது.

ஆன்டிபாடி ஈர்ப்பு முதிர்ச்சி சேவை

பிசிஆர் அடிப்படையிலான முறைகளின் முக்கிய நன்மைகள் யாதெனில், சடுதி மாற்றங்கள் பெருக்கப்பட்ட துண்டில் துல்லியமாகக் குறிவைக்கப்படுகின்றன; பிழை விகிதத்தைக் கட்டுப்படுத்துவது எளிது; மேலும் இந்த முறையை அமைப்பது விரைவானது மற்றும் எளிதானது, அத்துடன் இது அபாயகரமான இரசாயனங்களைப் பயன்படுத்துவதில்லை. டாக் டிஎன்ஏ பாலிமரேஸ், 3' முதல் 5' வரையிலான பிழைதிருத்தும் செயல்பாடு இல்லாததன் காரணமாக, டிஎன்ஏ-வை குறைந்த நம்பகத்தன்மையுடன் நகலெடுக்கிறது என்பது நன்கு அறியப்பட்டதாகும்.ஆல்பா லைஃப்டெக்கின்ஆன்டிபாடி பொறியியல் தளம், துணை நூலக உருவாக்கத்தின் போது முக்கியமாக CDR பகுதிகளைப் பிறழ்வுக்குள்ளாக்க, பிழை ஏற்படக்கூடிய PCR அணுகுமுறையைப் பயன்படுத்துகிறது. மேலும், துணை நூலகத்தின் மரபணுப் பன்முகத்தன்மையை அதிகரிப்பதற்காக, VH மற்றும் VL துண்டுகள் முழுவதிலும் முற்றிலும் சீரற்ற இடங்களில் நாங்கள் அடிக்கடி பிறழ்வுகளை உருவாக்குகிறோம். பிழை ஏற்படக்கூடிய PCR மூலம் ஒரு பிறழ்வுற்ற ஆன்டிபாடி மரபணு நூலகம் உருவாக்கப்பட்ட பிறகு, அதிக ஈர்ப்புத்திறன் கொண்ட வகைகளின் (scFv ஆன்டிபாடிகளின் ஈர்ப்புத்திறன் 10^8 - 10^10 M வரை அடையலாம்) தேர்வு, கரைசலில் பேனிங் செய்வதன் மூலமாகவோ அல்லது ஆஃப்-ரேட்-சார்ந்த தேர்வுக்காக உகந்ததாக்கப்பட்ட கழுவும் நிலைமைகளுடன் அசையா ஆன்டிஜெனில் செய்வதன் மூலமாகவோ செய்யப்படுகிறது.
  
விஞ்ஞானிகள்ஆல்ஃபா லைஃப்டெக் இன்க்.சீரற்ற சடுதிமாற்றங்களை அறிமுகப்படுத்தவும், அதன் மூலம் மறுசேர்க்கை ஆன்டிபாடி துண்டுகளின் ஈர்ப்புத்திறனையும் வெளிப்பாட்டையும் மாற்றியமைக்கவும், பல சடுதிமாற்ற உத்திகளில் ஒன்றாக எஸ்செரிச்சியா கோலி மியூட்டேட்டர் ஸ்ட்ரெயின்களான mutAD5TM-ஐப் பயன்படுத்தலாம். அதிக உற்பத்தி அளவுகளைக் கொண்ட ஆன்டிபாடி துண்டுகளுக்காகத் தேர்வு நிலைமைகளை மாற்றியமைக்க முடியும். எஸ்செரிச்சியா கோலி மியூட்டேட்டர் செல்களில் உள்ள வளர்ச்சி நிலைமைகளைச் சரிசெய்வதன் மூலம், ஒரு கிலோபேஸ் டிஎன்ஏ-க்கு ஒரு ஒற்றை சீரற்ற புள்ளி சடுதிமாற்றத்தை அறிமுகப்படுத்தலாம்; இது ஏறக்குறைய ஒரு scFv துண்டிற்கு ஒரு கோடான் மாற்றத்திற்குச் சமமாகும். சடுதிமாற்றம், காட்சிப்படுத்தல் மற்றும் தேர்வு ஆகியவற்றின் பல சுழற்சிகளுக்குப் பிறகு, நாம் ஈர்ப்புத்திறன் மாறிலியை 10^5 - 10^6 M-லிருந்து 10^8 - 10^10 M-ஆக மேம்படுத்த முடியும்.

