మోనోక్లోనల్ యాంటీబాడీ అభివృద్ధి సేవ
ఆల్ఫా లైఫ్టెక్ ఇంక్.కణ సంస్కృతి, ఆసైట్స్ ద్రవం లేదా మొత్తం సీరం నుండి ఎపిటోప్ అంచనా, పెప్టైడ్ సంశ్లేషణ, ప్రోటీన్ వ్యక్తీకరణ, పాలీక్లోనల్ లేదా మోనోక్లోనల్ యాంటీబాడీ ఉత్పత్తి అలాగే యాంటీబాడీ శుద్ధీకరణను అందించగలదు.
ఆల్ఫా లైఫ్టెక్ ఇంక్.హైబ్రిడోమా కణాలు, జీనోమ్ ఎడిటింగ్ సెల్ లైన్లు, నాక్డౌన్ సెల్ లైన్లు మరియు ఓవర్ఎక్స్ప్రెషన్ సెల్ లైన్లతో సహా వివిధ స్థిరమైన సెల్ లైన్ సేవలను వినియోగదారులకు అందించడంలో మాకు అనుభవం ఉంది. మేము ప్రతి క్లయింట్కు అధునాతన కస్టమ్ సెల్ లైన్ సేవలను అందించడానికి ప్రయత్నిస్తాము మరియు మా సేవలు నిరూపించబడినవి మరియు విశ్వసనీయమైనవి.
యాంటీబాడీ అభివృద్ధి వ్యూహం

1. యాంటిజెన్ రూపకల్పన మరియు తయారీ
ఈ యాంటిజెన్లు ప్రోటీన్లు, పెప్టైడ్లు లేదా ఇతర అణువులు కావచ్చు. ఇమ్యునోజెన్లను రూపొందించడానికి యాంటిజెన్ నిర్మాణం, ఇమ్యునాలజీ మరియు డెలివరీ సిస్టమ్ల పరిజ్ఞానాన్ని ఏకీకృతం చేసే సమగ్ర విధానం అవసరం. ఆల్ఫా లైఫ్టెక్ వద్ద అవసరమైన కస్టమర్ల కోసం ఇమ్యునోజెన్లను రూపొందించగల యాంటిజెన్ డిజైన్ టెక్నాలజీ ఉంది.
ఆల్ఫా లైఫ్టెక్ వినియోగదారులకు ఎంచుకోవడానికి రికాంబినెంట్ ప్రోటీన్ ఉత్పత్తులను అందిస్తుంది. పరిశోధన కోసం మీకు అవసరమైన రికాంబినెంట్ ప్రోటీన్లను ఉత్పత్తి చేయడానికి మా వద్ద E. కోలి ఎక్స్ప్రెషన్ సిస్టమ్, ఈస్ట్ ఎక్స్ప్రెషన్ సిస్టమ్, బాకులోవైరస్-కీటక ఎక్స్ప్రెషన్ సిస్టమ్, క్షీరద ఎక్స్ప్రెషన్ సిస్టమ్ మొదలైన వివిధ రకాల ప్రోటీన్ ఎక్స్ప్రెషన్ సిస్టమ్లు ఉన్నాయి.
2.జంతువుల రోగనిరోధకత
ఆల్ఫా లైఫ్టెక్ వినియోగదారులకు ఇమ్యునోజెన్లను అందించగలదు, మరియు మీరు ఎంచుకోవడానికి ఎలుకలు, కుందేళ్లు, గొర్రెలు, అల్పాకాలు, గినియా పిగ్స్, హామ్స్టర్లు మొదలైన రోగనిరోధక శక్తి గల జంతువులు అందుబాటులో ఉన్నాయి.
