பேஜ் காட்சி தொழில்நுட்பம் என்பது பேஜ் கேப்சிட் புரதத்தின் குறிப்பிட்ட நிலையில் வெளிநாட்டு இலக்கு மரபணுவைச் செருகுவதும், பேஜின் இயல்பான செயல்பாட்டைப் பாதிக்காமல் பேஜின் மேற்பரப்பில் வெளிநாட்டு மரபணுவை வெளிப்படுத்துவதும் ஆகும். பல சுற்று பரிசோதனைகளுக்குப் பிறகு, வலுவான தனித்தன்மை மற்றும் உயர் உயிரியல் செயல்பாடு கொண்ட இலக்கு புரதம் இறுதியாகப் பெறப்பட்டது.

இந்த தொழில்நுட்பத்தைப் பயன்படுத்தி அதிக திறன் கொண்ட ஆன்டிபாடி நூலகங்களை உருவாக்க முடியும். ஸ்கிரீனிங் சுழற்சி குறுகியது, செயல்பாட்டு செயல்முறை நேரடியானது, மற்றும் பயன்பாடுகளின் வரம்பு விரிவானது, இது இலக்கு பெப்டைடுகள் அல்லது புரதங்களுக்கான உகந்த வரிசைகளை அடையாளம் காண அனுமதிக்கிறது. வைரஸ் தொடர்பான பயன்பாடுகளில், பெரிய ஆன்டிபாடி நூலகங்களை திரையிடுவதன் மூலம் முக்கியமான வைரஸ் எபிடோப்களுடன் பிணைக்கும் ஆன்டிபாடிகளை ஆராய்ச்சியாளர்கள் கண்டறியலாம். இந்த செயல்முறை வைரஸ்களின் நுழைவு, நகலெடுப்பு அல்லது நோயெதிர்ப்பு ஏய்ப்பு வழிமுறைகளைத் தடுக்கலாம், இதன் மூலம் நோய் சிகிச்சைக்கான அடித்தளத்தை நிறுவுகிறது.

குறிப்பிட்ட நோயெதிர்ப்பு சக்திகளுக்கு எதிராக சிறிய அளவிலான ஆன்டிபாடிகளை உற்பத்தி செய்வதற்கு மட்டுமே வரையறுக்கப்பட்ட ஹைப்ரிடோமா தொழில்நுட்பத்தை விட பேஜ் டிஸ்ப்ளே தொழில்நுட்பம் பரவலாகப் பயன்படுத்தப்படுகிறது. இதற்கு நேர்மாறாக, பேஜ் டிஸ்ப்ளே தொழில்நுட்பம் பல்வேறு நோயெதிர்ப்பு இனங்களிலிருந்து பெறப்பட்ட முழு ஆன்டிபாடி நூலகத்தையும் வழங்க முடியும்.

பேஜ் டிஸ்ப்ளே தொழில்நுட்பம், நோய்க்கிருமி நுண்ணுயிரிகளின் ஏற்பிகளைத் திரையிடுதல், புரத தொடர்புகளை ஆய்வு செய்தல், செல்களுக்கு இடையே சமிக்ஞை பரிமாற்றத்தைக் கண்காணித்தல், விலங்கு நோய்களைக் கண்டறிதல் மற்றும் தடுப்பூசிகளை உருவாக்குதல் உள்ளிட்ட பல்வேறு துறைகளில் பரந்த அளவிலான பயன்பாடுகளைக் கொண்டுள்ளது.

பேஜ் டிஸ்ப்ளே தொழில்நுட்பம் ஏராளமான நன்மைகளை வழங்குகிறது மற்றும் பல்வேறு துறைகளில் பயன்படுத்தப்படலாம். இருப்பினும், பேஜ் டிஸ்ப்ளே முறையைப் பயன்படுத்தி மறுசீரமைப்பு ஆன்டிபாடிகளை உருவாக்குவதில் உள்ள முதன்மை சவால், செயல்முறையுடன் தொடர்புடைய சிக்கலான தன்மை மற்றும் செலவு ஆகும். இந்த அணுகுமுறை, விரும்பிய ஆன்டிபாடிகளை அடையாளம் காணவும் வகைப்படுத்தவும், நோயெதிர்ப்பு, உயிர்வேதியியல் மற்றும் உயிர் இயற்பியல் பகுப்பாய்வுகளுடன், பிறழ்வு, குளோனிங் மற்றும் வெளிப்பாடு உள்ளிட்ட மூலக்கூறு உயிரியல் நுட்பங்களை ஒருங்கிணைக்க வேண்டும்.

