ஆன்டிபாடி இன்ஜினியரிங் என்றால் என்ன?

ஆன்டிபாடி பொறியியலின் உதவியுடன், ஆன்டிபாடிகளின் மூலக்கூறு அளவு, மருந்தியல் இயக்கவியல், நோயெதிர்ப்புத் தன்மை, பிணைப்பு நாட்டம், தனித்தன்மை மற்றும் விளைவுச் செயல்பாடு ஆகியவற்றை மாற்றியமைப்பது சாத்தியமாகியுள்ளது. ஆன்டிபாடிகளைத் தொகுத்த பிறகு, அவற்றின் குறிப்பிட்ட பிணைப்புத் திறன், மருத்துவ நோயறிதல் மற்றும் சிகிச்சையில் அவற்றை மிகவும் மதிப்புமிக்கதாக ஆக்குகிறது. ஆன்டிபாடி பொறியியல் மூலம், மருந்து மற்றும் நோயறிதல் ஆரம்பகட்ட வளர்ச்சியின் தேவைகளை அவற்றால் பூர்த்தி செய்ய முடியும்.

சிகிச்சைக்கான ஆன்டிபாடிகளின் உற்பத்திக்கு அடித்தளமிடும் வகையில், இயற்கையான ஆன்டிபாடிகளால் அடைய முடியாத, மிகவும் குறிப்பிட்ட மற்றும் நிலையான செயல்பாடுகளை வடிவமைத்து உருவாக்குவதே ஆன்டிபாடி பொறியியலின் நோக்கமாகும்.

ஆன்டிபாடி பொறியியலில் தனது விரிவான திட்ட அனுபவத்துடன், ஆல்ஃபா லைஃப்டெக் பல இனங்களுக்கான தனிப்பயனாக்கப்பட்ட மோனோக்ளோனல் மற்றும் பாலிக்ளோனல் ஆன்டிபாடி சேவைகளையும், ஃபேஜ் டிஸ்ப்ளே ஆன்டிபாடி லைப்ரரி கட்டுமானம் மற்றும் ஸ்கிரீனிங் சேவைகளையும் வழங்குகிறது. திறமையான, அதிகத் தனித்தன்மை வாய்ந்த மற்றும் நிலையான ஆன்டிபாடிகளை உற்பத்தி செய்வதற்காக, ஆல்ஃபா லைஃப்டெக் வாடிக்கையாளர்களுக்குத் தரமான பயோசிமிலர் ஆன்டிபாடிகள் மற்றும் ரீகாம்பினன்ட் புரதப் பொருட்களையும், அதற்கான சேவைகளையும் வழங்குகிறது. விரிவான ஆன்டிபாடி, புரதத் தளங்கள் மற்றும் ஃபேஜ் டிஸ்ப்ளே அமைப்புகளைப் பயன்படுத்துவதன் மூலம், ஆன்டிபாடி உற்பத்தியின் மேல்நிலை மற்றும் கீழ்நிலையை உள்ளடக்கிய சேவைகளை நாங்கள் வழங்குகிறோம்; இதில் ஆன்டிபாடி ஹியூமனைசேஷன், ஆன்டிபாடி சுத்திகரிப்பு, ஆன்டிபாடி சீக்வென்சிங் மற்றும் ஆன்டிபாடி சரிபார்ப்பு போன்ற தொழில்நுட்ப சேவைகளும் அடங்கும்.

ஆன்டிபாடி பொறியியலின் முன்னோடி நிலை இரண்டு தொழில்நுட்பங்களுடன் தொடர்புடையது:

மறுசேர்க்கை டிஎன்ஏ தொழில்நுட்பம்

--ஹைப்ரிடோமா தொழில்நுட்பம்

ஆன்டிபாடி பொறியியலின் விரைவான வளர்ச்சி மூன்று முக்கியமான தொழில்நுட்பங்களுடன் தொடர்புடையது:

மரபணு நகலாக்கத் தொழில்நுட்பம் மற்றும் பாலிமரேஸ் சங்கிலி வினை

புரத வெளிப்பாடு: ஈஸ்ட், கோல் வடிவ வைரஸ்கள் மற்றும் தாவரங்கள் போன்ற வெளிப்பாட்டு அமைப்புகள் மூலம் மறுசேர்க்கை புரதங்கள் உற்பத்தி செய்யப்படுகின்றன.