3. మోనోక్లోనల్ యాంటీబాడీ ఉత్పత్తి పద్ధతులు
●హైబ్రిడోమా టెక్నాలజీ ద్వారా మాబ్స్ ఉత్పత్తి
హైబ్రిడోమా అనేది రెండు రకాల కణాల సంలీనం ద్వారా ఉత్పత్తి చేయబడిన ఒక సంకర కణం. ఆ రెండు రకాలు మౌస్ మైలోమా కణ శ్రేణి మరియు ప్లాస్మా కణాలు (బి లింఫోసైట్). ఇందులో, హెటెరోజైగస్ కణం ఇన్ విట్రోలో ఆసక్తి ఉన్న యాంటిజెన్కు వ్యతిరేకంగా నిరంతర యాంటీబాడీలను ఉత్పత్తి చేయగలదు. ఒక హైబ్రిడోమా కణ శ్రేణి ఉత్పత్తిలో మూడు భాగాలు ఉంటాయి: యాంటిజెన్ రూపకల్పన (హాప్టెన్లు, చిన్న అణువులు మరియు పెప్టైడ్లు), జంతు రోగనిరోధకత, కణ సంలీనం మరియు పాజిటివ్ క్లోన్ స్క్రీనింగ్. ప్రత్యేకమైన రోగనిరోధక పద్ధతులను ఉపయోగించి, మేము అసాధారణంగా అధిక కణ-సంలీన సామర్థ్యాలను (వెయ్యి బి కణాలకు 1-10 హైబ్రిడోమాలు) మరియు అధిక యాంటీబాడీ టైటర్లను పొందుతాము. ఇది బయోకెమికల్ స్క్రీనింగ్, ఇన్-విట్రో కణ-ఆధారిత పరీక్షలు మరియు జంతు అధ్యయనాలతో సహా తదుపరి విశ్లేషణాత్మక పరీక్షలలో మా విజయ రేటును గరిష్ఠ స్థాయికి పెంచుతుంది.
●ఫేజ్ డిస్ప్లే టెక్నాలజీ ద్వారా MABS ఉత్పత్తి
మోనోక్లోనల్ యాంటీబాడీలను ఉత్పత్తి చేయడానికి ఫేజ్ డిస్ప్లే మరొక పద్ధతిని అందిస్తుంది. జంతువుల రక్తం నుండి బి-లింఫోసైట్లను వేరుచేసి, వాటి mRNAను సంగ్రహిస్తారు. PCR ద్వారా, ఈ mRNAను cDNAగా మారుస్తారు, ఇది అన్ని VH మరియు VL విభాగాలను విస్తరిస్తుంది. ఆ తర్వాత ఈ విభాగాలను, సాధారణంగా సింగిల్-చైన్ వేరియబుల్ ఫ్రాగ్మెంట్స్ (scFv) రూపంలో, ఒక బాక్టీరియోఫేజ్ యొక్క PIII ప్రోటీన్తో పాటు ఒక వెక్టర్లోకి క్లోన్ చేస్తారు. తదనంతరం, ఈ కన్స్ట్రక్ట్ను E. coliకి సోకింపజేయడానికి ఉపయోగిస్తారు, దీని ఫలితంగా ఒక హెల్పర్ ఫేజ్తో ఇనాక్యులేషన్ ద్వారా సుమారు 10^10 కణాలను కలిగి ఉన్న ఒక లైబ్రరీ సృష్టించబడుతుంది. అప్పుడు E. coli, VH మరియు VL విభాగాలను కలిగి ఉన్న బాక్టీరియోఫేజ్ను దాని కోట్లో భాగంగా స్రవించగలుగుతుంది. దీని తరువాత, ఆసక్తి ఉన్న యాంటిజెన్ను లక్ష్యంగా చేసుకున్న నిర్దిష్ట VH మరియు VL విభాగాలను ఎంచుకుని, బాక్టీరియోఫేజ్తో E. coliకి తిరిగి ఇనాక్యులేషన్ చేయడానికి ఉపయోగించవచ్చు. ఆ తర్వాత ప్లాస్మిడ్ను కలిగి ఉన్న కణాలను వేరుచేసి, సీక్వెన్స్ చేస్తారు.