ஆன்டிஜென் விளக்கக்காட்சி மிக முக்கியமான இணைப்பாகும். ஆன்டிஜென் விளக்கக்காட்சியின் முறைகளில் முக்கியமாக நேரடி பூசப்பட்ட ஆன்டிஜென் விளக்கக்காட்சி, மறைமுக பூசப்பட்ட ஆன்டிஜென் விளக்கக்காட்சி, முழு செல் திரையிடல் மூலம் ஆன்டிஜென் விளக்கக்காட்சி, லிபோசோம்கள் மூலம் ஆன்டிஜென் விளக்கக்காட்சி, நானோ-பாஸ்போலிப்பிட் வட்டுகள் மற்றும் VLPகள் ஆகியவை அடங்கும்.

நேரடி பூச்சு முறை ஒப்பீட்டளவில் எளிமையானது, ஆனால் ஆன்டிஜென் இணக்கத்தை மாற்றுவது எளிது, மேலும் மறைமுக பூச்சு செயல்பாடு சிக்கலானது, ஆனால் இது ஆன்டிஜென் இணக்கத்தை பராமரிக்கவும் விளக்கக்காட்சி செயல்திறனை மேம்படுத்தவும் முடியும். செல் ஸ்கிரீனிங் உண்மையான காட்சியை உயிரியல் ரீதியாக உருவகப்படுத்த முடியும், ஆனால் குறிப்பிடப்படாத பிணைப்பில் சிக்கல் உள்ளது. நானோ-பாஸ்போலிப்பிட் வட்டு சிறிய அளவு, அதிக விநியோக திறன் மற்றும் நல்ல நிலைத்தன்மையைக் கொண்டுள்ளது; VLPகள் ஆன்டிஜெனுடன் இணைக்கப்படுகின்றன அல்லது ஆன்டிஜெனுடன் மூடப்பட்டிருக்கும், இது அதிக நோயெதிர்ப்புத் திறன் மற்றும் நல்ல பாதுகாப்பைக் கொண்டுள்ளது, மேலும் வலுவான நோயெதிர்ப்பு மறுமொழியைத் தூண்டும்.

செறிவு மிகக் குறைவாக இருந்தால், பேஜுடன் பிணைப்பு ஏற்படுவதற்கான வாய்ப்பு குறையும், இதன் விளைவாக திரையிடல் திறன் குறையும். மாறாக, அதிகப்படியான செறிவு குறிப்பிடப்படாத பிணைப்பின் நிகழ்தகவை அதிகரிக்கலாம், பின்னணி சமிக்ஞையை உயர்த்தலாம் மற்றும் நேர்மறை குளோன்களை அடையாளம் காண்பதைத் தடுக்கலாம்.

அதிக வெப்பநிலை, வலுவான அமிலம் மற்றும் காரத்தைத் தவிர்க்க லேசான பொருத்துதல் முறையைப் பின்பற்றலாம். ஆன்டிஜென் கட்டமைப்பிற்கு ஏற்படும் சேதத்தைக் குறைக்க மறைமுக பூச்சு முறை மற்றும் பயோட்டின்-ஸ்ட்ரெப்டாவிடின் அமைப்பு பயன்படுத்தப்பட்டன. ஆன்டிஜென் ஒரு சவ்வு புரதமாக இருந்தால், அதை அப்படியே செல்களின் மேற்பரப்பில் காட்டலாம் அல்லது நானோ-டிஸ்க் போன்ற சவ்வு சூழலை உருவகப்படுத்தப் பயன்படுத்தலாம், இதன் மூலம் அதன் இயற்கையான சவ்வு புரத இணக்கத்தை பராமரிக்கலாம்.

