Технологияи намоиши фаг ин ворид кардани гени мақсадноки хориҷӣ ба мавқеи мушаххаси сафедаи капсиди фаг ва ифода кардани гени хориҷӣ дар сатҳи фаг бидуни таъсир расонидан ба фаъолияти муқаррарии фаг мебошад. Пас аз якчанд даври скрининг, ниҳоят сафедаи мақсаднок бо хосияти қавӣ ва фаъолияти баланди биологӣ ба даст оварда шуд.

Бо истифода аз ин технология китобхонаҳои антителоҳои дорои иқтидори баланд тавлид кардан мумкин аст. Давраи скрининг кӯтоҳ аст, раванди амалиётӣ содда аст ва доираи татбиқ васеъ аст, ки имкон медиҳад пайдарпайиҳои оптималӣ барои пептидҳо ё сафедаҳои мақсаднок муайян карда шаванд. Дар замимаҳои марбут ба вирус, муҳаққиқон метавонанд антителоҳоеро кашф кунанд, ки бо скрининги китобхонаҳои калони антитело ба эпитопҳои муҳими вирусӣ пайваст мешаванд. Ин раванд метавонад механизмҳои воридшавӣ, такроршавӣ ё канорагирии иммунии вирусҳоро боздорад ва бо ин васила барои табобати бемориҳо замина гузорад.

Технологияи намоиши фаг нисбат ба технологияи гибридома, ки ба истеҳсоли миқдори ками антителоҳо бар зидди иммуногенҳои мушаххас маҳдуд аст, васеътар истифода мешавад. Баръакс, технологияи намоиши фаг метавонад тамоми китобхонаи антителоҳоро, ки аз намудҳои гуногуни иммунӣ ба даст оварда шудаанд, пешниҳод кунад.

Технологияи намоиши фагҳо доираи васеи татбиқҳоро дорад, аз ҷумла скрининги ретсепторҳои микроорганизмҳои патогенӣ, омӯзиши таъсири мутақобилаи сафедаҳо, пайгирии интиқоли сигнал байни ҳуҷайраҳо, ташхиси бемориҳои ҳайвонот ва таҳияи ваксинаҳо ва дигар соҳаҳо.

Технологияи намоиши фагҳо бартариҳои зиёдеро пешниҳод мекунад ва онҳоро дар соҳаҳои гуногун татбиқ кардан мумкин аст. Аммо, мушкили асосӣ дар таҳияи антителоҳои рекомбинантӣ бо истифода аз усули намоиши фагҳо мураккабӣ ва арзиши марбут ба ин раванд аст. Ин равиш зарурати ҳамгироии усулҳои биологияи молекулавӣ, аз ҷумла мутатсия, клонкунӣ ва ифода, инчунин таҳлилҳои иммунологӣ, биохимиявӣ ва биофизикиро барои муайян ва тавсифи антителоҳои дилхоҳ ба миён меорад.

Муаррифии антиген як пайванди хеле муҳим аст. Усулҳои муаррифии антиген асосан муаррифии мустақими антиген бо пӯшонидани антиген, муаррифии ғайримустақими антиген бо пӯшонидани антиген, муаррифии антиген тавассути скрининги тамоми ҳуҷайра, муаррифии антиген тавассути липосомаҳо, дискҳои нано-фосфолипидӣ ва VLP-ҳоро дар бар мегиранд.

Усули пӯшонидани мустақим нисбатан содда аст, аммо тағйир додани конформатсияи антиген осон аст ва амалиёти пӯшонидани ғайримустақим мураккаб аст, аммо он метавонад конформатсияи антигенро нигоҳ дорад ва самаранокии муаррифиро беҳтар созад. Скрининги ҳуҷайра метавонад саҳнаи воқеиро дар in vivo тақлид кунад, аммо мушкили пайвастшавии ғайримушаххас вуҷуд дорад. Диски нано-фосфолипид андозаи хурд, самаранокии баланди интиқол ва устувории хуб дорад; VLP-ҳо бо антиген омехта карда мешаванд ё бо антиген печонида мешаванд, ки иммуногении баланд ва бехатарии хуб дорад ва метавонад вокуниши қавии иммуниро ба вуҷуд орад.

Агар консентратсия хеле паст бошад, эҳтимолияти пайвастшавӣ бо фаг коҳиш меёбад, ки боиси паст шудани самаранокии скрининг мегардад. Баръакс, консентратсияи аз ҳад зиёд баланд метавонад эҳтимолияти пайвастшавии ғайримушаххасро зиёд кунад, сигнали заминаро баланд бардорад ва муайян кардани клонҳои мусбатро халалдор кунад.