4.ఫ్యూజన్ స్క్రీనింగ్
●కణ సంలీనం మరియు ఎంపిక
సేకరించిన B కణాలను, కల్చర్లో అనంతంగా వృద్ధి చెందగల క్యాన్సర్ కణాలైన మైలోమా కణాలతో సంలీనం చేస్తారు. ఈ సంలీనాన్ని సాధారణంగా పాలిఇథిలిన్ గ్లైకాల్ (PEG) ఫ్యూజన్ వంటి సాంకేతికతను ఉపయోగించి సాధిస్తారు.
సంలీనం తర్వాత, హైబ్రిడోమా కణాలను ఒక ప్రత్యేక మాధ్యమంలో పెంచుతారు, ఇది కేవలం హైబ్రిడోమాలు మాత్రమే జీవించడానికి అనుమతిస్తుంది. ఈ మాధ్యమంలో సాధారణంగా అమినోప్టెరిన్ ఉంటుంది, ఇది సంలీనం కాని మైలోమా కణాల పెరుగుదలను నిరోధిస్తుంది.
●స్క్రీనింగ్ మరియు క్లోంగింగ్
ఫలితంగా ఏర్పడిన హైబ్రిడోమా కణాలను, లక్ష్య యాంటిజెన్కు ప్రత్యేకమైన యాంటీబాడీల ఉత్పత్తి కోసం పరీక్షిస్తారు. దీనిని సాధారణంగా ఎంజైమ్-లింక్డ్ ఇమ్యునోసార్బెంట్ అస్సే (ELISA), వెస్టర్న్ బ్లాట్, ఇమ్యునోప్రెసిపిటేషన్ మరియు ఫ్లో సైటోమెట్రీ వంటి పద్ధతులను ఉపయోగించి చేస్తారు.
యాంటీబాడీని ఉత్పత్తి చేసే హైబ్రిడోమా కణాలను గుర్తించిన తర్వాత, ఒకే రకమైన కణాల సమూహాన్ని సృష్టించడానికి వాటిని క్లోనింగ్ చేస్తారు. దీనివల్ల ప్రతి హైబ్రిడోమా కణం ఉత్పత్తి చేసే యాంటీబాడీ ఒకేలా ఉంటుందని నిర్ధారించబడుతుంది.
5. యాంటీబాడీ క్రియాత్మక ధృవీకరణ
ఆల్ఫా లైఫ్టెక్, మోనోక్లోనల్ యాంటీబాడీలను వర్గీకరించడానికి మరియు యాంటీబాడీ యొక్క నిర్దిష్టత, అనుబంధం మరియు కార్యాచరణను నిర్ధారించడానికి, వెస్టర్న్ బ్లాటింగ్, ఇమ్యునోహిస్టోకెమిస్ట్రీ లేదా ఫంక్షనల్ ఎస్సేస్ వంటి యాంటీబాడీ ఫంక్షనల్ వాలిడేషన్ను అందిస్తుంది.
6. యాంటీబాడీ ఆప్టిమైజేషన్
ప్రోటీన్ A లేదా ప్రోటీన్ G అఫినిటీ క్రోమాటోగ్రఫీ వంటి పద్ధతులను ఉపయోగించి కల్చర్ సూపర్నాటెంట్ నుండి యాంటీబాడీలను శుద్ధి చేయడంతో పాటు, యాంటీబాడీ అఫినిటీని మెరుగుపరచడానికి ఆల్ఫా లైఫ్టెక్ యాంటీబాడీ మాడిఫికేషన్ పద్ధతులను కూడా అందించగలదు.