ELISA, Western Blotting (WB), மற்றும் Immunofluorescence (IF) போன்ற வழக்கமான பரிசோதனைகளுக்கு கூடுதலாக, சர்ஃபேஸ் பிளாஸ்மோன் ரெசோனன்ஸ் (SPR) மற்றும் பயோ-லேயர் இன்டர்ஃபெரோமெட்ரி (BLI) கண்டறிதல் நுட்பங்களைப் பயன்படுத்தி ஆன்டிபாடிகள் மற்றும் ஆன்டிஜென்களின் பிணைப்பு மற்றும் விலகல் செயல்முறைகளை நிகழ்நேரத்தில் கண்காணிக்க முடியும், இது தொடர்பு மற்றும் இயக்க அளவுருக்களை தீர்மானிக்க அனுமதிக்கிறது.

மனிதர்கள், எலிகள், எலிகள், முயல்கள், கோழிகள், ஒட்டகங்கள், அல்பாக்காக்கள், பசுக்கள், நாய்கள், செம்மறி ஆடுகள், குரங்குகள் மற்றும் சுறாக்கள் உட்பட, ஆனால் அவை மட்டும் அல்லாமல், பல்வேறு வகையான ஆன்டிபாடி-உற்பத்தி செய்யும் உயிரினங்களுக்கு உயர்-தொடர்பு மோனோக்ளோனல் ஆன்டிபாடிகளை உருவாக்க பேஜ் டிஸ்ப்ளே பயன்படுத்தப்படலாம்.

எலி ஆன்டிபாடி நூலகங்களின் கட்டுமான தொழில்நுட்பம் நன்கு நிறுவப்பட்டது, செலவு குறைந்ததாகும், மேலும் குறுகிய சோதனை காலத்தைக் கொண்டுள்ளது, இது ஆரம்ப ஆன்டிபாடி பரிசோதனை மற்றும் அடிப்படை ஆராய்ச்சிக்கு ஏற்றதாக அமைகிறது. முயல் ஆன்டிபாடிகள் வலுவான தொடர்பு மற்றும் தனித்துவத்தை வெளிப்படுத்துகின்றன, எலி ஆன்டிபாடிகளுடன் ஒப்பிடும்போது பரந்த எபிடோப் அங்கீகார வரம்புடன். மனித ஆன்டிபாடிகளை மனித ஆன்டிபாடி நூலகங்களிலிருந்து நேரடியாகப் பெறலாம், இதன் மூலம் மனித உடலுக்கு ஹீட்டோரோலாஜஸ் ஆன்டிபாடிகள் நிர்வகிக்கப்படும் போது ஏற்படக்கூடிய சாத்தியமான நோயெதிர்ப்பு எதிர்வினைகளைத் தவிர்க்கலாம். இந்த அணுகுமுறை மருந்து ஆராய்ச்சி மற்றும் வளர்ச்சியில், குறிப்பாக சிகிச்சை ஆன்டிபாடிகளை உருவாக்குவதில் குறிப்பிடத்தக்க மதிப்பைக் கொண்டுள்ளது.

விலங்கு நோயெதிர்ப்பு சக்திகள் பொதுவாக புரத ஆன்டிஜென், பாலிபெப்டைட் ஆன்டிஜென், நியூக்ளிக் அமில ஆன்டிஜென் மற்றும் நோய்க்கிருமி தொடர்பான ஆன்டிஜென் எனப் பிரிக்கப்படுகின்றன, அவற்றில் நோய்க்கிருமி தொடர்பான ஆன்டிஜென் வைரஸ் ஆன்டிஜென் (முழுமையான வைரஸ் துகள், வைரஸ் புரதம், வைரஸ் அல்லாத கட்டமைப்பு புரதம் போன்றவை), பாக்டீரியா ஆன்டிஜென் (முழுமையான பாக்டீரியா சாறு, செல் சுவர் கூறு, சுரக்கும் புரதம், நச்சு போன்றவை) மற்றும் ஒட்டுண்ணி ஆன்டிஜென் ஆகியவற்றை உள்ளடக்கியது.

