ஆன்டிபாடி அஃபினிட்டி முதிர்வு சேவை

ஆல்பா லைஃப்டெக் இன்க்.பிறழ்வு மற்றும் தேர்வு தொழில்நுட்பங்களைப் பயன்படுத்தி ஆன்டிபாடி அஃபினிட்டி முதிர்வு சேவையை வழங்க முடியும். நாங்கள் வழக்கமாக அஃபினிட்டி முதிர்வு சேவையின் செயல்முறைகளில் ஆன்டிபாடி வடிவமாக scFv ஐப் பயன்படுத்துகிறோம் மற்றும் ஆன்டிஜென்-பிணைப்பு ஸ்கிரீனிங்கின் போது அவிடிட்டி விளைவுகளைக் குறைக்கப் பயன்படுத்தப்படும் ஒரு மோனோவலன்ட் டிஸ்ப்ளே பேஜமிட் அமைப்பைப் பயன்படுத்துகிறோம். எங்கள் தொழில்முறை குழு ஒற்றை-டொமைன் ஆன்டிபாடிகளுக்கும் அஃபினிட்டி முதிர்வு சேவைகளை வழங்க முடியும்.

ஆல்பா லைஃப்டெக் இன்க்.உலகளாவிய வாடிக்கையாளர்களின் பல்வேறு தேவைகளைப் பூர்த்தி செய்ய விரிவான சேவைகளை வழங்குவதில் பெருமை கொள்கிறது. பல்வேறு வாடிக்கையாளர்களின் கோரிக்கைகளைப் புரிந்துகொண்டு பூர்த்தி செய்வதும், ஆராய்ச்சிப் பணிகளில் வரவிருக்கும் மற்றும் வளர்ந்து வரும் எந்தவொரு பிரச்சினைகளுக்கும் உதவுவதும் எங்கள் நோக்கமாகும்.

அஃபினிட்டி முதிர்ச்சி என்றால் என்ன?

இணைப்பு முதிர்வு என்பது ஆன்டிபாடிகள் குறிப்பிட்ட ஆன்டிஜென்களுக்கான தொடர்பை அதிகரிக்க மீண்டும் மீண்டும் பிறழ்வுகள் மற்றும் தேர்வுக்கு உட்படும் செயல்முறையாகும். முக்கியமாக இரண்டாம் நிலை லிம்பாய்டு உறுப்புகளின் முளை மையத்தில் நிகழும் B செல்கள், T செல்கள் மற்றும் ஃபோலிகுலர் டென்ட்ரிடிக் செல்களின் செல்வாக்கின் கீழ் சோமாடிக் ஹைப்பர்முடேஷன் மற்றும் தேர்வுக்கு உட்படுகின்றன.
இணைப்பு முதிர்வு செயல்முறையின் போது, ​​குறைந்த இணைப்பு மேற்பரப்பு இம்யூனோகுளோபுலின் ஏற்பிகளைக் கொண்ட B செல்கள் ஆன்டிஜென் சந்திப்புகளால் செயல்படுத்தப்பட்டு பெருக்கம் மற்றும் வேறுபாட்டிற்கு உட்படுகின்றன. சோமாடிக் ஹைப்பர்முடேஷன் இணைப்பு முதிர்வு மூலம், இம்யூனோகுளோபுலின் மரபணுக்களின் மாறி பகுதியில் சீரற்ற நியூக்ளியோடைடு மாற்றீடுகள் ஏற்படுகின்றன, இது பல்வேறு ஆன்டிபாடி மாறுபாடுகளின் உற்பத்திக்கு வழிவகுக்கிறது. சோமாடிக் ஹைப்பர்முடேஷனுக்குப் பிறகு, பிறழ்ந்த இம்யூனோகுளோபுலின் ஏற்பிகளைக் கொண்ட B செல்களில் ஆன்டிஜென்-இயக்கப்படும் தேர்வு செய்யப்படுகிறது. அதிகரித்த ஆன்டிஜெனிக் தொடர்புடன் ஆன்டிபாடிகளை உருவாக்கும் B செல்கள் முன்னுரிமையாக தக்கவைக்கப்பட்டு பெருக்க அனுமதிக்கப்படுகின்றன, அதே நேரத்தில் குறைக்கப்பட்ட அல்லது மாறாத தொடர்பு கொண்ட B செல்கள் அப்போப்டோசிஸுக்கு உட்படுகின்றன. பிறழ்வு மற்றும் தேர்வின் இந்த மறுசெயல்பாட்டு செயல்முறை B செல் குளோன்களின் உற்பத்திக்கு வழிவகுக்கிறது, ஆன்டிஜெனுக்கு படிப்படியாக அதிக தொடர்புடன் ஆன்டிபாடிகளை உருவாக்குகிறது.

