மோனோக்ளோனல் ஆன்டிபாடி மேம்பாட்டு சேவை
ஆல்பா லைஃப்டெக் இன்க்.எபிடோப் கணிப்பு, பெப்டைட் தொகுப்பு, புரத வெளிப்பாடு, பாலிகுளோனல் அல்லது மோனோகுளோனல் ஆன்டிபாடி உற்பத்தி மற்றும் செல் கலாச்சாரம், ஆஸ்கைட்ஸ் திரவம் அல்லது முழு சீரம் ஆகியவற்றிலிருந்து ஆன்டிபாடி சுத்திகரிப்பு ஆகியவற்றை வழங்க முடியும்.
ஆல்பா லைஃப்டெக் இன்க்.ஹைப்ரிடோமா செல்கள், ஜீனோம் எடிட்டிங் செல் லைன்கள், நாக் டவுன் செல் லைன்கள் மற்றும் ஓவர் எக்ஸ்பிரஷன் செல் லைன்கள் உள்ளிட்ட பல்வேறு நிலையான செல் லைன் சேவைகளை வாடிக்கையாளர்களுக்கு வழங்குவதில் அனுபவம் வாய்ந்தது. ஒவ்வொரு வாடிக்கையாளருக்கும் மேம்பட்ட தனிப்பயன் செல் லைன் சேவைகளை வழங்க நாங்கள் முயற்சிக்கிறோம், மேலும் எங்கள் சேவைகள் நிரூபிக்கப்பட்டவை மற்றும் நம்பகமானவை.
ஆன்டிபாடி மேம்பாட்டு உத்தி

1. ஆன்டிஜென் வடிவமைப்பு மற்றும் தயாரிப்பு
இந்த ஆன்டிஜென்கள் புரதங்கள், பெப்டைடுகள் அல்லது பிற மூலக்கூறுகளாக இருக்கலாம். இம்யூனோஜென்களை வடிவமைப்பதற்கு ஆன்டிஜென் அமைப்பு, இம்யூனாலஜி மற்றும் விநியோக அமைப்புகள் பற்றிய அறிவை ஒருங்கிணைக்கும் ஒரு விரிவான அணுகுமுறை தேவைப்படுகிறது. தேவைப்படும் வாடிக்கையாளர்களுக்கு இம்யூனோஜென்களை வடிவமைக்கக்கூடிய ஆன்டிஜென் வடிவமைப்பு தொழில்நுட்பத்தை ஆல்ஃபா லைஃப்டெக் கொண்டுள்ளது.
ஆல்ஃபா லைஃப்டெக் வாடிக்கையாளர்கள் தேர்வு செய்ய மறுசீரமைப்பு புரத தயாரிப்புகளை வழங்குகிறது. ஆராய்ச்சிக்குத் தேவையான மறுசீரமைப்பு புரதங்களை உற்பத்தி செய்ய, ஈ. கோலை வெளிப்பாடு அமைப்பு, ஈஸ்ட் வெளிப்பாடு அமைப்பு, பாகுலோவைரஸ்-பூச்சி வெளிப்பாடு அமைப்பு, பாலூட்டி வெளிப்பாடு அமைப்பு போன்ற பல்வேறு புரத வெளிப்பாடு அமைப்புகள் எங்களிடம் உள்ளன.
2. விலங்கு நோய்த்தடுப்பு
ஆல்ஃபா லைஃப்டெக் வாடிக்கையாளர்களுக்கு நோய் எதிர்ப்பு சக்தியை வழங்க முடியும், மேலும் எலிகள், முயல்கள், செம்மறி ஆடுகள், அல்பாக்காக்கள், கினிப் பன்றிகள், வெள்ளெலிகள் போன்ற நோய் எதிர்ப்பு சக்தி கொண்ட விலங்குகளை நீங்கள் தேர்வுசெய்யக் கிடைக்கின்றன.
