புரதம்-புரதம் தொடர்பு பகுப்பாய்வு சேவை

பல்வேறு வாடிக்கையாளர்களின் சோதனைத் தேவைகளைப் பூர்த்தி செய்ய, ஆல்பா லைஃப்டெக் வாடிக்கையாளர்களுக்கு புரத மதிப்பீடுகள், புரத தொடர்பு பகுப்பாய்வு, புரத-புரத தொடர்பு மதிப்பீடு (CO-IP, வெஸ்டர்ன் பிளாட், குரோமாடின் இம்யூனோபிரசிபிட்டேஷன் மதிப்பீடு) மற்றும் புரத செயல்பாடு மதிப்பீடு ஆகியவற்றை வழங்க முடியும்.

எங்களை தொடர்பு கொள்ளவும்

01 தமிழ்

புரதம்-புரதம் தொடர்பு பகுப்பாய்வு சேவை

ஆல்பா லைஃப்டெக் பல ஆண்டுகளாக புரத மதிப்பீடுகளில் ஆழமாக ஈடுபட்டுள்ளது, புரத செயல்பாட்டு மதிப்பீட்டிற்கான ஒரு சிறந்த தளத்தை உருவாக்கியுள்ளது, மேலும் புரத தொடர்புகளை சரிபார்க்க பல்வேறு தொழில்நுட்ப வழிமுறைகளை தேர்ச்சி பெற்றுள்ளது, இது அறிவியல் ஆராய்ச்சி அல்லது திட்ட ஆராய்ச்சி நேரத்தை மிச்சப்படுத்தும் அதே வேளையில் நிலையான முடிவுகளை வழங்கும்.

புரதம்-புரதம் தொடர்பு மதிப்பீட்டிற்கான அறிமுகம்

மரபணுப் பொருட்களில் சேமிக்கப்பட்டுள்ள அறிவுறுத்தல்களுக்கு பதிலளிக்கும் எந்தவொரு வாழ்க்கை வடிவத்திலும் புரதங்கள் மிக முக்கியமான நிர்வாக மூலக்கூறுகளாகும். பெரும்பாலும், புரதங்கள் மற்ற புரதங்களுடன் தொடர்பு கொள்ளும் பங்கு வகிக்கும் பாத்திரங்களாகச் செயல்படுவதன் மூலம் தங்கள் பணிகளைச் செய்கின்றன, இது ஒரு செல்லின் உண்மையான சூழலில் ஒரு புரதத்தின் செயல்பாட்டை ஆராயும்போது மிகவும் தெளிவாகிறது. ஒரு தனிப்பட்ட புரதத்தின் உயிர்வேதியியல் விசாரணைக்கு புரதங்களுக்கு இடையிலான தொடர்புகளை அடையாளம் காண்பது மிகவும் முக்கியமானது. பொதுவான வகைகளின் புரத தொடர்பு பகுப்பாய்வு பின்வருமாறு:

இணை-நோய் எதிர்ப்பு சக்தி மதிப்பீடு

கோ-இம்யூனோபிரசிபிட்டேஷன் முறையின் கொள்கை, இலக்கு புரதம், குறிப்பிட்ட ஆன்டிபாடி மற்றும் புரதம் A/G காந்த மணிகளை அடைகாப்பதற்காக கலப்பதாகும், கட்டுப்படாத புரதத்தின் சூப்பர்நேட்டன்ட் காந்த ரேக்கில் உள்ள காந்த மணிகளின் உறிஞ்சுதல் மூலம் நிராகரிக்கப்படுகிறது, மேலும் காந்த மணிகள் கழுவப்பட்டு புரதம் மற்றும் பிற அசுத்தங்களை அகற்றப்படுகின்றன. குறிப்பாக பிணைக்கப்படாவிட்டால்.

படம்.1 கோ-ஐபி மதிப்பீடுகளின் திட்ட வரைபடம்.(குறிப்பு மூலம்: இணை-இம்யூனோபிரசிபிட்டேஷன் மதிப்பீடு - PubMed (nih.gov))

புல்-டவுன் மதிப்பீடு

இழுக்கும்-கீழ் மதிப்பீடு என்பது காந்த மணியில் அறியப்பட்ட புரதத்தை நிலைநிறுத்தி, கண்டறியப்பட வேண்டிய பொருளைச் சேர்ப்பதாகும். ஊடாடும் புரதங்களின் உறிஞ்சுதலுக்காக கரைப்பான் கண்டறியப்படுகிறது.

1988 ஆம் ஆண்டில், ஸ்மித் மற்றும் பலர் சுத்திகரிக்கப்பட்ட GST இணைவு புரதத்தை புல்-டவுன் மதிப்பீடுகளில் பயன்படுத்தினர், இது Gst புல் டவுன் என்று அழைக்கப்படுகிறது, இது இலக்கு புரதத்தில் ஒரு GST குறிச்சொல்லைச் சேர்ப்பது, GSH மூலம் ஊடாடும் புரதத்தைப் பிடிப்பது, பிணைப்பை தெளிவுபடுத்துவது மற்றும் WB மதிப்பீடுகள் மூலம் அதைச் சரிபார்க்கிறது.

