VHH ஆன்டிபாடி என்பது ஒட்டக விலங்குகளின் சீரத்தில் காணப்படும் ஒரு இயற்கையான காணாமல் போன ஒளி சங்கிலி (VL) ஆன்டிபாடி ஆகும். VHH ஆன்டிபாடி அமைப்பு எளிமையானது மற்றும் இரண்டு கனமான சங்கிலிகளை (VH) மட்டுமே கொண்டுள்ளது. நானோ உடல்கள் சுமார் 15 kDa மூலக்கூறு எடையுடன் கூடிய கனமான சங்கிலி மாறி பகுதி (VHH) ஐ உள்ளடக்கியது. VHH ஆன்டிபாடி ஆன்டிஜென்களை அடையாளம் காணும் இயல்பான திறனைக் கொண்டுள்ளது மற்றும் சிறந்த தொடர்பு, சிறந்த தனித்தன்மை, சிறந்த நிலைத்தன்மை மற்றும் சிறந்த ஊடுருவலைக் காட்டுகிறது. அல்பாகாக்கள் மற்றும் சுறாக்கள் போன்ற பிற விலங்குகளில் கட்டமைப்பிற்கான ஆன்டிபாடிகள் பின்னர் கண்டறியப்பட்டுள்ளன. VL டொமைன் இல்லாவிட்டாலும், ஒரு கனமான சங்கிலி மாறி பகுதி மற்றும் இரண்டு வழக்கமான CH2 மற்றும் CH3 பகுதிகளைக் கொண்ட நானோ உடல்கள், மிகவும் நிலையான ஒற்றை-டொமைன் ஆன்டிபாடி மற்றும் ஆன்டிபாடி செயல்பாட்டுடன் அறியப்பட்ட மிகச்சிறிய பிணைப்பு அலகு ஆகும். ஆல்ஃபா லைஃப்டெக் வாடிக்கையாளர்களுக்கு நானோ உடல் தயாரிப்பு, நானோ உடல் நூலக கட்டுமானம் மற்றும் திரையிடல், VHH நானோ உடல் வெளிப்பாடு மற்றும் தொடர்ச்சியான சேவைகளை வழங்க முடியும், நானோ உடல் தொகுப்பு மற்றும் பேஜ் காட்சி மேம்பாட்டு தளம் மூலம், இது பல்வேறு வகையான பேஜ் ஆன்டிபாடி நூலகத்தை உள்ளடக்கியதாக திறமையாக உருவாக்கி திரையிட முடியும், எங்கள் வாடிக்கையாளர்களுக்கு குறிப்பிட்ட, உயர் தனித்தன்மை கொண்ட ஆன்டிபாடி தீர்வுகளை வழங்குகிறது. எங்கள் வாடிக்கையாளர்களுக்கான தொழில்முறை ஆன்டிபாடி மனிதமயமாக்கல் உத்திகளையும் நாங்கள் உருவாக்க முடியும், அவை நானோ உடல்களுக்கு மனிதமயமாக்கப்படலாம், மேலும் எங்கள் நிறுவனம் கிட்டத்தட்ட மனித ஆன்டிபாடிகளுக்கு சமமானது.