3. மோனோக்ளோனல் ஆன்டிபாடி உற்பத்தி முறைகள்
●ஹைப்ரிடோமா தொழில்நுட்பத்தால் மாப்ஸ் உற்பத்தி
ஹைப்ரிடோமா என்பது இரண்டு வகையான செல்கள், அதாவது மவுஸ் மைலோமா செல் கோடு மற்றும் பிளாஸ்மா செல்கள் (லிம்போசைட் பி) ஆகியவற்றின் இணைப்பால் உற்பத்தி செய்யப்படும் ஒரு கலப்பின செல் ஆகும், இதில் ஹெட்டோரோசைகஸ் செல் இன் விட்ரோவில் ஆர்வமுள்ள ஆன்டிஜெனுக்கு எதிராக தொடர்ச்சியான ஆன்டிபாடிகளை உருவாக்க முடியும். ஒரு ஹைப்ரிடோமா செல் கோட்டின் உற்பத்தி மூன்று பகுதிகளைக் கொண்டுள்ளது: ஆன்டிஜென் வடிவமைப்பு (ஹாப்டென்ஸ், சிறிய மூலக்கூறுகள் மற்றும் பெப்டைடுகள்), விலங்கு நோய்த்தடுப்பு, செல் இணைவு மற்றும் நேர்மறை குளோன் திரையிடல். தனித்துவமான நோய்த்தடுப்பு முறைகளைப் பயன்படுத்தி, விதிவிலக்காக அதிக செல்-இணைவு செயல்திறன் (ஆயிரம் பி செல்களுக்கு 1-10 ஹைப்ரிடோமாக்கள்) மற்றும் உயர் ஆன்டிபாடி டைட்டர்களைப் பெறுகிறோம், உயிர்வேதியியல் திரையிடல், இன்-விட்ரோ செல் அடிப்படையிலான மதிப்பீடுகள் மற்றும் விலங்கு ஆய்வுகள் உள்ளிட்ட அடுத்தடுத்த பகுப்பாய்வு சோதனைகளில் எங்கள் வெற்றி விகிதத்தை அதிகரிக்கிறது.
●பேஜ் டிஸ்ப்ளே தொழில்நுட்பம் மூலம் மாப்ஸ் உற்பத்தி
பேஜ் டிஸ்ப்ளே மோனோக்ளோனல் ஆன்டிபாடிகளை உருவாக்குவதற்கான மற்றொரு முறையை வழங்குகிறது. பி-லிம்போசைட்டுகள் விலங்குகளின் இரத்தத்திலிருந்து தனிமைப்படுத்தப்பட்டு அவற்றின் mRNA பிரித்தெடுக்கப்படுகிறது. PCR மூலம், இந்த mRNA cDNA ஆக மாற்றப்படுகிறது, இது அனைத்து VH மற்றும் VL பிரிவுகளையும் பெருக்குகிறது. இந்த பிரிவுகள் பின்னர் ஒரு திசையனாக குளோன் செய்யப்படுகின்றன, பொதுவாக ஒற்றை-சங்கிலி மாறி துண்டுகளாக (scFv), ஒரு பாக்டீரியோபேஜின் PIII புரதத்துடன். பின்னர், இந்த கட்டமைப்பு E. coli ஐ பாதிக்கப் பயன்படுகிறது, இதன் விளைவாக ஒரு உதவி phage உடன் தடுப்பூசி மூலம் தோராயமாக 10^10 செல்களைக் கொண்ட ஒரு நூலகம் உருவாக்கப்படுகிறது. பின்னர் E. coli அதன் மேலங்கியின் ஒரு பகுதியாக VH மற்றும் VL பிரிவுகளைக் கொண்ட பாக்டீரியோபேஜை சுரக்க முடியும். இதைத் தொடர்ந்து, ஆர்வமுள்ள ஆன்டிஜெனை இலக்காகக் கொண்ட குறிப்பிட்ட VH மற்றும் VL பிரிவுகளைத் தேர்ந்தெடுத்து, E. coli ஐ பாக்டீரியோபேஜுடன் மீண்டும் தடுப்பூசி போட பயன்படுத்தலாம். பிளாஸ்மிட் கொண்ட செல்கள் பின்னர் தனிமைப்படுத்தப்பட்டு வரிசைப்படுத்தப்படுகின்றன.