நோயெதிர்ப்பு ஆன்டிஜென்களை மறுசீரமைப்பு புரதங்களுடன் மாற்றுவதன் மூலமும், தீயை அணைக்கும் வைரஸ் துகள்களை வைரஸ்களின் கட்டமைப்பு புரதங்களுடன் மாற்றுவதன் மூலமும் நோயெதிர்ப்பு சக்தியை சரிசெய்யவும். சோதனை வடிவமைப்பை சரிசெய்து நோயெதிர்ப்பு அளவை மாற்றவும்.

போவின் சீரம் அல்புமின் போன்ற கேரியர் புரதங்களுடன் ஆன்டிஜென்களை இணைப்பதன் மூலம் நோயெதிர்ப்புத் திறனை மேம்படுத்தலாம். கூடுதலாக, ஃபிராய்டின் துணை மற்றும் அலுமினிய துணை உள்ளிட்ட நோயெதிர்ப்புத் துணை மருந்துகள், உயிருள்ள நிலையில் வசிக்கும் நேரத்தை நீடிக்கவும், நோயெதிர்ப்பு செல்களின் செயல்படுத்தல் மற்றும் பெருக்கத்தைத் தூண்டவும், இதனால் நோயெதிர்ப்புத் திறனை மேம்படுத்தவும் பயன்படுத்தப்படலாம்.

ஒரு பேஜ் ஆன்டிபாடி நூலகம் என்பது ஆன்டிபாடிகளிலிருந்து மாறி பகுதி மரபணுக்களின் முழுமையான தொகுப்பை பேஜ் திசையன்களாக இணைத்து பேஜ்களின் மேற்பரப்பில் வெளிப்படுத்துவதன் மூலம் உருவாக்கப்பட்ட பல்வேறு பேஜ் ஆன்டிபாடிகளின் தொகுப்பாகும். இந்த செயல்முறை ஒரு பேஜ் ஆன்டிபாடி நூலகத்தை உருவாக்குகிறது.

பேஜ் காட்சிப்படுத்தலின் பொதுவான செயல்முறை பல முக்கிய படிகளை உள்ளடக்கியது: நோய்த்தடுப்பு செய்யப்பட்ட விலங்குகளிடமிருந்து புற இரத்த மோனோநியூக்ளியர் செல்களை (PBMC) பிரித்தெடுத்தல், மொத்த RNA ஐ தனிமைப்படுத்தி அதை நிரப்பு DNA (cDNA) ஆக மாற்றுதல், பாலிமரேஸ் சங்கிலி எதிர்வினை (PCR) தொழில்நுட்பத்தைப் பயன்படுத்தி இலக்கு மரபணுவைப் பெருக்குதல், இலக்கு மரபணுவை பேஜ் வெக்டராக குளோனிங் செய்தல் மற்றும் வெளிப்பாட்டிற்காக திசையனை ஒரு ஹோஸ்ட் செல்லாக மாற்றுதல். இந்த செயல்முறை ஒரு பேஜ் காட்சி நூலகத்தை உருவாக்குகிறது, இது உயர்-தொடர்பு ஆன்டிபாடிகளை விரைவாக அடையாளம் காண முடியும். பின்னர், இந்த நூலகம் தடுப்பூசிகள், சிகிச்சை மருந்துகள் மற்றும் கண்டறியும் வினைப்பொருட்களின் வளர்ச்சிக்கு ஒரு மதிப்புமிக்க வளமாக செயல்படும்.

ஆன்டிபாடி நூலகத்தின் மூலத்தின்படி, பேஜ் ஆன்டிபாடி நூலகங்களை நோயெதிர்ப்பு பேஜ் ஆன்டிபாடி நூலகங்கள் மற்றும் சொந்த பேஜ் ஆன்டிபாடி நூலகங்கள் என வகைப்படுத்தலாம். இந்த இரண்டு வகைகளுக்கும் இடையிலான முதன்மை வேறுபாடு விலங்குகளுக்கு தடுப்பூசி போடப்பட்டுள்ளதா என்பதில் உள்ளது. கூடுதலாக, சொந்த ஆன்டிபாடி நூலகங்களை அரை-தொகுப்பு அல்லது தொகுப்பு மூலம் உருவாக்க முடியும்.