முதலாவதாக, எந்த நோயும் இல்லாத அல்பாக்கா, நோயெதிர்ப்பு சக்தியைத் தூண்டி நோயெதிர்ப்பு சக்தியை உருவாக்க அனுமதிக்கிறது, மேலும் இந்த விலங்குகள் ஒற்றை-டொமைன் ஆன்டிபாடிகளை உருவாக்க முடியும். பின்னர், அல்பாக்கா PBMC இலிருந்து ஒற்றை B செல்களை தனிமைப்படுத்தினோம், மேலும் B செல்களிலிருந்து RNA பிரித்தெடுக்கப்பட்டு cDNA இல் படியெடுக்கப்பட்டது. இறுதியாக இறுதியாக ஒரு டெம்ப்ளேட்டாகப் பயன்படுத்தப்பட்டு, எலக்ட்ரோபோரேசிஸ் மூலம் எங்கள் இலக்கு VHH வரிசையைத் திரையிட்டோம். அடுத்து, திரையிடப்பட்ட VHH ஆன்டிபாடி வரிசையின் வரிசைமுறை பகுப்பாய்வை நாங்கள் செய்தோம், இது தயாரிக்கப்பட்ட VHH ஆன்டிபாடியின் நிலைத்தன்மை மற்றும் உறவை மேம்படுத்த முடியும். அதே நேரத்தில், VHH ஆன்டிபாடிகளின் தள-இயக்கப்பட்ட பிறழ்வு மற்றும் நிலைத்தன்மை திரையிடலையும் நாங்கள் நடத்தலாம். திரையிடலுக்கான சில குறிப்பிட்ட பிறழ்வுகள் போன்ற சிறப்பு முறைகளை அறிமுகப்படுத்துவதன் மூலம் VHH ஆன்டிபாடி பிறழ்வுகளின் அதிக நிலைத்தன்மையைப் பெறலாம். பின்னர் பொறியாளர் VHH ஆன்டிபாடி வெளிப்பாட்டிற்கான பொருத்தமான வெளிப்பாடு வெக்டரில் (பிளாஸ்மிடுகள், வைரஸ்கள் போன்றவை) விளைந்த VHH வரிசையைச் செருகினார். இறுதியாக, பேஜ் டிஸ்ப்ளே தொழில்நுட்பம் அல்லது ஈஸ்ட் டிஸ்ப்ளே தொழில்நுட்பம் மூலம், ஹோஸ்ட் மேற்பரப்பில் VHH ஆன்டிபாடிகள் வெளிப்படுத்தப்படுகின்றன, பின்னர் இலக்கு ஆன்டிஜெனை குறிப்பாக பிணைக்கக்கூடிய நானோ ஆன்டிபாடிகள் பூசப்பட்ட ஆன்டிஜென்கள் மற்றும் ELISA ஐப் பயன்படுத்தி தேர்ந்தெடுக்கப்படுகின்றன. வாடிக்கையாளர்களுக்கு வழங்கப்படும் நானோபாடி வரிசைகளின் சரியான தன்மை மற்றும் செயல்பாட்டு செயல்பாட்டை உறுதி செய்வதற்காக ஆல்பா லைஃப்டெக் தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட நானோபாடிகளை வரிசைப்படுத்தி சரிபார்த்தது.

VHH தொழில்நுட்பம் மரபணு பொறியியலில் பல்வேறு முன்னேற்றங்களைப் பயன்படுத்திக் கொள்கிறது, இதனால் இலக்கு மரபணு சாதாரண சூழ்நிலைகளில் மறுபகிர்வு செய்யப்பட்டு ஒன்றாக மறுசீரமைக்கப்படுகிறது, இது பல்வேறு குறிச்சொற்களைக் கொண்டிருக்கக்கூடிய பிற தொழில்நுட்பங்களுக்கு மிகவும் பிணைப்பு கருவியை வழங்க முடியும், மேலும் VHH தொழில்நுட்பத்தால் உற்பத்தி செய்யப்படும் ஆன்டிபாடிகள் சுத்திகரிப்புக்கு வசதியாக இருக்கும். உயர்-செயல்திறன் ஸ்கிரீனிங் நுட்பங்களைப் பயன்படுத்தி, ஆல்பா லைஃப்டெக் வாடிக்கையாளர்களுக்குத் தேவையான குறிப்பிட்ட செயல்பாடுகளுடன் கூடிய VHH ஆன்டிபாடிகளை குறுகிய காலத்தில் அதிக எண்ணிக்கையிலான ஆன்டிபாடிகளிலிருந்து திரையிட முடியும். இதற்கிடையில், VHH ஆன்டிபாடிகள் அதிக வெப்பநிலை மற்றும் பிற கரைப்பான்களுக்கு வெளிப்படும் போது, ​​VHH ஆன்டிபாடிகளை காலவரையின்றி மற்றும் சிக்கனமாக உற்பத்தி செய்யலாம். சாரக்கட்டுகளாக மாறுதல், லேபிளிடுதல் மற்றும் குறிப்பிட்ட அமினோ அமிலங்களை மாற்றுதல் போன்ற பிற பயன்பாடுகளை உருவாக்க VHH ஆன்டிபாடிகளை மரபணு ரீதியாக கையாளலாம். மைக்ரோடைட்டர் தகடுகள், மின்வேதியியல் பயோசென்சர்கள் மற்றும் பக்கவாட்டு ஓட்ட சாதனங்கள் போன்ற வழக்கமான ஆன்டிபாடிகளைப் பயன்படுத்தி எந்தவொரு பொதுவான தளத்திற்கும் VHH ஆன்டிபாடிகள் பொருத்தமானவை. VHH ஆன்டிபாடிகளின் சிறிய அளவு காரணமாக பிணைப்பு களத்தில் அதிக அடர்த்தியைக் கொண்டிருக்கலாம், அதாவது VHH ஆன்டிபாடிகள் அதிகரித்த சமிக்ஞையில் ஒரு சிறந்த நன்மையைக் கொண்டுள்ளன, எனவே அதிக உணர்திறன் கொண்டது. அதே நேரத்தில், கட்டி நோயறிதல் மற்றும் சிகிச்சை, வீக்க நோயறிதல், மத்திய நரம்பு மண்டல நோய்களுக்கான சிகிச்சை மற்றும் பிற துறைகளில் VHH ஆன்டிபாடி மிகவும் பரந்த பயன்பாட்டைக் கொண்டுள்ளது. உணவு மற்றும் தீவனத்தில் உள்ள மைக்கோடாக்சின்களைக் கண்காணிக்க VHH ஆன்டிபாடிகள் மிகவும் பயனுள்ளதாக இருக்கும், ஏனெனில் அவை எளிதில் மரபணு ரீதியாக வடிவமைக்கப்பட்டுள்ளன மற்றும் சிறந்த நிலைத்தன்மையைக் கொண்டுள்ளன.