4.ஃப்யூஷன் ஸ்கிரீனிங்
●செல் இணைவு மற்றும் தேர்வு
அறுவடை செய்யப்பட்ட B செல்கள் பின்னர் மைலோமா செல்களுடன் இணைக்கப்படுகின்றன, அவை கலாச்சாரத்தில் காலவரையின்றி பெருகக்கூடிய புற்றுநோய் செல்கள். பாலிஎதிலீன் கிளைக்கால் (PEG) இணைவு போன்ற ஒரு நுட்பத்தைப் பயன்படுத்தி இணைவு பொதுவாக அடையப்படுகிறது.
இணைவுக்குப் பிறகு, கலப்பின செல்கள் தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட ஊடகத்தில் வளர்க்கப்படுகின்றன, இது கலப்பினங்கள் மட்டுமே உயிர்வாழ அனுமதிக்கிறது. இந்த ஊடகத்தில் பொதுவாக அமினோப்டெரின் உள்ளது, இது இணைக்கப்படாத மைலோமா செல்களின் வளர்ச்சியைத் தடுக்கிறது.
●திரையிடல் மற்றும் நீட்டித்தல்
இதன் விளைவாக வரும் கலப்பின செல்கள் இலக்கு ஆன்டிஜெனுக்கு குறிப்பிட்ட ஆன்டிபாடிகளின் உற்பத்திக்காக சோதிக்கப்படுகின்றன. இது பொதுவாக நொதி-இணைக்கப்பட்ட இம்யூனோசார்பன்ட் அஸே (ELISA), வெஸ்டர்ன் ப்ளாட், இம்யூனோபிரசிபிட்டேஷன் மற்றும் ஃப்ளோ சைட்டோமெட்ரி போன்ற நுட்பங்களைப் பயன்படுத்தி செய்யப்படுகிறது.
ஆன்டிபாடியை உருவாக்கும் ஹைப்ரிடோமா செல்கள் அடையாளம் காணப்பட்டவுடன், அவை ஒரே மாதிரியான செல்களின் எண்ணிக்கையை உருவாக்க குளோன் செய்யப்படுகின்றன. இது ஒவ்வொரு ஹைப்ரிடோமா செல்லாலும் உற்பத்தி செய்யப்படும் ஆன்டிபாடி ஒரே மாதிரியாக இருப்பதை உறுதி செய்கிறது.
5. ஆன்டிபாடி செயல்பாட்டு சரிபார்ப்பு
ஆல்ஃபா லைஃப்டெக், மோனோக்ளோனல் ஆன்டிபாடிகளை வகைப்படுத்தவும், ஆன்டிபாடி தனித்தன்மை, தொடர்பு மற்றும் செயல்பாட்டை உறுதிப்படுத்தவும், மேற்கத்திய பிளாட்டிங், இம்யூனோஹிஸ்டோ கெமிஸ்ட்ரி அல்லது செயல்பாட்டு மதிப்பீடுகள் போன்ற ஆன்டிபாடி செயல்பாட்டு சரிபார்ப்பை வழங்குகிறது.
6. ஆன்டிபாடி உகப்பாக்கம்
புரதம் A அல்லது புரதம் G இணைப்பு குரோமடோகிராபி மற்றும் ஆல்பா லைஃப்டெக் போன்ற நுட்பங்களைப் பயன்படுத்தி வளர்ப்பு சூப்பர்நேட்டண்டிலிருந்து ஆன்டிபாடிகளை சுத்திகரித்தல், ஆன்டிபாடி உறவை மேம்படுத்த ஆன்டிபாடி மாற்ற முறைகளையும் வழங்க முடியும்.