ஆன்டிபாடி அஃபினிட்டி முதிர்வு சேவை

PCR அடிப்படையிலான முறைகளின் முக்கிய நன்மைகள் என்னவென்றால், பிறழ்வுகள் பெருக்கப்பட்ட துண்டுக்கு துல்லியமாக இலக்காகக் கொள்ளப்படுகின்றன; பிழை விகிதத்தைக் கட்டுப்படுத்துவது எளிது, மேலும் இந்த முறை விரைவாகவும் எளிதாகவும் அமைக்கக்கூடியது மற்றும் அபாயகரமான இரசாயனங்களைப் பயன்படுத்துவதில்லை. Taq DNA பாலிமரேஸ் குறைந்த நம்பகத்தன்மையுடன் DNA ஐ நகலெடுக்கிறது என்பது அனைவரும் அறிந்ததே, ஏனெனில் 3' முதல் 5' வரையிலான ப்ரூஃப்ரீடிங் செயல்பாடு இல்லாததால்.ஆல்ஃபா லைஃப்டெக்ஸ்துணை நூலக கட்டுமானத்தின் போது முக்கியமாக CDR பகுதிகளை மாற்றுவதற்கு ஆன்டிபாடி பொறியியல் தளம் பிழை ஏற்படக்கூடிய PCR அணுகுமுறையைப் பயன்படுத்துகிறது. மேலும் துணை நூலகத்தின் மரபணு பன்முகத்தன்மையை அதிகரிப்பதற்காக, பெரும்பாலும் முழு VH மற்றும் VL துண்டுகளிலும் முற்றிலும் சீரற்ற நிலைகளில் பிறழ்வுகளை உருவாக்குகிறோம். பிழை ஏற்படக்கூடிய PCR மூலம் ஒரு பிறழ்ந்த ஆன்டிபாடி மரபணு நூலகத்தை உருவாக்கிய பிறகு, உயர்-தொடர்பு மாறுபாடுகளின் தேர்வு (scFv ஆன்டிபாடிகளின் தொடர்பு 10^8 - 10^10 M ஐ அடையலாம்) கரைசலில் பேன் செய்வதன் மூலமாகவோ அல்லது ஆஃப்-ரேட்-சார்பு தேர்வுக்கு உகந்ததாக சலவை நிலைமைகளுடன் அசைவற்ற ஆன்டிஜெனில் செய்யப்படுகிறது.
  
விஞ்ஞானிகள்ஆல்பா லைஃப்டெக் இன்க்.சீரற்ற பிறழ்வுகளை அறிமுகப்படுத்துவதற்கும், அதன் மூலம் மறுசீரமைப்பு ஆன்டிபாடி துண்டுகளின் தொடர்பு மற்றும் வெளிப்பாட்டை மாற்றுவதற்கும் பல பிறழ்வு உத்திகளில் ஒன்றாக Escherichia coli mutator strains mutAD5TM ஐப் பயன்படுத்துதல். அதிகரித்த உற்பத்தி அளவுகளுடன் ஆன்டிபாடி துண்டுகளுக்கு தேர்வு நிலைமைகளை மாற்றியமைக்கலாம். Escherichia coli mutator செல்களில் வளர்ச்சி நிலைமைகளை ஒரு கிலோபேஸ் DNA க்கு ஒரு ஒற்றை சீரற்ற புள்ளி பிறழ்வை அறிமுகப்படுத்த சரிசெய்யலாம், இது scFv துண்டுக்கு ஒரு கோடான் மாற்றத்திற்கு கிட்டத்தட்ட சமம். பல சுழற்சிகளின் பிறழ்வு, காட்சி மற்றும் தேர்வுக்குப் பிறகு, 10^5 - 10^6 M இலிருந்து 10^8 - 10^10 M வரை தொடர்பு மாறிலியை மேம்படுத்தலாம்.