கணினி உதவியுடன் கூடிய கட்டமைப்பு வடிவமைப்பு

கலப்பின ஆன்டிபாடிகளை உற்பத்தி செய்வதற்காக, முதல் தலைமுறை ஆன்டிபாடிகள் மனிதமயமாக்கப்பட்டன; இதில், எலி மோனோகுளோனல் ஆன்டிபாடிகளின் மாறுபடும் பகுதியானது, மனித IgG மூலக்கூறுகளின் மாறாத பகுதியுடன் இணைக்கப்பட்டது. இரண்டாம் தலைமுறை எலி மோனோகுளோனல் ஆன்டிபாடியின் ஆன்டிஜென் பிணைப்புப் பகுதி (CDR) மனித IgG-க்குள் இடமாற்றம் செய்யப்பட்டது. CDR பகுதியைத் தவிர, மற்ற அனைத்து ஆன்டிபாடிகளும் ஏறக்குறைய மனித ஆன்டிபாடிகளாகவே உள்ளன. மேலும், மனித சிகிச்சைக்கு எலி குளோன் ஆன்டிபாடிகளைப் பயன்படுத்தும்போது, ​​மனித எலி எதிர்ப்பு ஆன்டிபாடி (HAMA) எதிர்வினைகளைத் தூண்டுவதைத் தவிர்க்க முயற்சிகள் மேற்கொள்ளப்பட்டன.

 

ஒரு ஃபேஜ் டிஸ்ப்ளே லைப்ரரியை உருவாக்க, ஆன்டிபாடிகளைக் குறியிடும் மரபணுக்களைப் பெறுவதே முதல் படியாகும். இவற்றை நோய்த்தடுப்பு செய்யப்பட்ட விலங்குகளின் B செல்களிலிருந்து பிரித்தெடுக்கலாம் (நோய்த்தடுப்பு லைப்ரரி உருவாக்கம்), நோய்த்தடுப்பு செய்யப்படாத விலங்குகளிலிருந்து நேரடியாகப் பிரித்தெடுக்கலாம் (இயற்கை லைப்ரரி உருவாக்கம்), அல்லது ஆன்டிபாடி மரபணுத் துண்டுகளுடன் இன் விட்ரோ முறையில் ஒன்றிணைக்கலாம் (செயற்கை லைப்ரரி உருவாக்கம்). பின்னர், அந்த மரபணுக்கள் PCR மூலம் பெருக்கப்பட்டு, பிளாஸ்மிட்களில் செருகப்பட்டு, பொருத்தமான ஹோஸ்ட் அமைப்புகளில் வெளிப்படுத்தப்படுகின்றன (ஈஸ்ட் வெளிப்பாடு (பொதுவாக பிச்சியா பாஸ்டோரிஸ்), புரோகேரியோடிக் வெளிப்பாடு (பொதுவாக ஈ. கோலை), பாலூட்டி செல் வெளிப்பாடு, தாவர செல் வெளிப்பாடு, மற்றும் கோல் வடிவ வைரஸ்களால் பாதிக்கப்பட்ட பூச்சி செல் வெளிப்பாடு). மிகவும் பொதுவானது ஈ. கோலை வெளிப்பாடு அமைப்பாகும், இது ஒரு குறிப்பிட்ட குறியீட்டு ஆன்டிபாடி வரிசையை ஃபேஜில் ஒருங்கிணைத்து, ஃபேஜ் ஷெல் புரதங்களில் ஒன்றை (pIII அல்லது pVIII) குறியிடுகிறது. இந்த மரபணு இணைவு, பாக்டீரியோஃபேஜ்களின் மேற்பரப்பில் வெளிப்படுத்தப்படுகிறது. இந்தத் தொழில்நுட்பத்தின் மையமானது ஒரு ஃபேஜ் டிஸ்ப்ளே லைப்ரரியை உருவாக்குவதாகும், இது இயற்கை லைப்ரரிகளை விட ஒரு குறிப்பிட்ட பிணைப்பைக் கொண்டிருக்க முடியும் என்ற நன்மையைக் கொண்டுள்ளது. அதனைத் தொடர்ந்து, ஆன்டிஜென் பிரத்தியேகத்தன்மை கொண்ட ஆன்டிபாடிகள் ஒரு உயிரியல் தேர்வு செயல்முறையின் மூலம் சல்லடை செய்யப்படுகின்றன, இலக்கு ஆன்டிஜென்கள் நிலைப்படுத்தப்படுகின்றன, பிணைக்கப்படாத ஃபேஜ்கள் மீண்டும் மீண்டும் கழுவி அகற்றப்படுகின்றன, மேலும் மேலும் செறிவூட்டுவதற்காக பிணைக்கப்பட்ட ஃபேஜ்களும் கழுவி அகற்றப்படுகின்றன. மூன்று அல்லது அதற்கு மேற்பட்ட சுற்று மறுசெயல்களுக்குப் பிறகு, உயர் பிரத்தியேகத்தன்மை மற்றும் உயர் ஈர்ப்புத்திறன் கொண்ட ஆன்டிபாடிகள் தனிமைப்படுத்தப்படுகின்றன.