7. యాంటీబాడీ ఉత్పత్తి
ఆల్ఫా లైఫ్టెక్ హై-త్రూపుట్ స్క్రీనింగ్ అప్లికేషన్లు మరియు భారీ-స్థాయి ఉత్పత్తి కోసం అభ్యర్థి యాంటీబాడీలను మూల్యాంకనం చేయగలదు.
- 1
సరైన ఫ్యూజన్ హైబ్రిడోమాను ఎలా ఎంచుకోవాలి?
సంలీన ప్రక్రియ సమయంలో, 10-15 96-వెల్ మైక్రోటైటర్ ప్లేట్లలో సంలీన హైబ్రిడ్ మిశ్రమాన్ని వేస్తారు. ప్రతి ప్లేట్కు HAT-IMDM సెలక్షన్ మీడియాను అందించి, 37 డిగ్రీల సెల్సియస్ వద్ద కార్బన్ డయాక్సైడ్ ఇంక్యుబేటర్లో ఉంచుతారు. సంలీనం జరిగిన 9 - 14 రోజుల తర్వాత, హైబ్రిడ్ సూపర్నాటెంట్లలో కావలసిన నిర్దిష్ట యాంటీబాడీ ఉనికిని పరీక్షిస్తారు.
- 2
ఎంపిక సామర్థ్యాన్ని ఎలా మెరుగుపరచాలి?
ప్లాస్మా కణాలను వాటి మైలోమా కణాలతో కలపడం 100% సమర్థవంతంగా జరగదు. అనుకూలమైన పరిస్థితులలో మరియు అత్యంత సమర్థవంతమైన ప్రేరణ ఉన్నప్పటికీ, కణాల కలయిక వలన కలిసిపోని మరియు కలిసిపోయిన కణాల మిశ్రమం ఏర్పడుతుంది, వీటిని వేరు చేయవలసి ఉంటుంది. ఎంపిక ప్రక్రియ యొక్క సామర్థ్యాన్ని మెరుగుపరచడానికి, కలయిక కోసం ఉపయోగించే మైలోమా కణాలలో న్యూక్లియోటైడ్ సాల్వేజ్ మార్గంలో కీలకమైన ఎంజైమ్ అయిన HGPRT ఉండదు. ఆ తర్వాత ఆ మిశ్రమాన్ని HAT మాధ్యమంలో పెంచారు, అక్కడ HGPRT ఎంజైమ్ ఉన్న కణాలు, అంటే ప్లాస్మా కణాల నుండి HGPRTని వారసత్వంగా పొందిన హైబ్రిడోమాలు మాత్రమే జీవించగలిగాయి.
- 3
హైబ్రిడోమా కణ శ్రేణులలో యాంటీబాడీ క్రియాశీలతను ఎలా పరీక్షించాలి?
సంకర రకాల మూల్యాంకనం ఒక కీలకమైన దశ. సాధారణంగా, హైబ్రిడోమా, క్లోన్ మరియు సబ్క్లోన్ సూపర్నాటెంట్ స్క్రీనింగ్ను ఎంజైమ్-లింక్డ్ ఇమ్యునోసార్బెంట్ అస్సే (ELISA), వెస్టర్న్ బ్లాట్ అస్సే మరియు ఫ్లోరోసెన్స్ యాక్టివేటెడ్ సెల్ సార్టింగ్ (FACS) ద్వారా అందిస్తారు. మేము సూపర్నాటెంట్ యొక్క స్క్రీనింగ్ అంతా మా సొంత ప్రయోగశాలలోనే నిర్వహించాలని నిర్ణయించుకున్నాము.
- 4
యాంటీబాడీ క్రియాశీలత స్క్రీనింగ్ ఎలా నిర్వహించాలో వివరణాత్మక సూచనలను అందించండి?