படம்.2 ஜிஎஸ்டி புல்-டவுன் மதிப்பீடுகளின் திட்ட வரைபடம்.(குறிப்பு மூலம்: PIF4 பிணைப்பை ஆய்வு செய்வதற்கான GST புல்-டவுன் மதிப்பீடு விட்ரோவில் - PubMed (nih.gov) )

நிக்கல் அல்லது கோபால்ட் போன்ற உலோக அயனிகளை ஊடகமாகப் பயன்படுத்துவதும், அஃபினிட்டி குரோமடோகிராபி மூலம் புரதத்தைச் சுத்திகரிப்பதும், சரிபார்ப்புக்காக WB பரிசோதனை மூலம் பிணைப்பை நீக்குவதும் அவரது புல்-டவுன் ஆகும்.

கூடுதலாக, டிஎன்ஏ புல்-டவுன் (புரத டிஎன்ஏ பிணைப்பு மதிப்பீடு), ஆர்என்ஏ புல்-டவுன் (புரத ஆர்என்ஏ தொடர்பு மதிப்பீடு) மற்றும் சிறிய மூலக்கூறு புல் டவுன் மதிப்பீடுகள் உள்ளன.

டிஎன்ஏ புல்-டவுன் (புரத டிஎன்ஏ பிணைப்பு மதிப்பீடு) என்பது புரதத்தின் டிஎன்ஏ பிணைப்பைத் தீர்மானிப்பதற்கான ஒரு இன் விட்ரோ முறையாகும். குறிப்பிட்ட புரதங்கள் இலக்கு டிஎன்ஏவுடன் பிணைக்கப்படுகிறதா என்பது WB மதிப்பீடுகளால் கண்டறியப்பட்டது; புரதங்களுடன் பிணைக்கப்பட்டுள்ள அறியப்படாத டிஎன்ஏ துண்டுகள், இந்த டிஎன்ஏ துண்டுகள் எம்எஸ் கண்டறிதலால் அறியப்படுகின்றன.

RNA Pull-down (புரத RNA தொடர்பு மதிப்பீடு) என்பது புரதங்களுடன் RNA பிணைப்பைத் தீர்மானிப்பதற்கான ஒரு செயற்கை நுண்ணுயிரி முறையாகும். குறிப்பிட்ட புரதங்கள் இலக்கு RNA உடன் பிணைக்கப்படுகிறதா என்பது WB மதிப்பீடுகளால் கண்டறியப்பட்டது; புரதங்களுடன் பிணைக்கப்பட்டுள்ள அறியப்படாத RNA துண்டுகள், இந்த RNA துண்டுகள் MS கண்டறிதலால் அறியப்படுகின்றன.

SM புல்-டவுன் (சிறிய மூலக்கூறு புல்-டவுன் மதிப்பீடுகள்) சிறிய மூலக்கூறுகளுடன் குறிப்பாக பிணைக்கும் இலக்கு புரதங்களைக் கண்டறிய முடியும், மேலும் MS உடன் இணைக்கப்படும்போது, சிறிய மூலக்கூறு இலக்கு புரதங்களைத் துல்லியமாகத் திரையிட முடியும், இதை இன் விட்ரோ லேபிளிங் முறை மற்றும் உயிரியல் ஆர்த்தோகனல் முறை எனப் பிரிக்கலாம்.

WB பரிசோதனை

WB பரிசோதனை (வெஸ்டர்ன் பிளட் பரிசோதனை அல்லது வெஸ்டர்ன் பிளட் என்றும் அழைக்கப்படுகிறது), இதன் சாராம்சம் ஆன்டிஜென் மற்றும் ஆன்டிபாடியின் குறிப்பிட்ட எதிர்வினை ஆகும், அடிப்படைக் கொள்கை SDS பாலிஅக்ரிலாமைடு ஜெல் எலக்ட்ரோபோரேசிஸ் மூலம் இயற்கையிலிருந்து நீக்கப்பட்ட புரதங்களைப் பிரித்து, சவ்வு பரிமாற்றம் (ஈரமான அல்லது அரை உலர்ந்த சுழற்சி) மூலம் ஒரு திடமான கட்ட கேரியருக்கு (PVDF சவ்வு, NC சவ்வு போன்றவை) மாற்றுவதாகும். தடுப்பைத் தொடர்ந்து (BSA, மோர் போன்றவற்றைப் பயன்படுத்தி), முதன்மை ஆன்டிபாடி புரதத்துடன் குறிப்பாக பிணைக்கப் பயன்படுத்தப்படுகிறது, மேலும் படலத்தைக் கழுவிய பின் ஃப்ளோரசெசின்-லேபிளிடப்பட்ட இரண்டாம் நிலை ஆன்டிபாடி சேர்க்கப்படுகிறது. இரண்டாவது ஆன்டிபாடியை முதன்மை ஆன்டிபாடியுடன் பிணைப்பதன் மூலம், இலக்கு புரதத்தை அடி மூலக்கூறு வண்ண வளர்ச்சி மற்றும் வேதியியல் ஒளிர்வு மூலம் அவதானிக்க முடியும். மாதிரியில் ஒரு குறிப்பிட்ட புரதம் வெளிப்படுத்தப்படுகிறதா என்பதைத் தீர்மானிக்கவும், அதன் வெளிப்பாடு அளவை தோராயமாக பகுப்பாய்வு செய்யவும் இது பொதுவாகப் பயன்படுத்தப்படுகிறது.