நோய்த்தடுப்பு செயல்பாட்டில், நாம் பல்வேறு வகையான நோயெதிர்ப்பு மருந்துகளைப் பயன்படுத்துகிறோம். நோயெதிர்ப்பு மருந்துகளின் பண்புகளின்படி, அவற்றை இயற்கை ஆன்டிஜென்கள், மறுசீரமைப்பு ஆன்டிஜென்கள், செயற்கை ஆன்டிஜென்கள் மற்றும் சிறிய மூலக்கூறு ஆன்டிஜென்களாக நாம் மாற்றலாம். இயற்கை ஆன்டிஜென்களில் வைரஸ் நோயெதிர்ப்பு மருந்துகள் அடங்கும். இயற்கை நோயெதிர்ப்பு மருந்துகளின் சுத்திகரிப்பு செயல்முறை சிக்கலானது, இது மற்ற நோயெதிர்ப்பு மருந்துகளை விட மிகவும் கடினம், மேலும் சுத்திகரிப்பு செலவும் அதிகமாகும். வைரஸ் நோயெதிர்ப்பு மருந்து முழு வைரஸ் செயலிழக்க தடுப்பூசி, துணை அலகு தடுப்பூசி, வைரஸ் திசையன் தடுப்பூசி மற்றும் mRNA தடுப்பூசி என பிரிக்கப்பட்டுள்ளது. முழு வைரஸ்-செயலிழக்க தடுப்பூசி உடலை நோயெதிர்ப்பு மறுமொழியை உருவாக்க தூண்டும், ஆனால் வைரஸை முழுமையாக செயலிழக்கச் செய்ய வேண்டும், மேலும் தயாரிப்பு செயல்முறை மிகவும் சிக்கலானது. துணை அலகு தடுப்பூசிக்கு, வைரஸ் மேற்பரப்பு புரதத்தை ஆன்டிஜெனாக மட்டுமே பயன்படுத்தினோம், எனவே இந்த நோயெதிர்ப்பு மருந்துகளின் பாதுகாப்பு அதிகமாக உள்ளது, ஆனால் நோயெதிர்ப்பு விளைவை அதிகரிக்க துணை சேர்க்கப்பட வேண்டும். மரபணு மாற்றத்திற்குப் பிறகு, அடினோவைரஸ் மற்றும் லென்டிவைரஸ் ஆகியவை வைரஸ் பிரதிபலிப்பு மற்றும் வெளிப்பாடு மூலம் நோயெதிர்ப்பு மறுமொழியின் நிகழ்வைத் தூண்டுவதற்கு திசையன்களாகப் பயன்படுத்தப்படுகின்றன. நோயெதிர்ப்பு விளைவு திறமையானது மற்றும் நீடித்தது, ஆனால் தயாரிப்பு செயல்முறை சிக்கலானது, எனவே நாம் உயிரியல் பாதுகாப்பை கண்டிப்பாக கட்டுப்படுத்த வேண்டும். mRNA ஐ நேரடியாக செல்களுக்குள் இறக்குமதி செய்ய முடியும், இதனால் செல்கள் ஆன்டிஜெனை வெளிப்படுத்தி நோயெதிர்ப்பு மறுமொழியைத் தூண்ட முடியும், இந்த செயல்முறை மிகவும் கடினமானது, இது mRNA இன் நிலைத்தன்மை மற்றும் விநியோக செயல்திறனை உறுதி செய்ய வேண்டும். மறுசீரமைப்பு ஆன்டிஜென்கள் இயற்கை ஆன்டிஜென்களிலிருந்து இணக்கத்தில் வேறுபடுகின்றன என்றாலும், அவை விரிவான தொழில்துறை உற்பத்திக்கு உட்படலாம். சிறிய மூலக்கூறு புரதங்கள் அல்லது