பிணைப்பு முதிர்ச்சி உத்திகளை மேம்படுத்துதல்

பிணைப்புத்திறனை மேம்படுத்துவதற்காக, ஆன்டிபாடிகளின் சில நிலைகளை ஒரு வரையறுக்கப்பட்ட பன்முகத்தன்மையில் (எடுத்துக்காட்டாக, அனைத்து 20 அமினோ அமிலங்களுடனும் முழுமையான சீரற்றமயமாக்கல் அல்லது நிலையான சதவீதங்களில் தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட அமினோ அமிலங்களுடன் சார்புடைய சீரற்றமயமாக்கல்) சீரற்றமயமாக்கலாம். ஆன்டிபாடி பிணைப்புத்திறனை மேம்படுத்த எங்களிடம் இரண்டு உத்திகள் உள்ளன: முதலாவதாக, குறிப்பிட்ட இடத்திலான சடுதிமாற்றம் மூலம், நிரப்புத்தன்மையை நிர்ணயிக்கும் பகுதிகளில் (CDRs) உள்ள கட்டுப்படுத்தப்பட்ட நிலைகளில் சடுதிமாற்றங்கள் அறிமுகப்படுத்தப்படுகின்றன; இரண்டாவதாக, சீரற்ற சடுதிமாற்றம் மூலம் முழு V-குறியீட்டுப் பகுதிகளிலும் சடுதிமாற்றங்கள் அறிமுகப்படுத்தப்படுகின்றன. இந்த இரண்டு முறைகளைப் பயன்படுத்துவதன் மூலம், ஆன்டிபாடியின் பாதுகாக்கப்பட்ட அமினோ-அமில வரிசைகள் அல்லது முழு கட்டமைப்புப் பகுதியும் மற்ற அமினோ அமிலங்களால் பதிலீடு செய்யப்படும். இது, எங்களின் பெப்டைட் நூலக ஸ்கேனிங் தொழில்நுட்பங்களுடன் இணைந்து, விரும்பிய ஆன்டிபாடிகளின் பிணைப்புத்திறனை மிக உயர்ந்த நிலைக்குப் பெருமளவில் அதிகரிக்கக்கூடும்.

ஃபேஜ் டிஸ்ப்ளே-ஆன்டிபாடி அஃபினிட்டி

scFv மரபணு மாற்ற நூலகம் கட்டமைக்கப்பட்டவுடன், இரண்டு திரையிடல் உத்திகள் உள்ளன: உயிரியல் பிரித்தெடுத்தல் மற்றும் திட-எதிர்ப்பொருள் வரிசைப்படுத்தல். முந்தையதில், அதிக ஈர்ப்புத்திறன் கொண்ட எதிர்ப்பொருளைப் பிரித்தெடுக்க, அடி மூலக்கூறின் கழித்தல் செறிவு பயன்படுத்தப்படுகிறது, ஏனெனில் குறைந்த ஈர்ப்புத்திறன் கொண்ட மரபணு மாற்றங்கள் கழுவி அகற்றப்பட்டு, அதிக ஈர்ப்புத்திறன் கொண்ட பாக்டீரியோஃபேஜ் துகள்கள் மட்டும் எஞ்சும். இரண்டாவது உத்தியானது, கரைசலில் உள்ள குறியிடப்பட்ட எதிர்ப்பொருள், சமநிலை மாறிலி (Kd) அடிப்படையிலான தேர்வு மற்றும் பிணைப்பு இயக்கவியல் அடிப்படையிலான தேர்வு ஆகியவற்றைப் பயன்படுத்துகிறது; இந்தத் தேர்வு அணுகுமுறையானது, மேம்பட்ட Kd கொண்ட எதிர்ப்பொருள் வகைகளைத் தனித்துப் பிரித்தெடுக்கிறது.

உங்களுக்கு ஏதேனும் கேள்விகள் இருந்தால், எப்போது வேண்டுமானாலும் எங்களைத் தொடர்பு கொள்ளலாம்.