புரதம்-புரதம் தொடர்பு முறை ஒப்பீடு

புரத இழுப்பு-கீழே மதிப்பீடுகள், கோ-ஐபி மதிப்பீடுகளைப் போலவே இருக்கின்றன, இவை இரண்டும் புரத இடைவினை சோதனைகளைக் கண்டறிவதைச் சேர்ந்தவை. இரண்டு முறைகளுக்கும் இடையிலான வேறுபாடு என்னவென்றால், கோ-ஐபி மதிப்பீடுகள் அறியப்பட்ட புரதங்களின் ஊடாடும் புரதங்களைப் பெறுகின்றன, இது ஒரு குறிப்பிட்ட நம்பகத்தன்மையைக் கொண்டுள்ளது, ஆனால் ஊடாடும் புரதங்கள் நேரடியாகவோ அல்லது மறைமுகமாகவோ தொடர்பு கொள்கின்றனவா என்பதை உறுதிப்படுத்த முடியாது. புல்-டவுன் மதிப்பீடுகள் அறியப்பட்ட புரதத்துடன் ஊடாடும் அறியப்படாத புரதத்தைக் கண்டறிவதாகும். அறியப்பட்ட புரதம் கண்டறியப்பட்ட புரதத்துடன் ஊடாடுகிறதா என்பதை இது நேரடியாக உறுதிப்படுத்த முடியும், ஆனால் உயிருள்ள நிலையில் பிணைப்பு சூழ்நிலையை அறிய முடியாது.

இரண்டு அல்லது அதற்கு மேற்பட்ட புரதங்களுக்கு இடையே தொடர்பு உள்ளதா என்பதை பகுப்பாய்வு செய்ய, இம்யூனோபிரசிபிட்டேஷன் பரிசோதனைகளின் அடிப்படையில், கோ-இம்யூனோபிரசிபிட்டேஷன் தொழில்நுட்பம் பயன்படுத்தப்படுகிறது. சோதனை நுட்பங்களின் பிற புரத தொடர்பு பகுப்பாய்வுகளுடன் (ஜிஎஸ்டி புல்-டவுன், வெஸ்டர்ன் பிளாட், குரோமாடின் இம்யூனோபிரசிபிட்டேஷன் அசே, முதலியன) ஒப்பிடும்போது, கோ-ஐபி தொழில்நுட்பம் அதிக குறிப்பிட்ட தன்மை, உணர்திறன் மற்றும் அதிக மறுபயன்பாட்டைக் கொண்டுள்ளது, இது குறிப்பிட்ட அல்லாத பிணைப்பின் குறுக்கீட்டைத் தவிர்க்கலாம் மற்றும் இயற்கை நிலையில் புரதங்களின் தொடர்புகளை பிரதிபலிக்கும்.

	ஜிஎஸ்டி வரியை குறைத்தல்	கோ-ஐபி	மேற்கு ஆப்பிரிக்கா
நன்மை	செயல்பட எளிதானது பல்வேறு புரதங்களை சுத்திகரிக்க ஏற்றது.	உயிரியல் தொடர்பு பகுப்பாய்விற்கு கீழ்நிலை புரதத்தைக் கொண்டு இதை அடையாளம் காணலாம்.	வலுவான தனித்தன்மை விட்ரோவில் தரமான மற்றும் அளவு
வரம்பு	ஒருவேளை குறிப்பிடப்படாத பிணைப்பு தொடர்பின் மேலும் சரிபார்ப்பு தேவை.	* ஆன்டிபாடிகளை வலுவாக சார்ந்திருத்தல் *குறிப்பிட்ட அல்லாத பிணைப்பு ஏற்படலாம்	* நேரத்தை எடுத்துக்கொள்ளும் *பெரிய அளவிலான புரத பகுப்பாய்விற்குப் பயன்படுத்துவது கடினம்.
விண்ணப்ப எடுத்துக்காட்டு	* தொடர்புகளை அடையாளம் காணவும் *சுத்திகரிக்கப்பட்ட புரத வளாகம்	சிக்னல் கடத்துகையைப் பற்றி ஆய்வு செய்யுங்கள் நோய் வழிமுறை	புரதம்-புரதம், புரதம்-டிஎன்ஏ மற்றும் புரதம்-ஆர்என்ஏ இடைவினைகளின் அடுத்தடுத்த பகுப்பாய்வு