7. ஆன்டிபாடி உற்பத்தி
ஆல்பா லைஃப்டெக் உயர்-செயல்திறன் ஸ்கிரீனிங் பயன்பாடுகள் மற்றும் பெரிய அளவிலான உற்பத்திக்கான வேட்பாளர் ஆன்டிபாடிகளை மதிப்பீடு செய்ய முடியும்.
- 1
சரியான இணைவு கலப்பினத்தை எவ்வாறு தேர்வு செய்வது?
இணைவு செயல்பாட்டின் போது, 10-15 96-கிணறு மைக்ரோடைட்டர் தகடுகள் இணைவு கலப்பின கலவையுடன் விதைக்கப்படுகின்றன. ஒவ்வொரு தகடும் HAT-IMDM தேர்வு ஊடகத்திற்கு உணவளிக்கப்பட்டு 37 டிகிரி செல்சியஸில் கார்பன் டை ஆக்சைடு இன்குபேட்டரில் பராமரிக்கப்படுகிறது. இணைவுக்கு 9 - 14 நாட்களுக்குப் பிறகு, கலப்பின சூப்பர்நேட்டண்டுகள் ஆர்வமுள்ள குறிப்பிட்ட ஆன்டிபாடியின் இருப்புக்காக சோதிக்கப்படுகின்றன.
- 2
தேர்வு செயல்திறனை எவ்வாறு மேம்படுத்துவது?
பிளாஸ்மா செல்கள் அவற்றின் மைலோமா சகாக்களுடன் இணைவது 100% செயல்திறன் மிக்கதாக இல்லை. உகந்த நிலைமைகள் மற்றும் மிகவும் பயனுள்ள தூண்டுதலின் கீழ் கூட, செல் இணைவு இன்னும் பிரிக்கப்பட வேண்டிய கலக்காத மற்றும் கலக்காத செல்களின் கலவையை உருவாக்குகிறது. தேர்வு செயல்முறையின் செயல்திறனை மேம்படுத்த, இணைவுக்குப் பயன்படுத்தப்படும் மைலோமா செல்களில் நியூக்ளியோடைடு காப்புப் பாதையில் ஒரு முக்கிய நொதியான HGPRT இல்லை. பின்னர் கலவை ஒரு HAT ஊடகத்தில் வளர்க்கப்பட்டது, அங்கு HGPRT நொதியைக் கொண்ட செல்கள், பிளாஸ்மா செல்களிலிருந்து HGPRT ஐப் பெற்ற கலப்பினங்கள் மட்டுமே சாத்தியமானவை.
- 3
ஆன்டிபாடி செயல்பாட்டிற்காக ஹைப்ரிடோமா செல் கோடுகளை எவ்வாறு திரையிடுவது?
கலப்பின வகைகளின் மதிப்பீடு ஒரு முக்கியமான படியாகும். வழக்கமாக, கலப்பின, குளோன் மற்றும் சப்குளோன் சூப்பர்நேட்டன்ட் ஸ்கிரீனிங் என்சைம்-இணைக்கப்பட்ட இம்யூனோசார்பன்ட் அஸே (ELISA), வெஸ்டர்ன் பிளட் அஸே மற்றும் ஃப்ளோரசன்ஸ் ஆக்டிவேட்டட் செல் சார்ட்டிங் (FACS) மூலம் வழங்கப்படுகிறது. சூப்பர்நேட்டன்ட்டின் அனைத்து ஸ்கிரீனிங்கையும் எங்கள் சொந்த ஆய்வகத்தில் நடத்த நாங்கள் தேர்வு செய்வோம்.
- 4
ஆன்டிபாடி செயல்பாட்டு பரிசோதனையை எவ்வாறு நடத்துவது என்பது குறித்த விரிவான வழிமுறைகளை வழங்கவா?