Барои пешгирӣ аз ҳарорати баланд, кислотаи қавӣ ва ишқорӣ, усули фиксатсияи мулоимро истифода бурдан мумкин аст. Барои кам кардани зарар ба сохтори антиген, усули пӯшонидани ғайримустақим ва системаи биотин-стрептавидин истифода шуданд. Агар антиген сафедаи мембрана бошад, онро дар сатҳи ҳуҷайраҳои солим нишон додан мумкин аст ё барои симулятсияи муҳити мембрана, ба монанди нано-диск, барои нигоҳ доштани конформатсияи табиии сафедаи мембранаи он истифода бурдан мумкин аст.

Илова бар таҷрибаҳои муқаррарӣ, ба монанди ELISA, Western Blotting (WB) ва Immunofluorescence (IF), усулҳои муайянкунии резонанси плазмонии сатҳӣ (SPR) ва интерферометрияи биоқабатӣ (BLI) метавонанд барои назорат кардани равандҳои пайвастшавӣ ва диссотсиатсияи антителоҳо ва антигенҳо дар вақти воқеӣ истифода шаванд, ки имкон медиҳад параметрҳои аффинитет ва кинетикӣ муайян карда шаванд.

Дисплейи фагро метавон барои тавлиди антителоҳои моноклоналии баландсифат барои доираи васеи намудҳои истеҳсолкунандаи антитело, аз ҷумла одамон, мушҳо, каламушҳо, харгӯшҳо, мурғҳо, шутурҳо, алпакаҳо, говҳо, сагҳо, гӯсфандон, маймунҳо ва акулаҳо истифода бурд.

Технологияи сохтани китобхонаҳои антителоҳои муш хуб омӯхта шудааст, аз ҷиҳати хароҷот самаранок аст ва мӯҳлати кӯтоҳи таҷрибавӣ дорад, ки онро барои скрининги аввалияи антителоҳо ва таҳқиқоти асосӣ мувофиқ мегардонад. Антителоҳои харгӯш нисбат ба антителоҳои муш дорои наздикӣ ва хосияти қавӣ буда, доираи васеътари шинохти эпитопҳоро нишон медиҳанд. Антителоҳои инсонро мустақиман аз китобхонаҳои антителоҳои инсонӣ гирифтан мумкин аст ва бо ин роҳ аз аксуламалҳои эҳтимолии иммунӣ, ки ҳангоми ворид кардани антителоҳои гетерологӣ ба бадани инсон метавонанд ба амал оянд, пешгирӣ мекунад. Ин равиш дар таҳқиқот ва таҳияи доруҳо, бахусус дар эҷоди антителоҳои терапевтӣ, арзиши назаррас дорад.

Иммуногенҳои ҳайвонот одатан ба антигени сафеда, антигени полипептидӣ, антигени кислотаи нуклеинӣ ва антигени марбут ба патоген тақсим мешаванд, ки дар байни онҳо антигени марбут ба патоген антигени вирус (зарраи пурраи вирус, сафедаи вирус, сафедаи ғайрисохтории вирус ва ғайра), антигени бактериявӣ (экстракти пурраи бактериявӣ, ҷузъи девори ҳуҷайра, сафедаи ҷудошуда, токсин ва ғайра) ва антигени паразитӣ мебошанд.

Иммуногенҳоро тавассути иваз кардани антигенҳои иммунӣ бо сафедаҳои рекомбинантӣ ва иваз кардани зарраҳои вирусҳои сӯхторхомӯшкунанда бо сафедаҳои сохтории вирусҳо танзим кунед. Тарҳи таҷрибавиро танзим кунед ва миқдори иммуниро тағир диҳед.

Иммуногенӣ метавонад тавассути пайваст кардани антигенҳо бо сафедаҳои интиқолдиҳанда, ба монанди албумини зардоби гов, афзоиш ёбад. Илова бар ин, адъювантҳои иммунӣ, аз ҷумла адъювантҳои Фрейнд ва адъювантҳои алюминий, метавонанд барои дароз кардани мӯҳлати будубош дар in vivo ва ҳавасмандгардонии фаъолсозӣ ва афзоиши ҳуҷайраҳои иммунӣ истифода шаванд ва бо ин васила иммуногенӣ беҳтар карда шавад.