படம் 3: ஆன்டிபாடி லைப்ரரி கட்டுமானம் மற்றும் திரையிடல்

மறுசேர்க்கை டிஎன்ஏ தொழில்நுட்பத்தைப் பயன்படுத்தி ஆன்டிபாடி துண்டுகளை உருவாக்க முடியும். ஃபேப் ஆன்டிபாடிகள் ஆரம்பத்தில் இரைப்பை புரோட்டியேஸால் மட்டுமே நீராற்பகுக்கப்பட்டு (ஃபேப்')2 துண்டுகளை உருவாக்குகின்றன, அவை பின்னர் பாப்பைனால் செரிக்கப்பட்டு தனித்தனி ஃபேப் துண்டுகளை உருவாக்குகின்றன. Fv துண்டானது VH மற்றும் VL-ஐக் கொண்டுள்ளது, இதில் டைசல்பைடு பிணைப்புகள் இல்லாததால் நிலைத்தன்மை குறைவாக உள்ளது. எனவே, VH மற்றும் VL ஆகியவை 15-20 அமினோ அமிலங்களைக் கொண்ட ஒரு குறுகிய பெப்டைடு மூலம் ஒன்றாக இணைக்கப்பட்டு, சுமார் 25KDa மூலக்கூறு எடையுடன் கூடிய ஒற்றைச் சங்கிலி மாறுபடும் துண்டு (scFv) ஆன்டிபாடியை உருவாக்குகின்றன.

ஒட்டகக் குடும்ப விலங்குகளில் (ஒட்டகம், லியாமா மற்றும் அல்பாகா) உள்ள ஆன்டிபாடிகளின் கட்டமைப்பை ஆய்வு செய்ததில், ஆன்டிபாடிகள் கன சங்கிலிகளை மட்டுமே கொண்டுள்ளன, இலகு சங்கிலிகளைக் கொண்டிருக்கவில்லை என்பது தெரியவந்துள்ளது. எனவே, அவை கன சங்கிலி ஆன்டிபாடிகள் (hcAb) என்று அழைக்கப்படுகின்றன. கன சங்கிலி ஆன்டிபாடிகளின் மாறுபடும் பகுதி, ஒற்றைப் பகுதி ஆன்டிபாடிகள் அல்லது நானோபாடிகள் அல்லது VHH என்று அழைக்கப்படுகிறது, இதன் அளவு 12-15 kDa ஆகும். ஒற்றை அலகுகளாக, இவற்றில் டைசல்பைட் பிணைப்புகள் இல்லை, மேலும் இவை மிகவும் நிலையானவையாகவும், ஆன்டிஜென்களுடன் மிக அதிக ஈர்ப்பைக் கொண்டவையாகவும் உள்ளன.

படம் 5: கன சங்கிலி ஆன்டிபாடி மற்றும் VHH/ நானோபாடி

செல்சாரா வெளிப்பாடு என்பது, பொதுவாக ஈ. கோலை வெளிப்பாடு அமைப்பைப் பயன்படுத்தி, ஆய்வகச் சூழலில் புரதத் தொகுப்பை அடைவதற்காக இயற்கை அல்லது செயற்கை டி.என்.ஏ-வின் வெளிப்பாட்டைப் பயன்படுத்துவதாகும். இது புரதங்களை விரைவாக உற்பத்தி செய்வதோடு, உயிருள்ள உயிரினங்களுக்குள் அதிக அளவில் மறுசேர்க்கைப் புரதங்களை உற்பத்தி செய்யும்போது செல்களுக்கு ஏற்படும் வளர்சிதை மாற்ற மற்றும் செல்நச்சுச் சுமையையும் தவிர்க்கிறது. மொழிபெயர்ப்பிற்குப் பிறகு மாற்றுவதற்குக் கடினமானவை அல்லது சவ்வுப் புரதங்களைத் தொகுப்பதற்குக் கடினமானவை போன்ற, தொகுப்பதற்குச் சிக்கலான புரதங்களையும் இதனால் உற்பத்தி செய்ய முடியும்.