பரிசோதிக்கப்பட வேண்டிய ஹைப்ரிடோமா சூப்பர்னேட்டுகள் 500 முதல் 1,440 மாதிரிகள் வரை இருக்கலாம், மேலும் 9-14 நாட்களுக்குள் சோதனைக்குத் தயாராக இருக்கும். நாம் மூன்று முதல் ஐந்து நாட்களுக்குள் எழலாம் அல்லது அனைத்தும் ஒரே நாளில் தயாராக இருக்கலாம், எனவே வாடிக்கையாளர் ஆய்வகம் வாரங்களுக்கு முன்பே தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட குறிப்பிட்ட இரண்டாம் நிலை ஸ்கிரீனிங் மதிப்பீடுகளுடன் தயாராக இருப்பது முக்கியம்.
- 5
நேர்மறை கலப்பினங்களை ஏன் துணை குளோன் செய்ய வேண்டும்?
ஆரம்ப ELISA ஸ்கிரீனிங் நடைமுறையின் போது நேர்மறை கிணறுகள் கண்டறியப்பட்ட பிறகு, துணைக் குளோனிங் செயல்முறைக்குத் தயாராவதற்காக, ஹைப்ரிடோமாக்கள் ஒரு பெரிய அளவிற்கு, அதாவது 24-கிணறு தகடுகளுக்கு மாற்றப்பட்டன. நிலையான மோனோக்ளோன்களின் தனிமைப்படுத்தலை உறுதி செய்வதற்காக ஹைப்ரிடோமாக்களின் துணைக் குளோனிங் பொதுவாக வரையறுக்கப்பட்ட நீர்த்த முறையால் செய்யப்படுகிறது. இந்த நுட்பத்தில் ஹைப்ரிடோமா கலாச்சாரங்களை நீர்த்துப்போகச் செய்து, மோனோக்ளோனாலிட்டியை (ஒரு கிணற்றுக்கு ஒரு செல்) அடைய 96-கிணறு தகடுகளாக சிதறடிப்பது அடங்கும். கலப்பு ஹைப்ரிடோமா மக்கள்தொகையை உருவாக்கும் அபாயத்தைக் குறைக்க குறைந்தது இரண்டு வரையறுக்கப்பட்ட நீர்த்தங்கள் செய்யப்பட வேண்டும்.
- 6
ஆன்டிபாடி கண்டுபிடிப்புக்கு ஹைப்ரிடோமா தொழில்நுட்பத்தைப் பயன்படுத்துவதன் நன்மைகள் என்ன?
கலப்பின செல் வரிசைகள், மிகவும் செலவு குறைந்த முறையில் அதிக ஈடுபாடு, நிலைத்தன்மை மற்றும் தனித்தன்மை கொண்ட ஆன்டிபாடிகளை உருவாக்கும் திறனுக்காகப் பாராட்டப்பட்டுள்ளன.

எலி மோனோக்ளோனல் ஆன்டிபாடி தயாரிப்பு சேவை
உலகளாவிய விஞ்ஞானிகளுக்கு எலி கலப்பினத்தின் முழு சேவையையும் ஆல்பா லைஃப்டெக் வழங்க முடியும். இந்த சேவைகளில் ஆன்டிஜென் வடிவமைப்பு/தொகுப்பு, எலிகள் நோய்த்தடுப்பு, செல் இணைவு மற்றும் கலப்பின தேர்வு/பண்புகள் ஆகியவை அடங்கும், இதன் மூலம் நாம் ஒவ்வொரு திட்டத்திலும் நிபுணத்துவம் பெறலாம்.
மேலும் படிக்கவும்
முயல் மோனோக்ளோனல் ஆன்டிபாடி உற்பத்தி சேவை
ஆல்ஃபா லைஃப்டெக் ஆன்டிபாடிகள் துறையில் பல வருட அனுபவத்தைக் கொண்டுள்ளது மற்றும் ஒரு விரிவான முயல் மோனோக்ளோனல் ஆன்டிபாடி மேம்பாட்டு தளத்தை உருவாக்கியுள்ளது.
மேலும் படிக்கவும்


2018-07-16 