அஃபினிட்டி முதிர்வு உத்திகளை மேம்படுத்தவும்

ஆன்டிபாடிகளின் சில நிலைகளை வரையறுக்கப்பட்ட பன்முகத்தன்மையில் (20 அமினோ அமிலங்களுடன் முழு சீரற்றமயமாக்கல் அல்லது நிலையான சதவீதத்தில் தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட அமினோ அமிலங்களுடன் சார்புடைய சீரற்றமயமாக்கல் போன்றவை) சீரற்றதாக்க முடியும். ஆன்டிபாடி உறவை மேம்படுத்த எங்களிடம் இரண்டு உத்திகள் உள்ளன: முதலாவதாக, தள-இயக்கப்பட்ட பிறழ்வு உருவாக்கம் மூலம் நிரப்புத்தன்மையை தீர்மானிக்கும் பகுதிகளில் (CDRகள்) கட்டுப்படுத்தப்பட்ட நிலைகளில் பிறழ்வுகள் அறிமுகப்படுத்தப்படுகின்றன; இரண்டாவதாக, சீரற்ற பிறழ்வு உருவாக்கம் மூலம் முழு V-குறியீட்டு பகுதிகளிலும் பிறழ்வுகள் அறிமுகப்படுத்தப்படுகின்றன. இந்த இரண்டு முறைகளைப் பயன்படுத்துவதன் மூலம், பாதுகாக்கப்பட்ட அமினோ-அமில வரிசைகள் அல்லது ஆன்டிபாடியின் முழு கட்டமைப்புப் பகுதியும் பிற அமினோ அமிலங்களால் மாற்றப்படும், இது எங்கள் பெப்டைட் நூலக ஸ்கேனிங் தொழில்நுட்பங்களுடன் இணைந்து, ஆர்வமுள்ள ஆன்டிபாடிகளின் உறவை மிக உயர்ந்த நிலைக்கு அதிகரிக்கக்கூடும்.

பேஜ் டிஸ்ப்ளே-ஆன்டிபாடி அஃபினிட்டி

scFv விகாரி நூலகம் கட்டமைக்கப்பட்டவுடன், இரண்டு ஸ்கிரீனிங் உத்திகள் கிடைக்கின்றன: பயோபேனிங் மற்றும் திட-ஆன்டிஜென் வரிசைப்படுத்தல். முந்தையதில், குறைந்த-இணைப்பு விகாரிகளைக் கழுவி, உயர்-அணைப்பு பேஜ் துகள்களை விட்டுவிடுவதால், உயர்-இணைப்பு ஆன்டிபாடியை தனிமைப்படுத்த அடி மூலக்கூறின் கழித்தல் செறிவு பயன்படுத்தப்படுகிறது. இரண்டாவது உத்தி கரைசலில் லேபிளிடப்பட்ட ஆன்டிஜென், சமநிலை மாறிலி (Kd) அடிப்படையிலான தேர்வு மற்றும் பிணைப்பு இயக்கவியலின் அடிப்படையிலான தேர்வு ஆகியவற்றைப் பயன்படுத்துகிறது, இந்தத் தேர்வு அணுகுமுறை மேம்படுத்தப்பட்ட Kd உடன் ஆன்டிபாடி மாறுபாடுகளை தனிமைப்படுத்துகிறது.

உங்களிடம் ஏதேனும் கேள்விகள் இருந்தால், எந்த நேரத்திலும் எங்களைத் தொடர்பு கொள்ளலாம்.