பாலிபெப்டைட் ஆன்டிஜென்கள், இன் விட்ரோ தொகுப்பு முறைகள் மூலம் தயாரிக்கப்படலாம். அவற்றின் அமைப்பு கட்டுப்படுத்தக்கூடியது, ஆனால் இது வடிவமைப்பில் சிக்கலானதாக இருக்கலாம். சிறிய மூலக்கூறு ஆன்டிஜென்கள் பெரும்பாலும் பெப்டைடுகள் மற்றும் நியூக்ளியோடைடுகள் போன்ற சிறிய மூலக்கூறு சேர்மங்களாகும், ஏனெனில் அவை தாங்களாகவே நோயெதிர்ப்புத் திறன் கொண்டவை அல்ல, எனவே அவை மேக்ரோமாலிகுலர் கேரியர்களுடன் இணைந்த பின்னரே நோயெதிர்ப்புத் தூண்டுதல்களாகப் பயன்படுத்தப்பட முடியும்.

நானோஆன்டிபாடிகளின் மூலக்கூறு எடை மிகவும் சிறியது, பொதுவாக சுமார் 12-15 kDa, பாரம்பரிய IgG ஆன்டிபாடியின் பத்தில் ஒரு பங்கு மட்டுமே. படிக அமைப்பு சுமார் 2.5nm விட்டம் மற்றும் சுமார் 4.2nm நீளம் கொண்ட ஒரு ரக்பி பந்து ஆகும். தனித்துவமான மூலக்கூறு அமைப்பு இரத்த-மூளைத் தடையின் மூலம் நல்ல திசு ஊடுருவல், குறுகிய அரை ஆயுள் மற்றும் அதிக சிறுநீரக அனுமதி ஆகியவற்றை அனுமதிக்கிறது. நானோஆன்டிபாடிகளில் நிரப்பு தீர்மானிக்கும் மற்றும் முதுகெலும்பு பகுதிகள் உள்ளன. நிரப்பு நிரப்பு முடிவு பகுதிகளில் CDR 1, CDR 2 மற்றும் CDR 3 ஆகியவை அடங்கும். CDR 3 பகுதியில் 3 முதல் 28 அமினோ அமிலங்களின் நீள வரம்பு நானோஆன்டிபாடி நூலகத்தின் சேமிப்புத் திறனை உறுதி செய்கிறது. 8 முதல் 15 அமினோ அமிலங்களைக் கொண்ட பாரம்பரிய ஆன்டிபாடி CDR 3 பகுதியுடன் ஒப்பிடும்போது, ​​நீண்ட CDR 3 கொண்ட சில CDR 3 பகுதிகள் ஆன்டிஜெனின் மேற்பரப்பில் மறைக்கப்பட்ட எபிடோப்களை அடையாளம் காண எங்களுக்கு உதவியது. நானோ உடல்களின் முதுகெலும்புப் பகுதியில் FR 1, FR 2, FR 3 மற்றும் FR 4 ஆகியவை அடங்கும், FR 2 இல் நான்கு ஹைட்ரோஃபிலிக் அமினோ அமில பிறழ்வுகள் உள்ளன, மேலும் இந்த பிறழ்வு ஆன்டிபாடியின் நீரில் கரைதிறனை மேம்படுத்துகிறது. CDR 1 மற்றும் CDR 3 க்கு இடையிலான சிறப்பு டைசல்பைட் பிணைப்பு, உயர் அழுத்தம், அதிக வெப்பநிலை, டெனாச்சுரன்ட் மற்றும் பிற நிலைமைகளின் கீழ் ஆன்டிபாடிகளின் நிலைத்தன்மையை அதிகரிக்கிறது, இது நானோ உடல்களின் உற்பத்தி மற்றும் பாதுகாப்பிற்கு உகந்தது, மேலும் புதிய நிர்வாக முறைகளின் சாத்தியத்தையும் உருவாக்குகிறது.