పరీక్షించాల్సిన హైబ్రిడోమా సూపర్నేట్లు 500 నుండి 1,440 నమూనాల వరకు ఉండవచ్చు మరియు 9 నుండి 14 రోజుల నాటికి పరీక్షకు సిద్ధంగా ఉంటాయి. ఇవి మూడు నుండి ఐదు రోజుల వ్యవధిలో ఏర్పడవచ్చు లేదా అన్నీ ఒకే రోజున సిద్ధంగా ఉండవచ్చు, కాబట్టి క్లయింట్ ల్యాబ్ తమకు నచ్చిన నిర్దిష్ట సెకండరీ స్క్రీనింగ్ అస్సేలతో వారాల ముందుగానే సిద్ధంగా ఉండటం ముఖ్యం.
- 5
పాజిటివ్ హైబ్రిడోమాలను ఎందుకు సబ్క్లోన్ చేయాలి?
ప్రారంభ ELISA స్క్రీనింగ్ ప్రక్రియలో పాజిటివ్ వెల్స్ను గుర్తించిన తర్వాత, సబ్క్లోనింగ్ ప్రక్రియకు సన్నాహంగా హైబ్రిడోమాలను పెద్ద పరిమాణంలోకి, అంటే 24-వెల్ ప్లేట్లలోకి బదిలీ చేశారు. స్థిరమైన మోనోక్లోన్లను వేరుచేయడాన్ని నిర్ధారించడానికి, హైబ్రిడోమాల సబ్క్లోనింగ్ను సాధారణంగా పరిమిత విలీన పద్ధతి ద్వారా నిర్వహిస్తారు. ఈ టెక్నిక్లో, మోనోక్లోనాలిటీని (ఒక్కో వెల్కు ఒక కణం) సాధించడానికి హైబ్రిడోమా కల్చర్లను విలీనం చేసి, వాటిని 96-వెల్ ప్లేట్లలోకి వ్యాపింపజేయడం జరుగుతుంది. మిశ్రమ హైబ్రిడోమా సమూహాలు ఏర్పడే ప్రమాదాన్ని తగ్గించడానికి కనీసం రెండు పరిమిత విలీనాలను నిర్వహించాలి.
- 6
యాంటీబాడీ ఆవిష్కరణ కోసం హైబ్రిడోమా టెక్నాలజీని ఉపయోగించడం వల్ల కలిగే ప్రయోజనాలు ఏమిటి?
హైబ్రిడ్ సెల్ లైన్లు అత్యంత తక్కువ ఖర్చుతో అధిక అనుబంధం, స్థిరత్వం మరియు నిర్దిష్టత కలిగిన యాంటీబాడీలను ఉత్పత్తి చేయగల సామర్థ్యానికి ప్రశంసలు అందుకున్నాయి.

మౌస్ మోనోక్లోనల్ యాంటీబాడీ ఉత్పత్తి సేవ
ఆల్ఫా లైఫ్టెక్ ప్రపంచవ్యాప్తంగా ఉన్న శాస్త్రవేత్తలకు ఎలుకల హైబ్రిడోమాకు సంబంధించిన పూర్తి సేవలను అందించగలదు. ఈ సేవల్లో యాంటిజెన్ రూపకల్పన/సంశ్లేషణ, ఎలుకలకు రోగనిరోధక శక్తిని కలిగించడం, కణ సంలీనం, మరియు హైబ్రిడోమా ఎంపిక/లక్షణాలు వంటివి ఉంటాయి, వీటితో మేము ప్రతి ప్రాజెక్ట్లో ప్రత్యేకతను సాధించగలము.
మరింత చదవండి
కుందేలు మోనోక్లోనల్ యాంటీబాడీ ఉత్పత్తి సేవ
ఆల్ఫా లైఫ్టెక్కు యాంటీబాడీల రంగంలో అనేక సంవత్సరాల అనుభవం ఉంది మరియు ఇది ఒక సమగ్రమైన రాబిట్ మోనోక్లోనల్ యాంటీబాడీ అభివృద్ధి ప్లాట్ఫామ్ను నిర్మించింది.
మరింత చదవండి


2018-07-16 