ஆன்டிபாடி நூலகத்தின் தரத்தை மதிப்பிடுவதற்கு இரண்டு முதன்மை குறியீடுகள் உள்ளன: சேமிப்பு திறன் மற்றும் பன்முகத்தன்மை. அதிக சேமிப்பு திறன், அதிக பன்முகத்தன்மையுடன் இணைந்து, அதிக ஈடுபாடு மற்றும் தனித்தன்மை கொண்ட ஆன்டிபாடிகளின் பயனுள்ள திரையிடலை உறுதி செய்கிறது.

உயிரியல் நீக்கும் செயல்பாட்டில், காட்சி நூலகம் நிலையான இலக்குகளுடன் அடைகாக்கப்பட்டு, பின்னர் வினைபுரியாத பேஜ்களை அகற்ற விரிவாகக் கழுவப்படுகிறது. பொதுவாக அமில அல்லது அதிக உப்பு கரைசலைப் பயன்படுத்தி இணைவுகள் நீக்கப்பட்டு, பின்னர் செறிவூட்டலுக்காக பொருத்தமான ஹோஸ்ட் செல்களில் பெருக்கப்படுகின்றன. 3 முதல் 5 சுற்றுகள் திரையிடலுக்குப் பிறகு, அதிக ஈடுபாடு கொண்ட ஆன்டிபாடிகள் பெறப்படுகின்றன.

பேஜ் ஸ்கிரீனிங் முறைகளில் முதன்மையாக திட-கட்ட பேனிங், திரவ-கட்ட ஸ்கிரீனிங் மற்றும் செல் அடிப்படையிலான ஸ்கிரீனிங் ஆகியவை அடங்கும். பொருத்தமான ஸ்கிரீனிங் முறையைத் தேர்ந்தெடுப்பது இலக்கு மூலக்கூறுகளின் பண்புகள், ஸ்கிரீனிங் செயல்முறையின் நோக்கங்கள் மற்றும் ஆய்வக சூழலைக் கருத்தில் கொள்ள வேண்டும்.

இலக்கு புரதங்களுடன் பிணைக்கும் பேஜ் ஆன்டிபாடிகளை பரிசோதிப்பதற்கான மிக அடிப்படையான முறை நேர்மறை பரிசோதனை ஆகும். எதிர்மறை பரிசோதனை குறிப்பிடப்படாத ஆன்டிபாடிகளை அகற்ற உதவுகிறது. பேஜ் ஆன்டிபாடி பரிசோதனை செயல்முறையின் போது, ​​இலக்கு ஆன்டிஜென் லேபிள், பொருட்கள் அல்லது இலக்கு ஆன்டிஜெனுடன் கட்டமைப்பு ஒற்றுமைகள் கொண்ட பிற ஆன்டிஜென்களின் குறுக்கீடு காரணமாக குறிப்பிடப்படாத ஆன்டிபாடிகள் அடையாளம் காணப்படலாம். இதுபோன்ற சந்தர்ப்பங்களில், எதிர்மறை பரிசோதனை திரையிடல் செயல்முறையின் செயல்திறனை மேம்படுத்தும்.

ஆன்டிபாடி சரிபார்ப்புக்கான முறைகளில் பொதுவாக ELISA, வெஸ்டர்ன் பிளாட்டிங் (WB), ஃப்ளோ சைட்டோமெட்ரி, இம்யூனோபிரசிபிட்டேஷன் (IP), இம்யூனோஃப்ளோரசன்ஸ் (IF), இம்யூனோஹிஸ்டோ கெமிஸ்ட்ரி மற்றும் பல்வேறு பிற சோதனை நுட்பங்கள் அடங்கும். ஆல்ஃபா லைஃப்டெக் ஆன்டிபாடி கண்டறிதலில் விரிவான அனுபவத்தைக் கொண்டுள்ளது மற்றும் அடுத்தடுத்த சோதனைகளில் ஆன்டிபாடிகளின் செயல்திறனை உறுதி செய்யும் ஒரு தொழில்முறை பரிசோதனைக் குழுவைக் கொண்டுள்ளது.