Китобхонаи антителоҳои фаг маҷмӯаи антителоҳои гуногуни фагҳо мебошад, ки бо роҳи ҷамъ кардани маҷмӯи пурраи генҳои минтақаи тағйирёбанда аз антителоҳо ба векторҳои фаг ва ифодаи онҳо дар сатҳи фагҳо ба вуҷуд меоянд. Ин раванд боиси ташаккули китобхонаи антителоҳои фаг мегардад.

Раванди умумии намоиши фаг якчанд марҳилаҳои калидиро дар бар мегирад: ҷудо кардани ҳуҷайраҳои мононуклеарии хуни периферӣ (PBMC) аз ҳайвоноти эмгузаронидашуда, ҷудо кардани РНК-и умумӣ ва транскрипсияи он ба ДНК-и мукаммал (cDNA), тақвияти гени мақсаднок бо истифода аз технологияи реаксияи занҷирии полимеразӣ (PCR), клонидани гени мақсаднок ба вектори фаг ва табдил додани вектор ба ҳуҷайраи мизбон барои ифода. Ин раванд боиси сохтани китобхонаи намоиши фаг мегардад, ки метавонад антителоҳои дорои аффинияти баландро зуд муайян кунад. Баъдан, ин китобхона метавонад ҳамчун манбаи арзишманд барои таҳияи ваксинаҳо, доруҳои терапевтӣ ва реагентҳои ташхисӣ хизмат кунад.

Мувофиқи манбаи китобхонаи антитело, китобхонаҳои антителоҳои фагро метавон ба китобхонаҳои иммунии антителоҳои фаг ва китобхонаҳои антителоҳои фаги табиӣ тақсим кард. Фарқи асосии байни ин ду намуд дар он аст, ки оё ҳайвонҳо эм карда шудаанд ё не. Илова бар ин, китобхонаҳои антителоҳои табиӣ метавонанд тавассути нимсинтез ё синтез тавлид шаванд.

Ду нишондиҳандаи асосӣ барои арзёбии сифати китобхонаи антитело мавҷуданд: иқтидори нигоҳдорӣ ва гуногунрангӣ. Иқтидори калони нигоҳдорӣ дар якҷоягӣ бо гуногунии баланд, скрининги самараноки антителоҳоро бо ҳам наздикии баланд ва ҳам хосият таъмин мекунад.

Дар раванди элютриатсияи биологӣ, китобхонаи намоиш бо ҳадафҳои собит инкубатсия карда мешавад ва сипас барои хориҷ кардани фагҳои ғайриреактивӣ ба таври васеъ шуста мешавад. Конъюгатҳо одатан бо истифода аз маҳлули туршӣ ё намаки зиёд элютсия карда мешаванд ва баъдан барои ғанӣ гардонидан дар ҳуҷайраҳои мувофиқи мизбон тақвият дода мешаванд. Пас аз 3 то 5 даври скрининг, антителоҳо бо аффинияти баланд ба даст оварда мешаванд.

Усулҳои скрининги фагҳо асосан паннинги фазаи сахт, скрининги фазаи моеъ ва скрининги ҳуҷайраро дар бар мегиранд. Ҳангоми интихоби усули мувофиқи скрининг бояд хусусиятҳои молекулаҳои мақсаднок, ҳадафҳои раванди скрининг ва муҳити лабораторӣ ба назар гирифта шаванд.

Скрининги мусбат усули асосии скрининги антителоҳои фаг мебошад, ки ба сафедаҳои мақсаднок пайваст мешаванд. Скрининги манфӣ барои нест кардани антителоҳои ғайримушаххас хизмат мекунад. Дар раванди скрининги антителоҳои фаг, антителоҳои ғайримушаххас метавонанд аз сабаби дахолат аз тамғаи антигени мақсаднок, маводҳо ё дигар антигенҳо бо шабоҳати сохторӣ ба антигени мақсаднок муайян карда шаванд. Дар чунин ҳолатҳо, скрининги манфӣ метавонад самаранокии раванди скринингро афзоиш диҳад.

Усулҳои тасдиқи антитело одатан ELISA, Вестерн-блоттинг (WB), ситометрияи ҷараёнӣ, иммунопресипитатсия (IP), иммунофлуоресценсия (IF), иммуногистохимия ва дигар усулҳои таҷрибавиро дар бар мегиранд. Alpha Lifetech таҷрибаи васеъ дар муайян кардани антитело дорад ва як дастаи касбии таҷрибавӣ дорад, ки самаранокии антителоҳоро дар таҷрибаҳои минбаъда таъмин мекунад.